يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

استكشاف آلية صيغة سان جي تونغ ماي ضد تصلب الشرايين عبر علم الأدوية الشبكي والبروتيوميات

196 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/70080

⸱

أبريل 17, 2026

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Cardiology, the Third Affiliated Clinical Hospital of Changchun University of Chinese Medicine, 2Department of Respiratory, The Affiliated Hospital of Changchun University of Chinese Medicine, 3The Affiliated Hospital of Changchun University of Chinese Medicine

في هذه المقالة

ملخص

تظهر هذه الدراسة أن تركيبة سان جي تونغ ماي تخفف من تصلب الشرايين لدى فئران ApoE-/- من خلال تنظيم استقلاب الجلوكوكورتيكويد الذي يتوسط Hsd11b1، مما يحسن من خلل الدهون والالتهاب الوعائي. تكشف تحليلات علم الأدوية الشبكي المتكامل، والبروتيومكس، والالتحام الجزيئي عن آلية تآزرية متعددة المكونات والأهداف متعددة الأهداف تكمن وراء تأثيراتها المضادة للتصلب الشرايي.

الملخص

هدفت هذه الدراسة إلى توضيح آلية تركيبة سان جي تونغ ماي (SJTMF) ضد تصلب الشرايين (AS)، وهو سبب رئيسي لأمراض القلب والأوعية الدموية. باستخدام نماذج الفأر ApoE، أثبتنا أن SJTMF يثبط بشكل كبير تقدم لويحات AS. من خلال استراتيجية متكاملة لعلم الأدوية الشبكي والبروتيوميات، تم تحديد خمسة مكونات حيوية أساسية: بيتا-سيتوستيرول، نارينجينين، لوتولين، إيزورهامنيتين، و3بيتا-هيدروكسي-24-ميثيلين-8-لانوستين-21-أويك أسيد. في الوقت نفسه، كشفت البروتيوميات عن 129 بروتينا مرتبطا ب AS تم التعبير عنها بشكل تفاضلي. أكد الالتحام الجزيئي تفاعلات ارتباط عالية التقارب بين هذه المكونات والهدف الرئيسي Hsd11b1، حيث أن طاقات الارتباط بينهما جميعها أقل من -5 كيلو كالوري/مول. كشفت التحقيقات الميكانيكية أيضا أن SJTMF قد ينظم استقلاب الجلوكوكورتيكويدات بوساطة Hsd11b1. يساهم هذا التنظيم في تحسين كبير لكل من خلل الدهون والالتهاب الوعائي، مما يثبط تطور الالتهاب الدهني الداخلي. بشكل مجتمع، يظهر هذا العمل لأول مرة الآلية المبتكرة التي تمارس بها صيغة الطب الصيني التقليدية تأثيرات مضادة للحمض النووي من خلال تنظيم تآزري متعدد المكونات لهدف HSD11b1 ، مقدمة رؤى جديدة للتدخل العلاجي.

المقدمة

تصلب الشرايين (AS)، وهو مرض التهابي مزمن يؤثر على الأوعية الدموية الجهازية، يشكل الأساس المرضي الأساسي للأحداث القلبية الدموية والأوعية الدموية الدماغية1. يتضمن مسببه تفاعلات معقدة بين العوامل الوراثية والبيئية والنفسية الاجتماعية والعوامل المرضية متعددة العوامل، وتظهر خصائص متعددة المراحل ومتعددة الجينات. على الرغم من أن الاستراتيجيات العلاجية الحالية - وخاصة عوامل خفض الدهون مثل الستاتينات ومثبطات Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9 (PCSK9) - تقلل بفعالية من مستويات الكوليسترول منخفض الكثافة (LDL-C)، إلا أنها لا تعالج بالكامل خطر الالتهاب المتبقي الذي يدفع الأحداث القلبية الوعائية المتكررة2. علاوة على ذلك، تحد الآثار الجانبية المرتبطة بالعلاج (مثل السكري الجديد، السمية العضلية، ضعف الكبد) الاستخدام طويل الأمد وتكثيف علاج خفض الدهون 3,4. تسلط هذه القيود الضوء على الحاجة إلى طرق تكميلية تستهدف الالتهاب الوعائي مباشرة، بما في ذلك العلاجات المضادة للالتهابات، لتقليل خطر القلب والأوعية الدموية إلى جانب خفض الدهون فقط.

في الطب الصيني التقليدي (TCM)، يندرج AS تحت فئتي "عائق الصدر" (شيونغ بي) و"تراكم الأوعية" (ماي جي)، مع "تشابك البلغم-الجمود" (تانيو هوجي) كجوهر المرض. بتوجيه من مبدأ "العلاج المائي المحول للتجميد" (يونينغ هواشوي)، طور فريقنا البحثي "صيغة سان جيه تونغ ماي (SJTMF)" المكونة من 14 عشبا، بما في ذلك السالفيا ميلتيوريزا (Danshen) وWhitmania pigra Whitman (شويزي)، لحل عكارة البلغم بشكل تآزري، وتبدد السكون، وتعزيز إدرة البول. أظهرت الدراسات السريرية الأولية فعالية SJTMF في تحسين ملفات الدهون بشكل كبير وتثبيت/عكس اللويحات التصلب لدى كبار السن المصابين ب ASالسباتي 5. كشفت التحقيقات التجريبية أيضا عن قدرته على تثبيط تقدم AS من خلال تعديل استقطاب العروسيم البلعمية ومسارات الالتهام الذاتي 6,7. ومع ذلك، فإن خصائص صيغ الطب الصيني التقليدي متعددة المكونات والأهداف والمسارات المتعددة تشكل تحديات في توضيح آلياتها التنظيمية المتكاملة بشكل منهجي باستخدام الأساليب التقليدية التقليدية الاختزالية.

لاستكشاف الآليات الجزيئية التي تتوسط تأثيرات SJTMF المضادة لتصلب الشرايين ومعالجة التحديات، استخدمت هذه الدراسة استراتيجية متعددة التخصصات متكاملة. تم استخدام علم الأدوية الشبكي، الذي صورته هوبكنز 8,9، لبناء شبكة متعددة الأبعاد "مسار المرض من المكونات العشبية-المستهدفة". سهل هذا النهج التنبؤ بالمركبات الفعالة الرئيسية ل SJTMF والأهداف العلاجية المحتملة لتدخل الحمض المقاوم الصوتي، بما يتماشى مع الخصائص التنظيمية الشاملة للطب الصيني التقليدي. وبالإضافة إلى ذلك، قامت تقنية البروتيومكس، التي استفادت من تحليل البروتينات النوعي والكمي عالي الإنتاجية والدقة10، بمراقبة ديناميكية التغيرات في ملف تعبير البروتين المرتبط ب ASبعد تدخل SJTMF في نماذج الحيوانات. مكن ذلك من تحديد جزيئات المؤثرات الرئيسية وأحداث الإشارة، مما وفر أدلة تجريبية للاستكشاف الميكانيكي. لاحقا، أجريت محاكاة الالتحام الجزيئي بدقة عالية لتقييم أنماط الارتباط وطاقات الارتباط بين الأهداف الأساسية التي تنبأت بها علم الأدوية الشبكي والمكونات الحيوية النشطة الرئيسية، مما يوفر أساسا نظريا للتفاعلات المحتملة بين المكون والهدف11. مقارنة بالأساليب البديلة، مثل الاعتماد فقط على توقعات علم الأدوية الشبكي (المعرضة لمعدلات إيجابية كاذبة عالية ونقص التحقق التجريبي)12 أو دمج البروتيوميات فقط مع الالتحام الجزيئي (الذي قد يفشل في التقاط التفاعلات على مستوى النظام التي يتوقعها تحليل الشبكة)، تعالج هذه الاستراتيجية المتكاملة هذه القيود الجوهرية بشكل تآزري13.

من خلال دمج التقنيات متعددة الأبعاد، تهدف هذه الدراسة إلى توضيح الأساس الرئيسي للمادة الدوائية الديناميكية، وشبكة الأهداف الأساسية، والآليات التآزرية متعددة المسارات ل SJTMF بشكل منهجي. وبالتالي، يوفر دعما نظريا مدفوعا بالآليات لتعزيز تحديث الطب الصيني التقليدي وتطوير الأدوية المبتكرة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تم إجراء جميع إجراءات الحيوانات بموافقة لجنة الحيوانات التجريبية في جامعة تشانغتشون للطب الصيني (رقم الموافقة الأخلاقية 2023521). تم تضمين ذكر محدد خال من مسببات الأمراض (SPF) C57BL/6J وفئران ApoE⁻/⁻ (عمرها 5 أسابيع، 18-22 جرام) في الدراسة (رخصة استخدام الحيوانات المختبرية رقم SCXK (JI) 2023-002 وSCXK (SU) 2021-0013). المعلومات المتعلقة بالمواد والأجهزة متوفرة في جدول المواد.

1. علم الأدوية الشبكي

  1. التنبؤ بالمكونات النشطة وأهداف SJTMF
    1. فحص المكونات الفعالة لسالفيا ميلتيورريزا، وباناكس نوتوجينسينغ، وأرتيميسيا سكوباريا، وبوريا كوكوس، وأليسما بلانتاجو-أكواتيكا L، وأموموم فيلوسوم، وألبوم سانتالوم، وحمضيات أورانتيوم، وقشر الحمضيات الشبكية باستخدام التوافر الحيوي الفموي (OB) ≥ 30٪ ونسبة الشبه الدوائي (DL) ≥ 0.18 كمعايير.
    2. فحص المكونات الفعالة لمواد ويتمانيا بيغرا ويتمن، بومبيكس باتريتيكاتوس، بيريوستراكوم سيكادا، كاوليس بامبوساي في تاينيام، وأوفيكالسيتوم الطبية بتطبيق قاعدة ليبينسكي الخمسة، مع المعايير التالية: miLogP ≤ 5، nOHNH ≤ 5، وnOH ≤ 10.
    3. ادمج المركبات المحشوة مع رموز SMILES الخاصة بها للتنبؤ بأهداف المركبات.
      ملاحظة: لمزيد من التفاصيل حول قاعدتي القاعدة المذكورتين أعلاه، راجع جدول المواد.
  2. التنبؤ بالأهداف المتعلقة ب ASوبناء شبكة "هدف المكون الدوائي".
    1. استخدم قاعدة بيانات GeneCards لاسترجاع أهداف الأمراض المرتبطة ب ASها باستخدام مصطلحات مرضية موحدة.
    2. استخدم برنامج فيني 2.1 لتحديد الأهداف المتقاطعة بين SJTMF وAS كأهداف علاجية محتملة ل SJTMF ل AS.
    3. استخدم Cytoscape 3.9.1 لبناء مخطط شبكة "المكون-المكون-الدواء-الهدف".
      ملاحظة: لمزيد من التفاصيل حول قواعد البيانات المذكورة أعلاه، انظر جدول المواد.

2. التكيف

  1. احتوى جميع الفئران في منشآت الحماية من الحماية (24 درجة مئوية؛ رطوبة 50-60٪؛ دورة 12 ساعة من الضوء والظلام). قدم الطعام والماء القياسي بحرية المناسبة. اترك 7 أيام للتكيف قبل التجارب.

3. تحضير SJTMF

  1. حضر تركيبة من 14 عشبة تحتوي: Salvia miltiorrhiza (دان شين) 30 جم، Artemisia scoparia (يين تشين) 10 جرام، Panax notoginseng (سان تشي) 10 جرام، Poria cocos (فو لينغ) 10 جرام، أموموم فيلوسوم (شا رين) 10 جرام، Alisma plantago-aquatica L (زي شي) 30 جرام، Santalum ألبوم L (تان شيانغ) 10 جرام، قشرة الحمضيات الشبكية (تشن بي) 10 جرام، الحمضيات الأورانتيوم (تشي تشياو) 10 جرام، ويتمانيا بيغرا ويتمان (شوي تشي) 10 جرام، بيريوستراكوم سيكاد (تشان توي) 10 جرام، بومبيكس باتريتكاتوس (جيانغ كان) 10 جرام، كاوليس بامبوساي في تينيام (تشو رو) 10 جرام، وأوفيكالسيتوم (هوا روي شي) 30 جم.
  2. المواد العشبية المقطرة (إجمالي 1,800 جرام) 3× مع 8 مجلدات من الماء المقطر (1.5 ساعة لكل استخلاص).
  3. فلتر من خلال الشاش ونايلون ب 100 شبكة.
  4. ترشيح مركز عند 60 درجة مئوية (الكثافة: 1.23-1.27). التركيز الجاف تحت ضغط منخفض عند 70 درجة مئوية.
  5. قم بسحق المستخلص المجفف باستخدام منخل مكون من 80 شبكة (الإنتاجية: 20.6٪).
    ملاحظة: بعد تقريرنشر سابقا 7، تلقت الفئران 3.56 ج∙كجم⁻¹∙يوم⁻¹ من مستخلص SJTMF (تم تطبيعه بمساحة سطح الجسم).

4. تأسيس نموذج

  1. تحفز AS في فئران ApoE باستخدام نظام غذائي عالي الدهون لمدة 12 أسبوعا (HFD؛ 20٪ دهون، 1.25٪ كوليسترول). قس وزن الجسم على فترات 7 أيام لمراقبة الأيض.
  2. خصص فئران C57BL/6J لمجموعة التحكم (ضابطة، نظام غذائي طبيعي + محلول ملحي). قسم الفئران النمذجة الناجحة عشوائيا إلى أربع مجموعات: مجموعة النموذج، مجموعة أتورفاستاتين (0.0026 ملغ/جم أتورفاستاتين)، مجموعة SJTMF-L (جرعة منخفضة من SJTMF، 3.56 ج∙كجم-1∙يوم)، مجموعة SJTMF-H (جرعة عالية من SJTMF، 7.12 ج∙كجم-1∙يوم)7. قم بإجراء جميع التدخلات عبر جرعة موحدة بمقدار 0.4 مل في الصباح لمدة 4 أسابيع.
    ملاحظة: تم إعداد حلول مخزون SJTMF وفقا لبروتوكولنا7 المعتمد. بدأت التدخلات التجريبية في الأسبوع التاسع، حيث حافظت الجرعات الصباحية على الإيقاع الصدري السريري. تم تعريف الفئران بأنها تم نمذجتها بنجاح عندما لوحظت لويحات تصلب شرايين واضحة في الشريان الأبهر من خلال صبغة زيتية أحمر O السائل7.

5. جمع العينات، حصاد وحفظ الشريان الأبهر

ملاحظة: بعد 4 أسابيع من الإعطاء داخل المعدة، صوم جميع الفئران لمدة 12 ساعة (ماء حسب المرض). قس أوزان الجسم النهائية، ثم ضحي بها عن طريق خلع عنق الرحم تحت التخدير.

  1. شق بطن الفأر حتى عملية التزيفويد.
  2. عزل الشريان الأبهر من جذر الشريان الأبهر إلى انقسام الشريان الحرقفي الشائع.
  3. قم بإزالة النسيج الدهني الزائد واقطع الشريان الأبهر على بعد حوالي 1 سم من القوس الأبهري.
  4. ثبت الشريان الأبهر في بارافورمالديهيد أو تجميده بسرعة في النيتروجين السائل.
    ملاحظة: اجمع المصل واحتفظ الأنسجة الأبهرية عند -80 درجة مئوية للتحليل المستقبلي.
  5. التلوين
    1. ضع الأقسام في الزيلين بالتسلسل لمدة 20 دقيقة لكل قسم، مرتين في المجموع؛ ثم ينتقل إلى الإيثانول المطلق لمدة 10 دقائق لكل منهما، مرتين إجمالا. قم بترطيب الأقسام عبر سلسلة إيثانول متدرجة تنازلية (95٪، 90٪، 80٪، 70٪)، 5 دقائق لكل تركيز.
    2. صبغ بالتتابع مع 0.4٪ هيماتوكسيلين لمدة 3-8 دقائق، ثم محلول إيوزين 0.5٪ لمدة 1-3 دقائق.
      ملاحظة: اشطف جيدا بالماء المقطر بين الخطوات.
    3. جفف الأقسام عبر سلسلة إيثانول تصاعدية (95٪ إلى الإيثانول المطلق)، 5 دقائق لكل تركيز. نظف الأقسام بالزيلين لمدة 5 دقائق لكل منها، مرتين إجمالا. اتركه ليجف بالكامل، ثم أثبت براتنج محايد.
    4. راقب تحت المجهر والتقط صورا.

6. تحضير البروتين الكلي من عينات الأنسجة الأبهرية

ملاحظة: تم عزل البروتينات من أنسجة الأبهر لكل من المجموعات التجريبية الثلاث (مجموعة التحكم، مجموعة النماذج، مجموعة SJTMF-H).

  1. قم بتجانس الأنسجة الأبهرية في مخزن التحلل (1.5٪ SDS/100 mM Tris-HCl، pH 8.5)، ثم حضن عند 95 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة لتحقيق إزالة البروتين.
  2. برد العينات، ثم قم بإضعافها على طرد مركزي عند 12,000 جرام × و4 درجات مئوية لمدة 5 دقائق واجمع السوبرناتانت. ترسيب البروتينات في المادة الفائقة باستخدام طريقة ترسيب الأسيتون.
  3. أعد إذابة ترسيب البروتين (8 مولار يوريا/100 ملليمولار تريس-HCl، pH 8.5)، ثم جهز مجموعة اختبار BCA وفقا لتعليمات الشركة المصنعة وحدد تركيز البروتين الكلي انظر جدول المواد).
    ملاحظة: مع نفس كمية البروتين بين عينات مختلفة، تم استخدام المحلول المعاد إذابته لملء جميع العينات بنفس الحجم.
  4. قم بإجراء تقليل البروتين والتكليلة باستخدام TCEP وCAA عند 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة.
  5. أضف التربسين (1:50) إلى عينة البروتين وحضن على حرارة 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة (انظر جدول المواد).
  6. استخدم TFA لضبط درجة الحموضة إلى 6.0 لإنهاء الهضم. قم بطرد العينة بحرارة 12,000 × جرام لمدة 15 دقيقة، ثم تنقية الببتيدات من المادة الفائقة باستخدام عمود إزالة الملح SDB-RPS المصنوع بنفسي (انظر جدول المواد).
    ملاحظة: تم تجفيف إلوات الببتيد بفراغ وتخزينه عند -20 درجة مئوية لاستخدامه لاحقا.

7. الكروماتوغرافيا السائلة - مطيافية الكتلة المزدوجة (LC - MS/MS)

  1. حقن 200 نانوغرام من هضم الببتيد بحجم حقن 1 ميكرولتر على عمود فخ C18 (75 ميكرومتر × 2 سم، 3 ميكرومتر، 100 أوغومتر). ثم تم فصل الببتيدات على عمود تحليلي معكوس طور من نوع C18 (75 ميكرومتر × 15 سم، 1.7 ميكرومتر، 100 أوغومتر) بمعدل تدفق 0.3 ميكرولتر/دقيقة.
  2. استخدم ماء يحتوي على 0.1٪ حمض الفورميك (FA) كطور متحرك A والأسيتونيتريل (ACN) الذي يحتوي على 0.1٪ FA كطور متحرك B (انظر جدول المواد). طبق تدرج خطي من 12٪ إلى 30٪ B خلال 0-12 دقيقة، يليه زيادة من 30٪ إلى 80٪ B خلال 12-15 دقيقة، وحافظ على 80٪ B من 15-18 دقيقة لغسل الأعمدة. اضبط معدل التدفق إلى 0.300 ميكرولتر/دقيقة من 0-15 دقيقة، ثم زد المعدل إلى 0.400 ميكرولتر/دقيقة من 16-18 دقيقة. اضبط جهد الشعيرات الدموية على 1500 فولت.
  3. اكتساب طيف MS و MS/MS على نطاق 100 إلى 1700 م/ز.
  4. امسح حركة الأيونات على نطاق 0.6 إلى 1.6 فولت/سم². اضبط وقت التراكم ووقت التراكم إلى 50 مللي ثانية.

8. تحليل وظائف البروتين

ملاحظة: تم تقاطع البروتينات المعبر عنها بشكل تفاضلي (DEPs) من البروتيوميات مع أهداف رئيسية من علم الأدوية الشبكي، وتم اختيار البروتينات المستهدفة المتداخلة لتحليل مسار الجينات وموسوعة كيوتو للجينات والجينومات (KEGG). تم اعتبار الفئات الوظيفية والمسارات التي تحتوي على P < 0.05 ذات دلالة كبيرة.

  1. حلل بيانات DIA الخام في وضع المكتبة الخالية من المكتبة.
  2. ابحث في ملفات الطيف مقابل قاعدة بيانات تسلسل بروتين الفأر.
  3. حدد المعايير الرئيسية للبحث.
    1. تمكين خيارات توليد الأيونات الأولية لتكوين مكتبة الطيف المتوقعة بالسيليكو.
    2. حدد الإنزيم الذي يسمح بحد أقصى 2 من القطع المفقودة (انظر جدول المواد).
    3. حدد الكرباميدوميثيليشن للسيستين (C) كتعديل ثابت.
    4. اجعل أكسدة الميثيونين (M) والأسيتيل البروتيني في الطرف N كتعديلات متغيرة.
    5. اضبط دقة كتلة المادة الأولية ودقة كتلة MS1 إلى 15 جزء في المليون (15 جزء في المليون الأمريكي).
    6. تمكين المطابقة بين الجولات والاستدلال البروتيني الاستدلالي.
    7. اضبط عتبة معدل الاكتشاف الخاطئ للسلف (FDR) إلى 1٪ للتعرف الموثوق.
  4. قم بتشغيل تحليل DIA-NN (1.8.2 beta 11).
    ملاحظة: قم بقياس مستوى البروتين باستخدام DIA-NN، وإجراء تحليل وتصوير معلوماتي حيوي باستخدام R. تم تحديد DEPs بشكل ملحوظ بواسطة قيمة P من اختبار t وعتبات تغيير الطي الخاصة بستوندت.

9. الالتحام الجزيئي

  1. قم بتنزيل البنية البلورية ثلاثية الأبعاد للبروتين المستهدف من قاعدة بيانات RCSB PDB وحفظها بصيغة PDB؛ وفي الوقت نفسه، قم بتنزيل البنية الجزيئية للمكون النشط الأساسي ل SJTMF من قاعدة بيانات PubChem وحفظها بصيغة SDF.
  2. استخدم PyMOL 2.6.0 لإزالة الماء والهدرجة على بنية البروتين المستهدف، وإزالة الروابط الداخلية غير ذات الصلة، وحفظ بنية البروتين المعالجة بصيغة PDB؛ احصل على معلمات جيوب الالتحام عبر إضافة Getbox في PyMOL، مع تعيين معلمات صندوق الشبكة كما يلي: center_x = -7.2، center_y = 53.4، center_z = 30.6، size_x = 73.7، size_y = 85.9، size_z = 67.2، وعدد تشكيلات الالتحام num_modes = 10.
  3. استيراد ملف البروتين المستهدف المعالج وملف ملف المركب الأساسي ل SJTMF بشكل منفصل إلى AutoDock Tools 1.5.6 لتحويل كلا الملفين إلى صيغة PDBQT، ثم قم بتنفيذ الالتحام الجزيئي باستخدام AutoDock Vina 1.1.2 بناء على معلمات صندوق الشبكة المعرفة أعلاه.
  4. تصور نتائج الالتحام الجزيئي باستخدام PyMOL.

10. الإحصائيات

  1. قم بإجراء تحليل إحصائي.
  2. عبر عن النتائج كمتوسط ± انحراف معياري (SD).
  3. تحديد استخدام اختبار الفرق الصادق للدلالة الدلالية (HSD) لتوكي للتحليل بعد تحليل التحليل بعد تحليل الحمض النووي أحادي الاتجاه عندما تلتقي البيانات بالتجانس الطبيعي والتجانس؛ تطبيق اختبار Games-Howell للبيانات غير المتجانسة. اعتبر النسبة p < 0.05 ذات دلالة إحصائية.
  4. تصور البيانات باستخدام GraphPad Prism8.0.2.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

SJTMF يثبط تكوين اللويحات التصلب في فئران ApoE-/-
لدراسة التأثير المثبط ل SJTMF على AS، تم استخدام نموذج الفأر ApoE-/- لمراقبة تغيرات وزن الجسم وملاحظة التغيرات النسيجية المرضية في الشريان الأبهر. مقارنة بمجموعة النموذج، خفف تدخل SJTMF زيادة الوزن في الفئران التي تتغذى على HFD ب ApoE-/- (الشكل 1A). على وجه التحديد، أظهرت جرعات مختلفة من SJTMF اتجاها نحو انخفاض وزن الجسم ف...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

على الرغم من أن الدراسات السابقة أظهرت أن SJTMF يمارس تأثيرات مضادة للالتهابات ويحفز استقطاب البلاعم في نماذج الفئران ApoE⁻/⁻ 6,7، إلا أن الآليات الجزيئية المحددة التي تقوم عليها نشاطه المضاد للتصلب لا تزال غير واضحة. ينبع مبدأ "نفس العلاج لأمراض مختلفة" في الطب الصيني التقليدي من التأثيرات التآزرية للتنظيم متعدد المكونات والأهداف والمسارات المتعددة. علم الأد...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

المؤلفون لا يفرضون أي تضارب مصالح.

شكر وتقدير

وقد دعمت هذه الدراسة مؤسسة العلوم الطبيعية في مقاطعة جيلين (رقم YDZJ202401644ZYTS).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
2-كلوروأسيتاميد (CAA)سيغما-ألدرتشC0627-100G
4٪ محلول بارافورمالديهايد Fixشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة80096618
0.5– 10 وميكرو؛ إل ميكروبيبتإبندورف4924000029
10 – 100 وميكرو؛ إل ميكروبيبتإبندورف4924000053
20 & ndash; 200 وميكرو؛ إل ميكروبيبتإبندورف4924000061
100 – 1,000 وميكرو؛ إل ميكروبيبتإبندورف4924000088
1000 وميكرو؛ نصائح L Pipetteشركة NEST لايف ساينس، المحدودة.303216
10 وميكرو؛ نصائح L Pipetteشركة NEST لايف ساينس، المحدودة.301016
20 وميكرو؛ نصائح L Pipetteشركة NEST لايف ساينس، المحدودة.302106
أنبوب الطرد المركزي بسعة 15 ملشركة NEST لايف ساينس، المحدودة.601052
أنبوب طرد مركزي بسعة 1.5 ملشركة NEST لايف ساينس، المحدودة.615601
تجربة عالية الإنتاجية - وقاعدة بيانات موجهة - للطب الصيني التقليدي (HERB)/http://herb.ac.cn/v2
الأسيتونيتريل (LC-MS)ثيرمو فيشر العلميA955-4
الأسيتونيل الأسيتونشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة10000418
مياه الأمونياشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة10011028
الأوتوكلافشركة شنغهاي سانشين للأجهزة الطبية المحدودة.YM75
أكلايم بيبماب (75&ميكرو؛ m*2cm، C18، 3&ميكرو؛ m, 100Å)الترمو164535
أورورا ألتيميت (75 وميكرو؛ م*25 سم، 1.6&ميكرو؛ m, 100Å)أوروراAUR3-25075C18-CSI
مجموعة اختبار بروتين BCAشركة سانغون بيوتك (شنغهاي) المحدودة.C503021-0500
الطرد المركزي المبرد عالي السرعة على سطح الطاولةشركة هونان كيتشنغ لمعدات الأدوات المحدودة.H1 - 16KR
بروموفينول بلوشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة71008060
سخان الكتلةآلات هانغتشو ميوDKT-100
الكلوروفورمشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة10006818
نظام تصوير الإضاءة الكيميائيةشركة هانغتشو شينهوا للتكنولوجيا المحدودة.SH - 523
المقعد النظيفشركة سوتشو جينغهوا للمعدات المحدودةSW-CJ-2D
زجاج الغلافشركة جيانغسو شيتاي للمعدات التجريبية المحدودة.10212450C
سايتوسكيب v3.9.1//
DIA-NN (الإصدار 1.8.1)معهد فرانسيس كريكgithub.com/vdemichev/DiaNN
حمام ماء بدرجة حرارة ثابتة بشاشة رقميةشركة تشانغتشو جينان لتصنيع الأدوات المحدودة.HH - W600
ديستينينغ شاكرشركة ووهان لينغسي للتكنولوجيا الحيوية المحدودةTSY-B
آلة إزالة المياهشركة ووهان جونجي للإلكترونيات المحدودةJT-12J
إيوسينشركة ووهان لينغسي للتكنولوجيا الحيوية المحدودةE8090
تضمين بارافينشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة69019361
إيثانول أبسولوتشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة10009218
آلة التضمينشركة ووهان جونجي للإلكترونيات المحدودةJB-P5
منشور جراف باد/8.0.2
حمض الخليك الجليديشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة10000218
بطاقات الجين/https://www.genecards.org/
الجلسرولشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة10010618
الجلايسينبيوفروكس1275GR500
علم الوجود الجيني (GO)/geneontology.org
الهيماتوكسيلينشركة ووهان لينغسي للتكنولوجيا الحيوية المحدودةG1140
هزاز أفقيشركة هايمن تشيلينبايير لتصنيع الأدوات المحدودة، جيانغسوTS - 1
قلم حاجز كاره للماءسيرفيسبيوWG1066-1
HCIمصنع كاشف كيميائي شينيانغGB622-89
كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداءأجيلينت1200
إيزوبروبانوشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة80109218
إيميج-برو بلسالسائبر الإعلاميالإصدار 6.0
نظام التصويرنيكونDS-Fi3
مقص التحليل الدقيق لأشعة IRIS-شركة RWD لايف ساينس، المحدودة.S12004-09
موسوعة كيوتو للجينات والجينومات (KEGG)/www.genome.jp/kegg/
شريحة المجهرشركة نانتونغ ميفيد لايف ساينس المحدودة.PC2-301
فرن الميكروويفشركة جالانز للأجهزة الكهربائية لأفرن الميكروويف المحدودة.P70D20TL-P4
جهاز طرد مركزي صغيرمختبر التنينD1008E
راتنج محايدشركة ووهان لينغسي للتكنولوجيا الحيوية المحدودةG8590
NaClشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة10019318
NCBI/www.ncbi.nlm.nih.gov
مسحوق الخلايا فوق الصوتية غير التلامسيSCIENTZ08-III
ن-بوتانولشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة100052190
الفرنشركة شنغهاي هويتاي لصناعة الأدوات المحدودةDHG-9140A
بوبكيمياء/https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/
مسحوق الفوسفات PBSشركة ووهان لينغسي للتكنولوجيا الحيوية المحدودةP1010
الميكروتوم المرضيشركة لايكا إنسترومنتس المحدودة (شنغهاي)RM2016
الطرد المركزي المحمولشركة ووهان لينغسي للتكنولوجيا الحيوية المحدودةD1008
R 4.5.1//
مخزن تحليل RIPA (1.5 مل)ميلونبيوMA0151
كبريتات الصوديوم الدوديسيل (SDS)سيغما-ألدرتشL3771-500G
سبيدفاكجيميCV200
برمجيات SPSSإحصائيات IBM SPSSالإصدار 22
ربط الملقط بالخياطةشركة RWD لايف ساينس، المحدودة.FC11001R-11
المجهر التحليلي الاستيريوشركة RWD لايف ساينس، المحدودة.77001S
أعمدة الدوران RMCWBIOCW0597S
timsTOF Pro مطياف الكتلةبروكر دالتونيكسtimsTOF Pro
قاعدة بيانات وتحليل أنظمة الطب الصيني التقليدي (TCMSP)/https://tcmspw.com/tcmsp.php
خلاط الحرارةآلات هانغتشو ميوMTC-100
حمض ثلاثي فلورو أسيتيك (TFA)سيغما-ألدرتش299537-500G
هيدروكلوريد تريس(2-كربوكسي إيثيل)فوسفين (TCEP)سيغما-ألدرتشC4706-10G
تريبسنسيغما-ألدرتشT575-31N-10
مدمج الأنسجةآلات هانغتشو ميوMT-30K
تريس(هيدروكسي ميثيل)أمينوميثان (قاعدة تريس)سيغما-ألدرتشT1503-1KG
نظام UltiMate 3000 RSLCnanoثيرمو ساينتفيكألتي ميت 3000 RSLCnano
يوني بروت (2023-01-03)معهد فرانسيس كريكgithub.com/vdemichev/DiaNN
اليورياسيغما-ألدرتش51456-500G
فيني 2.1/https://www.bioinformatics.com.cn/static/others/jvenn/example.html
خلط الدوامةكايلين-بيلفورتكس-5
مقص فاناس النابضشركة RWD لايف ساينس، المحدودة.S11001-08
الماء (LC-MS)ثيرمو فيشر العلميW6-4
زيلينشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة10023418

المراجع

  1. Mensah, G. A., Roth, G. A., Fuster, V. The global burden of cardiovascular diseases and risk factors: 2020 and beyond. J Am Coll Cardiol. 74 (20), 2529-2532 (2019).
  2. Sampson, U. K., Fazio, S., Linton, M. F. Residual cardiovascular risk despite optimal LDL cholesterol reduction with statins: The evidence, etiology, and therapeutic challenges. Curr Atheroscler Rep. 14 (1), 1-10 (2012).
  3. Katzmann, J. L., Packard, C. J., Chapman, M. J., Katzmann, I., Laufs, U. Targeting rna with antisense oligonucleotides and small interfering RNA: JACC state-of-the-art review. J Am Coll Cardiol. 76 (5), 563-579 (2020).
  4. Ward, N. C., Watts, G. F., Eckel, R. H. Statin toxicity. Circ Res. 124 (2), 328-350 (2019).
  5. Xie, T., Guo, J. The effect of the San Jie Tong Mai formula on elderly patients with carotid arteriosclerosis. Chinese Journal of Gerontology. 38 (22), in Chinese 5395-5397 (2018).
  6. Li, P., et al. San Jie Tong Mai Fang protects against atherosclerosis progression by regulating macroautophagy through the PI3K/AKT/mTOR signaling pathway. J Cardiovasc Pharmacol. 82 (4), 333-343 (2023).
  7. Han, H., et al. Mechanism of san jie tong mai fang in atherosclerosis attenuation by JAK/STAT-mediated inhibition of macrophage M1 polarization. J Vis Exp. (221), e68546(2025).
  8. Hopkins, A. L. Network pharmacology. Nat Biotechnol. 25 (10), 1110-1111 (2007).
  9. Hopkins, A. L. Network pharmacology: The next paradigm in drug discovery. Nat Chem Biol. 4 (11), 682-690 (2008).
  10. Vogel, C., Marcotte, E. M. Insights into the regulation of protein abundance from proteomic and transcriptomic analyses. Nat Rev Genet. 13 (4), 227-232 (2012).
  11. Pinzi, L., Rastelli, G. Molecular docking: Shifting paradigms in drug discovery. Int J Mol Sci. 20 (18), (2019).
  12. Huang, T., et al. Approaches in studying the pharmacology of Chinese medicine formulas: Bottom-up, top-down-and meeting in the middle. Chin Med. 13, 15(2018).
  13. Zhao, P., et al. Integration of transcriptomics, proteomics, metabolomics, and systems pharmacology data to reveal the therapeutic mechanism underlying the Chinese herbal BuFei Yishen formula for the treatment of chronic obstructive pulmonary disease. Mol Med Rep. 17 (4), 5247-5257 (2018).
  14. Geng, X., et al. Determining the mechanism of action of the qishan formula against lung adenocarcinoma by integration of network pharmacology, molecular docking, and proteomics. Medicine (Baltimore). 102 (13), e33384(2023).
  15. Ru, J., et al. TCMSP: A database of systems pharmacology for drug discovery from herbal medicines. J Cheminform. 6, 13(2014).
  16. Li, H., et al. A network pharmacology approach to determine active compounds and action mechanisms of ge-gen-qin-lian decoction for treatment of type 2 diabetes. Evid Based Complement Alternat Med. 2014, 495840(2014).
  17. El Omari, N., et al. Unveiling the molecular mechanisms: Dietary phytosterols as guardians against cardiovascular diseases. Nat Prod Bioprospect. 14 (1), 27(2024).
  18. Feng, S., et al. Intake of stigmasterol and β-sitosterol alters lipid metabolism and alleviates NAFLD in mice fed a high-fat western-style diet. Biochim Biophys Acta Mol Cell Biol Lipids. 1863 (10), 1274-1284 (2018).
  19. Bodet, C., La, V. D., Epifano, F., Grenier, D. Naringenin has anti-inflammatory properties in macrophage and ex vivo human whole-blood models. J Periodontal Res. 43 (4), 400-407 (2008).
  20. Chtourou, Y., Slima, A. B., Makni, M., Gdoura, R., Fetoui, H. Naringenin protects cardiac hypercholesterolemia-induced oxidative stress and subsequent necroptosis in rats. Pharmacol Rep. 67 (6), 1090-1097 (2015).
  21. Luo, Y., Shang, P., Li, D. Luteolin: A flavonoid that has multiple cardio-protective effects and its molecular mechanisms. Front Pharmacol. 8, 692(2017).
  22. Luo, Y., et al. Isorhamnetin attenuates atherosclerosis by inhibiting macrophage apoptosis via PI3K/Akt activation and HO-1 induction. PLoS One. 10 (3), e0120259(2015).
  23. Xu, S., et al. Exploring the mechanisms of guizhifuling pills in the treatment of coronary spastic angina based on network pharmacology combined with molecular docking. Medicine (Baltimore). 103 (29), e39014(2024).
  24. Khalaf, K., et al. Cellular aspects of immunity involved in the development of atherosclerosis. Front Immunol. 16, 1461535(2025).
  25. Kadowaki, T. Insights into insulin resistance and type 2 diabetes from knockout mouse models. J Clin Invest. 106 (4), 459-465 (2000).
  26. Ginsberg, H. N. Insulin resistance and cardiovascular disease. J Clin Invest. 106 (4), 453-458 (2000).
  27. Taskinen, M. R. Diabetic dyslipidaemia: From basic research to clinical practice. Diabetologia. 46 (6), 733-749 (2003).
  28. Kamagate, A., et al. Foxo1 mediates insulin-dependent regulation of hepatic VLDL production in mice. J Clin Invest. 118 (6), 2347-2364 (2008).
  29. Mulvihill, E. E., et al. Nobiletin attenuates VLDL overproduction, dyslipidemia, and atherosclerosis in mice with diet-induced insulin resistance. Diabetes. 60 (5), 1446-1457 (2011).
  30. Rask-Madsen, C., King, G. L. Mechanisms of disease: Endothelial dysfunction in insulin resistance and diabetes. Nat Clin Pract Endocrinol Metab. 3 (1), 46-56 (2007).
  31. Han, S., et al. Macrophage insulin receptor deficiency increases ER stress-induced apoptosis and necrotic core formation in advanced atherosclerotic lesions. Cell Metab. 3 (4), 257-266 (2006).
  32. Rask-Madsen, C., et al. Loss of insulin signaling in vascular endothelial cells accelerates atherosclerosis in apolipoprotein E null mice. Cell Metab. 11 (5), 379-389 (2010).
  33. Braverman, J., Stanley, S. A. Nitric oxide modulates macrophage responses to mycobacterium tuberculosis infection through activation of hif-1α and repression of nf-κb. J Immunol. 199 (5), 1805-1816 (2017).
  34. Cao, C., et al. Ikkε knockout prevents high-fat diet-induced arterial atherosclerosis and NF-κB signaling in mice. PLoS One. 8 (5), e64930(2013).
  35. Gliozzi, M., et al. Modulation of nitric oxide synthases by oxidized LDLs: Role in vascular inflammation and atherosclerosis development. Int J Mol Sci. 20 (13), (2019).
  36. Chantong, B., Kratschmar, D. V., Nashev, L. G., Balazs, Z., Odermatt, A. Mineralocorticoid and glucocorticoid receptors differentially regulate NF-κB activity and pro-inflammatory cytokine production in murine BV-2 microglial cells. J Neuroinflammation. 9, 260(2012).
  37. Rask, E., et al. Tissue-specific dysregulation of cortisol metabolism in human obesity. J Clin Endocrinol Metab. 86 (3), 1418-1421 (2001).
  38. Livingstone, D. E., et al. Understanding the role of glucocorticoids in obesity: Tissue-specific alterations of corticosterone metabolism in obese Zucker rats. Endocrinology. 141 (2), 560-563 (2000).
  39. Kipari, T., et al. 11β-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 deficiency in bone marrow-derived cells reduces atherosclerosis. Faseb J. 27 (4), 1519-1531 (2013).
  40. Charo, I. F., Taubman, M. B. Chemokines in the pathogenesis of vascular disease. Circ Res. 95 (9), 858-866 (2004).
  41. Hadoke, P. W., Kipari, T., Seckl, J. R., Chapman, K. E. Modulation of 11β-hydroxysteroid dehydrogenase as a strategy to reduce vascular inflammation. Curr Atheroscler Rep. 15 (5), 320(2013).
  42. Allerheiligen, S. R. Next-generation model-based drug discovery and development: Quantitative and systems pharmacology. Clin Pharmacol Ther. 88 (1), 135-137 (2010).
  43. Fleisher, B., Brown, A. N., Ait-Oudhia, S. Application of pharmacometrics and quantitative systems pharmacology to cancer therapy: The example of luminal a breast cancer. Pharmacol Res. 124, 20-33 (2017).
  44. Leil, T. A., Ermakov, S. Editorial: The emerging discipline of quantitative systems pharmacology. Front Pharmacol. 6, 129(2015).
  45. Zha, X., Ji, R., Li, Y., Cao, R., Zhou, S. Network pharmacology, molecular docking, and molecular dynamics simulation analysis reveal the molecular mechanism of halociline against gastric cancer. Mol Divers. 29 (5), 4693-4703 (2025).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

آلية تصلب الشرايينتحليل البروتومياتفئران ApoE المعطلة جينياًالمكونات النشطة بيولوجياًالالتحام الجزيئياستقلاب الجلوكوكورتيكويدالالتهاب الوعائيهدف Hsd11b1
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.