Method Article

تطوير والتحقق من صحة طريقة سريعة لقياس الكارفيلزوميب في البلازما من مرضى الورم النخاعي المتعدد

DOI:

10.3791/70167

⸱

May 12th, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1College of Traditional Chinese Medicine, Yunnan University of Chinese Medicine, 2Department of Pharmacy, Second Affiliated Hospital of Naval Medical University, 3Department of Rehabilitation, Second Affiliated Hospital of Naval Medical University, 4School of Pharmacy, Shanghai University of Medicine and Health Sciences

* These authors contributed equally

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هدفت هذه الدراسة إلى تطوير والتحقق من طريقة الكروماتوغرافيا السائلة السريعة والحساسة - مطيافية الكتلة المتتالية (LC-MS/MS) لقياس كمية الكارفيلزوميب في بلازما الإنسان. تدعم الطريقة المعتمدة بالكامل مراقبة الأدوية العلاجية لدى مرضى الورم النخاعي المتعدد، مما يمكن من تحسين الجرعة بشكل شخصي.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

كارفيلزوميب، وهو مثبط بروتيازوم من الجيل الثاني، يتطلب مراقبة علاجية للأدوية (TDM). هدفت هذه الدراسة إلى تطوير والتحقق من صحة طريقة الكروماتوغرافيا السائلة - مطيافية الكتلة المتتالية (LC-MS/MS) الحساسة والقوية لقياس كمية الكارفيلزوميب في بلازما الإنسان. تمت معالجة عينات البلازما باستخدام ترسيب البروتين باستخدام الأسيتونيتريل (ACN). تم تحقيق الفصل الكروماتوغرافي على عمود بحجم18 درجة مئوية (2.1 مم × 100 مم، 3.5 ميكرومتر) يحافظ عليه عند 40 درجة مئوية، مع طور متحرك مكون من ACN وأسيتات الأمونيوم 10 mmol/L في الماء (80:20، فولت/فولت) يتم تسليمه بمعدل تدفق 0.35 مل/دقيقة. أظهرت الطريقة خطية ممتازة على نطاق تركيز يتراوح بين 2.00-1000.00 نانوغرام/مل. بالإضافة إلى ذلك، لوحظت دقة ونتائج عالية خلال اليوم وبين اليوم، حيث تراوحت معدلات استرداد الكارفيلزوميب بين 84.1٪ و93.0٪. تمكن هذه الطريقة المعتمدة من LC-MS/MS من تحديد تركيزات الكارفيلزوميب في البلازما بدقة وكفاءة وحساسية لدى مرضى الورم النخاعي المتعدد، مما يدعم تحسين العلاج القائم على الكارفيلزوميب.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الورم النخاعي المتعدد (MM) هو ورم خبيث دموي يتميز بالتكاثر المستنسخ لخلايا البلازما في نخاع العظم1. يمثل ثاني أكثر الأورام الدموية شيوعا عالميا،2، حيث يمثل حوالي 10٪ من جميع سرطانات الدم3. على مر السنين، أدت التطورات في العلاج الدوائي، بما في ذلك إدخال مثبطات البروتيازوم، وأدوية تعديل المناعة، والأجسام المضادة وحيدة النسيلة، إلى تحسين النتائج العلاجية. ومع ذلك، لا يزال عدد كبير (20٪-30٪) من مرضى MM يعانون من تحديات مثل البقاء على قيد الحياة القصير بدون تقدم (PFS)4,5 من التفاعلات السلبية (ADRs)، ومقاومة الأدوية، والانتكاس6.

بورتيزوميب، أول مثبط للبروتيازومرقم 7، غير المشهد العلاجي لل MM. على الرغم من فعاليته، فإن غالبية المرضى في النهاية يطورون مرضا انتكاسيا أو مقاوما للعلاج، غالبا ما يصاحبه مقاومة بورتيزوميب 8,9 ومعدلات استجابة علاجية وانخفاض في معدلات البقاءعلى قيد الحياة 10,11. تؤكد هذه التحديات الحاجة الملحة إلى أساليب علاجية مبتكرة لتحسين النتائج في MM. يوفر Carfilzomib، وهو مثبط بروتيازوم من الجيل الثاني معتمد من إدارة الغذاء والدواء، ملفا أكثر استقرارا في الحركية الدوائية، مما يمكن من كبت النشاط المشابه للكيموتريبسين بشكل مستمر ويوفر تأثيرات قوية لمضادات المييلوما المييليومي. عادة ما ينصح به لمرضى MM الذين خضعوا على الأقل لخطين علاجيين سابقين، بما في ذلك العلاج بالبورتيزوميب ودواء معدل المناعة 1,11. أظهرت الأبحاث أن الكارفيلزوميب يحقق تثبيط بروتيازوم أكثر قوة في خلايا الورم النخاعي مقارنة بالبورتيزوميب ويمتلك القدرة على التغلب على مقاومة بورتيزوميب12,13.

تشمل الطرق الأكثر استخداما لقياس تركيزات الأدوية في المصفوفات البيولوجية الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء - الكشف فوق البنفسجي (HPLC-UV)، واختبار التوربنت المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)، والكروماتوغرافيا السائلة - مطيافية الكتلة التانديم (LC-MS/MS)14. على الرغم من أن HPLC-UV يوفر بساطة تشغيلية وتكلفة منخفضة، إلا أن فائدته محدودة بانخفاض الحساسية والانتقائية نسبيا. وبالتالي، لا يزال القياس الدقيق للمحللات المستهدفة، خاصة عند تركيزات منخفضة أو ضمن مصفوفات بيولوجية معقدة، تحديا15. يظهر ELISA حساسية عالية. ومع ذلك، يواجه تطبيقه عدة قيود، منها عملية تطوير طويلة، والاعتماد على الأجسام المضادة عالية الجودة، والقابلية للتفاعل المتقاطع مع مركبات متشابهة هيكليا في العينة. هذه العوامل مجتمعة تؤثر على خصوصية الاختبار16. على النقيض من ذلك، يقدم LC-MS/MS انتقائية استثنائية، وحساسية فائقة، وسرعة تحليل سريعة. هذه المزايا ترسخها كمنهجية المعيار الذهبي لمراقبة الأدوية العلاجية (TDM) والتحقيقات الدوائية17. يتميز كارفيلزوميب بخصائص ارتباط واسع النطاق ببروتين البلازما، وضعف استقراره في الجسم الحي ، ومؤشر علاجي ضيق. يمكن لتقنية LC-MS/MS إجراء تحليل كمي سريع للمركبة المستهدفة، وتقليل تأثير المصفوفة بشكل فعال، وتوفير أساس علمي لإعطاء الدواء السريري بدقة.

مستوى التعرض للدواء في الكارفيلزوميب مرتبط ارتباطا وثيقا بتأثيره العلاجي وADRs18,19. للكارفيلزوميب خاصية تعتمد على الجرعة20، ويرتفع مستوى تعرضه إيجابيا مع الجرعة في الجسم، مما قد يؤثر مباشرة على تأثيره العلاجي. أظهرت دراسة أن معدل الاستجابة الكاملة (CR) للكارفيلزوميب في علاج MM كان 28٪، ومعدل الاستجابة الجزئية الجيدة جدا (VGPR) كان 73٪، ومعدل الاستجابة الإجمالي (ORR) 93٪21. بالإضافة إلى ذلك، مقارنة بمجموعة الضابطة، زادت نسبة السمية القلبية لدى المرضى الذين عولجوا بالكارفيلزوميب بشكل ملحوظ، بينما لم يكن هناك تغيير كبير في الاعتلال العصبي الطرفي. كما ذكرت دراسة أخرى فعالية وسلامة الكارفيلزوميب في علاج MM وأكدت أن الكارفيلزوميب قد يزيد من خطر السمية القلبية معتحسين التأثير العلاجي. لذلك، ترتبط فعالية ومعدلات ADR للكارفيلزوميب بمستوى التعرض. حتى الآن، تم الإبلاغ عن عدد قليل من طرق LC-MS/MS المعتمدة لقياس كمية الكارفيلزوميب في بلازما الإنسان، خصوصا تلك التي تستوفي معايير التحقق التحليلية الحيوية الصارمة (مثل إرشادات إدارة الغذاء والدواء). تركز الدراسات الحالية بشكل أساسي على النماذج الحيوانية أو المصفوفات البيولوجية الأخرى23,24، مما يبرز فجوة في الاختبارات السريرية القابلة للتطبيق لعلاج TDM لدى مرضى MM.

لذلك، هناك حاجة ملحة لإنشاء اختبار سريع ودقيق وحساس لمراقبة تركيزات الكارفيلزوميب لدى مرضى MM لتحسين فائدته العلاجية وملف سلامتها. في هذا العمل، طورنا وأكدنا طريقة موثوقة ل LC-MS/MS قادرة على قياس الكارفيلزوميب في بلازما الإنسان خلال 3 دقائق، مما أظهر حساسية ممتازة وقابلية للتكرار. تم تطوير هذه الطريقة لعلاج TDM للكارفيلزوميب في MM، وتدعم تحسين الجرعة وتقييم الاستجابة للتعرض. يجب أن يكون المستخدمون على دراية بعدم استقرار الدواء في البلازما؛ يتطلب القياس الدقيق معالجة العينات خلال 4 ساعات من سحب الدم.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت الموافقة على هذا البروتوكول البحثي من قبل لجنة الأخلاقيات في المستشفى الثاني للجامعة الطبية البحرية (مستشفى تشانغتشنغ في شنغهاي). جميع المرضى المسجلين في الدراسة وقعوا على الموافقة المستنيرة.

1. أجهزة LC-MS/MS

  1. استخدم نظام كروماتوغرافيا سائل فائق الأداء (UHPLC) مرتبط بمطياف كتلة ثلاثي رباعي الأقطاب مزود بمصدر تأين الكهروبرشي (ESI) لتطوير الطريقة وتحليل العينات.
  2. قم بتكوين نظام UHPLC ليشمل جهاز إزالة غاز عبر الإنترنت، ومضخة ثنائية، وسامبلر تلقائي، وفرن عمودي.
  3. إجراء جمع البيانات ومعالجتها باستخدام برنامج جمع البيانات الخاص بالشركة المصنعة للجهاز.

2. الظروف الكروماتوغرافية السائلة

  1. تحقيق فصل كروماتوغرافي باستخدام عمود ZORBAX-SB C18 (2.1 مم × 100 مم، 3.5 ميكرومتر).
  2. حافظ على درجة حرارة العمود عند 40 درجة مئوية.
  3. توصيل السائل المتساوي مع طور متحرك يتكون من 20٪ 10 مل/لتر أسيتات الأمونيوم في الماء و80٪ ACN.
  4. اضبط معدل التدفق إلى 0.35 مل/دقيقة.
  5. ضمان أشكال الذروة المتماثلة وأوقات الاحتفاظ المناسبة لكل من المحلل والمعيار الداخلي (IS) تحت هذه الظروف.
    ملاحظة: تم اختيار Carfilzomib-d8 كنوع IS بسبب تشابه هيكلي مع الكارفيلزوميب، مما يضمن استعادة الاستخلاص المماثلة، والسلوك الكروماتوغرافي، وكفاءة التأين.
  6. اضبط إجمالي مدة العرض إلى 3.0 دقائق.

3. شروط مطيافية الكتلة

  1. شغل مطياف الكتلة في وضع ESI سالب.
  2. اضبط جهد الشعيرات الدموية على -6000 فولت.
  3. استخدم النيتروجين كغاز مجهز وغاز تجفيف.
  4. استخدم النيتروجين عالي النقاء كغاز تصادم عند ضغط 0.2 ميغاباسكال.
  5. حافظ على ضغط جهاز التنشاق عند 20 رطل لكل بوصة مربعة.
  6. سخن غاز الجفاف إلى 400 درجة مئوية ووزعه بمعدل تدفق 10 لتر/دقيقة.
  7. اضبط درجة حرارة غاز الغلاف إلى 350 درجة مئوية، مع معدل تدفق 12 لتر/دقيقة.
  8. جمع البيانات في وضع مراقبة تفاعلات متعددة (MRM).
  9. الحصول على أطياف أيونات المنتج للكارفيلزوميب (الشكل 1A) وIS (الشكل 1B) لتوضيح أنماط تجزئتهما.
  10. استخدم وضع المسح MS2 لتحديد الأيون الأب.
  11. استخدم وضع شريحة MS2 لتحسين جهد Fragmentor.
  12. استخدم وضع أيونات المنتج لتحديد طاقة التصادم المثلى (CE).
  13. تفصيل معاملات مطيافية الكتلة المحسنة للكارفيلزوميب ونظام IS (الجدول 1).

4. عينات المعايرة ومراقبة الجودة

  1. تحضير محلول مخزن من الكارفيلزوميب (1.0 ملغ/مل) عن طريق وزن دقيق 2.0 ملغ من الكارفيلزوميب في قارورة حجمية بحجم 2 مل وإذابتها في 2 مل من الميثانول (MeOH).
    تحذير: MeOH قابل للاشتعال وسام. عند التشغيل، يجب أن يتم ذلك باستخدام غطاء بخار لمنع استنشاق الأبخرة أو ملامسة الجلد. استخدم معدات الحماية الشخصية المناسبة، بما في ذلك القفازات وحماية العينين/الوجه.
  2. خزن محلول المخزن عند -80 درجة مئوية.
  3. توليد حلول عاملة من خلال التخفيف التسلسلي للمحلول الأصلي بنسبة 10٪ MeOH لتحقيق تركيزات 100.0 ميكروغرام/مل، 10.0 ميكروغرام/مل، و1.0 ميكروغرام/مل.
  4. حدد معايير المعايرة عن طريق إضافة البلازما الفارغة للمحاليل الفعالة.
  5. قم بتخفيف البلازما المسننة بالبلازما الفارغة بنسبة 1:9 (v/v) للحصول على تركيزات نهائية 2.0، 5.0، 50.0، 200.0، 500.0، 750.0، و1000.0 ng/mL.
  6. تحضير عينات مراقبة الجودة (QC) بشكل مستقل باستخدام نفس الطريقة بتركيزات 5.0 نانوغرام/مل (منخفض)، 200.0 نانوغرام/مل (متوسط)، و750.0 نانوغرام/مل (عالي).

5. تحضير العينة

  1. معالجة عينات البلازما مسبقا (100 ميكرولتر) بإضافة 20 ميكرولتر من محلول حمض الفوسفوريك بنسبة 4٪.
    تحذير: حمض الفوسفوريك يسبب التآكل. ارتد قفازات، ونظارات أمان، ومعطف مختبر لمنع التواصل مع الجلد والعين. في حالة التلامس، اشطف فورا بكميات كبيرة من الماء.
  2. خلط العينة بالدوامة لمدة دقيقتين بأقصى سرعة باستخدام خلاط دوامة مختبر قياسي.
  3. أضف 200 ميكرولتر من ACN، لضمان احتوائه على محلول IS بتركيز 200.0 نانوغرام/مل، إلى الخليط25.
    تحذير: ACN قابل للاشتعال، متقلب وسام. يجب تنفيذ جميع العمليات في غطاء بخاري والحفاظ على البعد عن مصادر الحرارة واللهب. استخدم معدات الحماية الشخصية المناسبة، بما في ذلك القفازات وحماية العينين/الوجه.
  4. أعيد دوامة الخليط المجمع.
  5. قم بعمل الطرد المركزي للخليط عند 12,500 × جرام لمدة 10 دقائق عند 4 درجات مئويةو25.
  6. اجمع 100 ميكرولتر من السوبرناتانت.
  7. اجمع المادة الفائقة بسعة 100 ميكرولتر مع 100 ميكرولتر من الماء.
  8. انقل المحلول الناتج إلى قارورة HPLC مزودة بإدخال زجاجي.
  9. حقن 10 ميكرولتر من المحلول النهائي في نظام LC-MS/MS للتحليل.

6. تقييم الخصوصية

  1. تقييم الخصوصية من خلال مقارنة استجابات الكارفيلزوميب وIS في ست دفعات مختلفة من البلازما الفارغة، وبلازما IS-spiked، وعينة الحد الأدنى للقياس (LLOQ)، وعينات البلازما الأصلية.
  2. اعتبر التداخل مقبولا إذا كانت الاستجابة أقل من 15٪ من LLOQ للمحلل وأقل من 5٪ من استجابة IS.

7. تقييم الخطية

  1. قيم الخطية من خلال تحليل ثلاث مجموعات من معايير المعايرة في أيام مختلفة (على الأقل يومين).
  2. استخدم نموذج انحدار خطي موزون لأقل مربعات لتوليد منحنيات معايرة بناء على ستة معايير معايرة على الأقل.
  3. عرف معيار التركيز الأدنى بأنه LLOQ.
  4. يتطلب أن تكون التركيزات المحسوبة بعكس الإعداد لكل معيار ضمن ± 15٪ من قيمه الاسمية، مع تحمل ± 20٪ لمعيار LLOQ.

8. تحديد الدقة والدقة

  1. تحديد الدقة والدقة خلال اليوم وبين اليوم من خلال تحليل خمس نسخ من عينات مراقبة الجودة بثلاثة مستويات تركيز وعينة LLOQ على الأقل في يومين مختلفين.
  2. الدقة التعبيرية كانحراف معياري نسبي (RSD٪)، مما يتطلب أن تكون ≤ 15٪ لعينات مراقبة الجودة و20٪ ≤ لاختبار LLOQ.
  3. تعبر عن الدقة كخطأ نسبي (RE٪)، وتتطلب أن تكون ضمن ± 15٪ لعينات مراقبة الجودة و20٪ ± لاختبار LLOQ.

9. الاسترداد وتحديد تأثير المصفوفة

  1. تحديد الاسترداد بمقارنة مساحة الذروة للكارفيلزوميب التي تم دفعها إلى البلازما قبل الاستخلاص مع منطقة الذروة التي تم دفعها إلى المصفوفة المستخرجة بنفس التركيز.
  2. تقييم تأثير المصفوفة بمقارنة مساحة ذروة الكارفيلزوميب المدمجة في المصفوفة المستخرجة مع مساحة ذروة الكارفيلزوميب في محلول مرتب بنفس التركيز.
  3. يشير إلى وجود تأثير ثابت لمصفوفة البلازما الفارغة على إشارة المحلل إذا كانت نسبة RSD٪ لعامل تأثير المصفوفة أقل من 15٪.

10. تقييم الانتقال

  1. تقييم النقل عن طريق حقن عينة فارغة مباشرة بعد أعلى معيار معايرة لاكتشاف أي إشارة تحليلية متبقية من الحقن السابق.
  2. اعتبر الانتقال مقبولا إذا كانت استجابة الكارفيلزوميب في العينة الفارغة أقل من 20٪ من استجابة LLOQ وأقل من 5٪ من استجابة IS.

11. تقييم تأثير التخفيف

  1. تقييم تأثير التخفيف عن طريق تخفيف عينات البلازما الشائكة ذات التركيزات التي تتجاوز الحد الأعلى للقياس (ULOQ) باستخدام بلازما فارغة لجعل التركيز ضمن نطاق المعايرة.
  2. قارن التركيز المقاس بالتركيز الاسمي.

12. تقييم الاستقرار

  1. تقييم الاستقرار من خلال تحليل عينات مراقبة الجودة عند ثلاثة مستويات تركيز تحت ظروف تخزين مختلفة.
  2. خزن عينات مراقبة الجودة في درجة حرارة الغرفة وحللها بعد 6 ساعات.
  3. تخزين العينات المعالجة في جهاز الأخذ التلقائي وتحليل العينات عند 0 و2 و4 و6 ساعات.
  4. تخضع عينات مراقبة الجودة إلى ثلاث دورات تجمد وذوبان عن طريق التخزين بالتناوب عند −20 درجة مئوية ودرجة حرارة الغرفة، ثم تحللها.
  5. تخزين عينات مراقبة الجودة عند −80 درجة مئوية لمدة شهرين، ثم قم بتحليلها.
  6. قارن التركيزات المقاسة مع القيم الاسمية وتأكد أن الانحرافات ضمن ±15٪ (RE٪).

13. تسجيل المرضى وجمع العينات

  1. احصل على موافقة مكتوبة ومستنيرة من جميع المرضى.
  2. سجل المرضى المصابين ب MM وعالجهم بالكارفيلزوميب.
  3. اجمع عينات دم فور إعطاء الدواء (الحقن الوريدي لمدة 30 دقيقة).
  4. احصل على عينات بلازما عن طريق الطرد المركزي لعينات الدم المجمعة في أنابيب EDTA-3K عند 4500 × جرام لمدة 10 دقائق عند 4 درجات مئوية.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تحسين LC-MS/MS

لتحسين اكتشاف الكارفيلزوميب، تمت مقارنة قيم استجابة المحلل تحت أوضاع التأين الإيجابية والسالبة. أعطى وضع التأين السلبي استجابة أعلى للكارفيلزوميب مقارنة بنمط التأين الإيجابي، ولذلك تم اختياره للتحليل لاحقا. قارنا أداء أعمدة C8 وC18 وT3-C18 لاختيار الأعمدة المثلى. قدم عمود C18 أفضل شكل واستجابة ذروة للكارفيلزوميب. من خلال تحسين تدرج الشفافية، تم تقليل وقت الاحتفاظ بالكارفيلزوميب من 6.0 ...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

على عكس طرق HPLC-UV وELISA التقليدية، يوفر LC-MS/MS انتقائية وحساسية وسرعة استثنائية، مما يعالج بفعالية حدود أسلافه. تعزز هذه المزايا دورها كتقنية المعيار الذهبي لتحليل الأدوية في المصفوفات الحيوية المعقدة، خاصة في التحقيقات الحراكية الدوائية والديناميكية الدوائية17. لقد طورنا وأكدنا طريقة LC-MS/MS لقياس الكارفيلزوميب في بلازما الإنسان. ميزة عملية رئيسية لهذه الطريقة هي سهولة تحضير العينات. يتضمن فقط خطوة ترسيب بروتينية واحدة باستخدام حجم مزدوج من ACN وخطوة تخفيف ...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعلن المؤلفون أنه لا توجد لديهم مصالح مالية متنافسة معروفة أو تضارب مصالح آخر.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد دعم هذا العمل مؤسسة بيثون الخيرية: تمويل بناء القدرات لأبحاث الأدوية في الصين اللامعة (Z04JKM2023E040)، ومشاريع التعاون والتبادل الدولي (رقم 2014DFA33010)، وبرنامج المواهب الرائدة في شنغهاي ضمن خطة المواهب الشرقية (SHSLJRC-TX)

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
الأسيتونيتريل (ACN)شركة ميرك (دارمشتات، ألمانيا)34888درجة LC-MS
أسيتات الأمونيومشركة ميرك (دارمشتات، ألمانيا)9689نقاء التحليل: ≥ 99.0%
توازن التحليلسارتوريوس (ألمانيا))الدقة: 0.01 ملغ
العمود التحليليتقنيات أجيلينت (الولايات المتحدة الأمريكية)Agilent ZORBAX SB-C18، 2.1 & times؛ 100 مم، 3.5 وميكرو؛ m
كارفيلزوميبشنغهاي يواني للتكنولوجيا الحيوية (شنغهاي، الصين)868540-17-4تحليل العينة القياسية، النقاء > 99٪
كارفيلزوميب-d8شنغهاي يواني للتكنولوجيا الحيوية (شنغهاي، الصين)تحليل العينة القياسية، النقاء > 98٪
برامج جمع البياناتتقنيات أجيلينت (الولايات المتحدة الأمريكية)برنامج معالجة بيانات Agilent Masshunter (الإصدار 6.0)
برامج تحليل البياناتتقنيات أجيلينت (الولايات المتحدة الأمريكية)برنامج التحليل الكمي Agilent MassHunter (الإصدار 10.1)
الماء المقطرشركة شنتشن واتسونز للمياه المقطرة، المحدودة (شنتشن، الصين)درجة LC-MS
قوارير HPLC والقوارير الإدخالاتشركة شنغهاي تايتان تكنولوجي المحدودة (شنغهاي، الصين))-
نظام الكروماتوغرافيا السائلةتقنيات أجيلينت (الولايات المتحدة الأمريكية)تتضمن سلسلة أجيلينت 1200 مضخات ثنائية، مزيل غاز عبر الإنترنت، جهاز أخذ عينات تلقائي، وصندوق درجة حرارة الأعمود.
الميثانول (MeOH)شركة ميرك (دارمشتات، ألمانيا)1.06035درجة LC-MS
الميكروبايبتاتإبندورف (ألمانيا)نطاقات قياس متعددة (مثلا: 10 وميكرو؛ L، 100 وميكرو؛ L، 200 وميكرو؛ L، 1000 وميكرو؛ L)
المكتب & البرمجيات الإحصائية-مايكروسوفت أوفيس 365؛ جراف باد بريزم 9.5
حمض الفوسفوريكشركة ميرك (دارمشتات، ألمانيا)49685نقاء التحليل، 85 وزن/٪
الطرد المركزي المبردإبندورف (ألمانيا)للعينات التي تم طردها على درجة 4&00; C
مطياف الكتلة الرباعي الأقطاب الثلاثيتقنيات أجيلينت (الولايات المتحدة الأمريكية)G6475AAسلسلة أجيلينت 1200، المجهزة بمصدر تأين الرش الكهربائي (ESI)
خلاط الدوامةLabnet  (الولايات المتحدة الأمريكية)S0200سرعة قابلة للتعديل

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Wu, J., Liu, J. Research progress in proteasome inhibitor resistance to multiple myeloma. Zhong Nan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 46 (8), 900-908 (2021).
  2. Rajkumar, S. V., et al. International myeloma working group updated criteria for the diagnosis of multiple myeloma. Lancet Oncol. 15 (12), e538-e548 (2014).
  3. Mateos, M. V., San Miguel, J. F. Management of multiple myeloma in the newly diagnosed patient. Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2017 (1), 498-507 (2017).
  4. Joseph, N. S., Gentili, S., Kaufman, J. L., Lonial, S., Nooka, A. K. High-risk multiple myeloma: Definition and management. Clin Lymphoma Myeloma Leuk. 17s, S80-S87 (2017).
  5. San Miguel, J. F. Introduction to a series of reviews on multiple myeloma. Blood. 125 (20), 3039-3040 (2015).
  6. Rafae, A., Van Rhee, F., Al Hadidi, S. Perspectives on the treatment of multiple myeloma. Oncologist. 29 (3), 200-212 (2024).
  7. Yan, H., et al. Identification of key candidate genes and pathways in multiple myeloma by integrated bioinformatics analysis. J Cell Physiol. 234 (12), 23785-23797 (2019).
  8. Shi, L. L., Zhai, Y. P. Research Progress on Molecular Mechanisms of Resistance to Bortezomib in Multiple Myeloma-Review. Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 25 (5), 1576-1579 (2017).
  9. Wang, Y. R., Ma, Y. P. Research Progress on Mechanism of Bortezomib Resistance in Multiple Myeloma. Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 31 (5), 1584-1587 (2023).
  10. Callander, N. S., et al. Nccn guidelines® insights: Multiple myeloma, version 3.2022. J Natl Compr Canc Netw. 20 (1), 8-19 (2022).
  11. Kumar, S. K., et al. Risk of progression and survival in multiple myeloma relapsing after therapy with imids and bortezomib: A multicenter international myeloma working group study. Leukemia. 26 (1), 149-157 (2012).
  12. Kuhn, D. J., et al. Potent activity of carfilzomib, a novel, irreversible inhibitor of the ubiquitin-proteasome pathway, against preclinical models of multiple myeloma. Blood. 110 (9), 3281-3290 (2007).
  13. Moreau, P., et al. Subcutaneous versus intravenous administration of bortezomib in patients with relapsed multiple myeloma: A randomised, phase 3, non-inferiority study. Lancet Oncol. 12 (5), 431-440 (2011).
  14. Shah, V. P., et al. Bioanalytical method validation--a revisit with a decade of progress. Pharm Res. 17 (12), 1551-1557 (2000).
  15. Mandal, V., Ajabiya, J., Khan, N., Tekade, R. K., Sengupta, P. Advances and challenges in non-targeted analysis: An insight into sample preparation and detection by liquid chromatography-mass spectrometry. J Chromatogr A. 1737, 465459(2024).
  16. Kizuki, K., et al. Enzyme-linked immunosorbent assays for human tissue kallikrein and analysis of immunoreactive kallikrein in the plasma by them. Adv Exp Med Biol. 247b, 211-216 (1989).
  17. Delguidice, C. E., Ismaiel, O. A., Mylott, W. R., Halquist, M. S. Jr Comparison of methods for quantitative analysis of ranibizumab and bevacizumab in human plasma using various bioanalytical techniques, including microfluidic immunoassay, triple quadrupole, and high-resolution liquid chromatography-tandem mass spectrometry approaches. J Pharm Biomed Anal. 217, 114823(2022).
  18. Fotiou, D., et al. Carfilzomib-associated renal toxicity is common and unpredictable: A comprehensive analysis of 114 multiple myeloma patients. Blood Cancer J. 10 (11), 109(2020).
  19. Mingrone, G., et al. Effects of carfilzomib therapy on left ventricular function in multiple myeloma patients. Front Cardiovasc Med. 8, 645678(2021).
  20. Stewart, A. K., et al. Carfilzomib, lenalidomide, and dexamethasone for relapsed multiple myeloma. N Engl J Med. 372 (2), 142-152 (2015).
  21. Luo, T., Xia, H. L. [efficacy and safety of carfilzomib in the treatment of multiple myeloma：a systematic evaluation]. Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 27 (6), 1887-1893 (2019).
  22. Nakao, S., et al. Evaluation of cardiac adverse events associated with carfilzomib using a japanese real-world database. Oncology. 100 (1), 60-64 (2022).
  23. Min, J. S., et al. Quantitative determination of carfilzomib in mouse plasma by liquid chromatography-tandem mass spectrometry and its application to a pharmacokinetic study. J Pharm Biomed Anal. 146, 341-346 (2017).
  24. Yang, J., et al. Pharmacokinetics, pharmacodynamics, metabolism, distribution, and excretion of carfilzomib in rats. Drug Metab Dispos. 39 (10), 1873-1882 (2011).
  25. Zhu, X., et al. A simple and rapid lc-ms/ms method for the quantification of nirmatrelvir/ritonavir in plasma of patients with covid-19. Int J Anal Chem. 2024, 6139928(2024).
  26. Kang, J. S., Lee, M. H. Overview of therapeutic drug monitoring. Korean J Intern Med. 24 (1), 1-10 (2009).
  27. Seger, C., Salzmann, L. After another decade: Lc-ms/ms became routine in clinical diagnostics. Clin Biochem. 82, 2-11 (2020).
  28. Mushtaq, A., et al. Efficacy and toxicity profile of carfilzomib based regimens for treatment of multiple myeloma: A systematic review. Crit Rev Oncol Hematol. 125, 1-11 (2018).
  29. Smrdel, L., Locatelli, I., Zver, S., Gobec, M. A systematic review and meta-analysis of carfilzomib-associated thrombocytopenia as an adverse event in patients with multiple myeloma. Ther Adv Hematol. 15, 20406207241292517(2024).
  30. Reichel, A., Lienau, P. Pharmacokinetics in drug discovery: An exposure-centred approach to optimising and predicting drug efficacy and safety. Handb Exp Pharmacol. 232, 235-260 (2016).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Carfilzomib QuantificationLC MS MS MethodPlasma SamplesMultiple MyelomaTherapeutic Drug MonitoringProtein PrecipitationChromatographic SeparationC18 ColumnAmmonium AcetateMethod Validation

Related Articles