Method Article

منهج تقني للتحليل الهيكلي لمركب غير معروف في سائل هووشيانغ تشنغتشي الفموي بناء على مطيافية الكتلة الخطية لمصائد الأيونات

DOI:

10.3791/70672

⸱

April 3rd, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1General Surgery, Chongqing Traditional Chinese Medicine Hospital, The First Affiliated Hospital of Chongqing College of Traditional Chinese Medicine, 2Department of Cardiology, Chongqing Traditional Chinese Medicine Hospital, The First Affiliated Hospital of Chongqing College of Traditional Chinese Medicine, 3Chongqing Taiji Industry, 4Chongqing Clinical Research Center for Dermatology, Department of Dermatology, Chongqing Traditional Chinese Medicine Hospital, The First Affiliated Hospital of Chongqing College of Traditional Chinese Medicine

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هنا، نعرض بروتوكولا قياسيا يجمع بين أشجار مطيافية الكتلة متعددة المراحل وعملية تجزئة تعتمد على سائل هوشيانغ تشنغتشي الفموي.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تلعب المركبات العشبية الصينية دورا لا يمكن استبداله في الطب الصيني، وكان تحديد مكوناتها المعقدة محور بحث مهم في السنوات الأخيرة. سائل هوشيانغ تشنغتشي الفموي هو دواء صيني كلاسيكي يحمل براءات اختراع ويتطلب تركيبه الكيميائي مزيدا من البحث على المستوى الجزيئي. عادة ما توفر مطياف الكتلة التقليدية، مثل زمن الطيران وأوربيتراب، معلومات التجزئة الثانوية فقط. استنادا إلى مطياف كتلة مصيدة الأيونات الخطية، يمكن تفكيك المركبات بشكل أكثر شمولا، مما يحصل على معلومات أعمق عن الشظايا. تطور هذه الورقة تقنية استكشاف هيكلية لمركبات غير معروفة في كروماتوغرافيا العرق القلبية، تشمل معالجة العينة المبدئية، وتحضير الكروماتوغرافيا السائلة فائقة الأداء، وتحضير مطيافية الكتلة، والاختبار الكامل الطيف، واختبار الطيف الثانوي، واختبار الطيف الكتلي متعدد المستويات، وتحليل النتائج. تظهر النتائج التمثيلية عملية اشتقاق البنية المركبة. نناقش العوامل المؤثرة على التقنية التجريبية، مثل النظائر والمركبات متعددة الهيدروكسي وحل الأجهزة. استنادا إلى اشتقاق البنية الجزيئية المجهرية لمركبات مجهولة من خلال تجزئة مطيافية الكتلة متعددة المراحل، فإن الطريقة التجريبية المعتمدة متعددة الاستخدامات وقابلة للتطبيق في التوصيف البنيوي للجزيئات الصغيرة النشطة بيولوجيا في الطب الصيني التقليدي وربطها بالآليات الدوائية.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المركبات العشبية الصينية (CHCs)، كأصول لا تقدر بثمن للطب الصيني التقليدي (TCM)، اكتسبت آلاف السنين من الخبرة السريرية المثبتة1. يلعبون دورا لا يمكن استبداله في الوقاية من الأمراض، والتدخل العلاجي، وإعادة التأهيل2. من خلال التآزر متعدد الأعشاب، تعالج الخلايا القلبية القلبية الجسم البشري بشكل شامل، مما يطبق المبادئ الأساسية للشمولية والعلاج القائم على التمايز فيالمتلازمات 3. ضمن الأطر الطبية المعاصرة، تحظى مراكز الزراعة القلبية القلبية باعتراف عالمي بآلياتها متعددة الأدوية التي تتعامل مع مسارات متعددة الأهداف4، مع تطبيقات واسعة تشمل اضطرابات الجهاز الهضمي، والالتهابات التنفسية، والتعديل المناعي. يجسد سائل تشنغتشي الفموي هووxiang تشنغتشي (HXZQ) الصيغ الكلاسيكية ل CHC6. تركيبه يدمج عدة أعشاب طبية مثل الباتشولي، وأوراق البيريلا، وأنجيليكا داهوريكا، والأتراكتيليود، والبوريا، وقشر اليوسفي المجفف. يشتهر بقدرته على منح خصائص تثبيتية، وتنظيف الحرارة، ومعالجة الرطوبة، وتعزيز الطحال في المعدة7. يستخدم HXZQ سريريا لمواجهة متلازمات شبيهة بالإنفلونزا الناتجة عن الرطوبة، وانتفاخ فوق المعدة، والقيؤ، وحالات الإسهال8. لقد حولت التطورات التكنولوجية أبحاث CHC من الملاحظة الظاهراتية إلى التحقيقات الجزيئية والميكانيكية والمركبات9، مثل استخدام تقنيات البروتيوميات والميتابولوميات لتحديد المكونات الفعالة، مما أسس أسس علمية لعولمة الطب الصيني التقليدي. وبالتالي، فإن التحليل الدقيق لمكونات HXZQ الكيميائية والديناميكا الدوائية لا يعزز فقط توحيد CHC بل يحفزأيضا اكتشاف الأدوية المبتكر.

HXZQ هي تركيبة متعددة الأعشاب، وتعقيدها الكيميائي الفطري ينبع من مكوناتها النباتية المركبة11. يتميز HXZQ بمجموعة متنوعة من الفئات الكيميائية النباتية—بما في ذلك الزيوت المتطايرة، الكومارين، الليجنان، البوليسكاريدات، والقلويدات—ويحتوي HXZQ على مركبات نشطة حيوية مميزة جيدا ومجموعة كبيرة من المكونات غير المشروحة هيكليا12. يمكن أن تحدث تقلبات ديناميكية في المكونات الرئيسية (مثل الزيوت المتطايرة، الفلافونويدات، القلويات) بسبب اختلافات في بروتوكولات الاستخراج وظروف التخزين، مما يبرز الحاجة الملحة للتحليل الكيميائي المنهجي6. في إطار تحديث الطب الصيني التقليدي (TCM)، لا يوضح التحليل التركيبي المعمق للتركيبات الكلاسيكية مثل HXZQ الأساس المادي الذي يكمن وراء فعاليتها العلاجية فحسب، بل يوفر أيضا دعما تجريبيا لمراقبة الجودة، والتصنيع الموحد، ومراقبة الأحداث السلبية10. بينما تم توثيق المركبات عالية الوفرة في HXZQ بشكل موسع، لا يزال جزء كبير من مكونها الكيميائي غير محدد13. التنوع البنيوي لمكوناته، إلى جانب قلة وفرة العديد من الجزيئات الحيوية المحتملة، يشكل تحديات كبيرة للتعرف الشامل باستخدام تقنيات تحليلية تقليدية مثل الكروماتوغرافيا والتحليل الطيفيوحدها. ومن الجدير بالذكر أن التشابه منتشر عبر عدة فئات كيميائية نباتية في HXZQ، بما في ذلك الكومارين، والليجنان، والبوليساكاريدات، مما يزيد من تعقيد التمايز الهيكلي15. تشمل الحواجز الإضافية أمام التعليق المركب الدقيق انخفاض وفرة المحللات وتأثيرات التداخل المصفوفية. تسلط هذه العوامل مجتمعة الضوء على حدود رئيسية في أبحاث HXZQ: تطوير استراتيجيات تحليلية قوية لتحقيق تحديد دقيق وعالي التغطية لمكملها الكيميائي الكامل.

تواجه منصات مطيافية الكتلة المعاصرة (MS) قيودا جوهرية عند توصيف المصفوفات المعقدة، بما في ذلك تشوهات تداخل الأيونات وتغطية قاعدة بيانات الطيفية غير مكتملة16. في هذا السياق، ظهرت مطيافية الكتلة التانديمية (MS/MS) ومطياف الكتلة متعددة المراحل (MSn) كاستراتيجيات تحليلية لا غنى عنها لتوضيح البنى الجديد للمركبات المجهولة17. بينما تولد أنظمة MS عالية الدقة التقليدية مثل MS رباعي الأقطاب (Q-TOF) وOrbitrap MS بيانات شظايا MS/MS عالية الجودة، فإن فائدتها تقتصر على أحداث التجزئة أحادية المرحلة. على الرغم من هذا القيد، توفر هذه المنصات رؤى هيكلية غنية بحساسية ودقة استثنائية، خاصة عند تحليل الخلطات المعقدة18. على النقيض من ذلك، يستخدم فخ الأيونات الخطي (LIT) MS نمط التفكك الناجم عن التصادم متعدد المراحل (CID) الذي يتيح التجزئة التسلسلية والتكرارية للأيونات الجزيئية. تسمح هذه القدرة الفريدة بتشريح تدريجي للهياكل العظمية المركبة والمجموعات الوظيفية، مما يسهل التعرف النوعي الواضح على المحللات المجهولة المتنوعة هيكليا19. لتلبية الحاجة غير الملباة لتوصيف شامل لمصفوفات CHC المعقدة، تقدم هذه الدراسة سير عمل تحليلي قائم على LIT-MS مصمم لتحديد المركبات غير المعروفة. وباستخدام كفاءة التقاط الأيونات العالية وسرعة المسح السريعة في LIT، يعزز هذا النهج معدل النقل ودقة التعليقات الهيكلية الجديدة . يهدف تطبيق هذا السير على HXZQ إلى: (1) تكمل المنهجيات الحالية لتحديد المكونات الكيميائية غير المميزة في HXZQ؛ (2) إنشاء إطار تقني لدعم أبحاث التوحيد القياسي لصيغ CHC الأخرى؛ و(3) تسريع تحويل الطب الصيني التقليدي من الممارسة التجريبية إلى الطب الدقيق المبني على الأدلة.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. المعالجة المسبقة للعينة

  1. افتح تغليف HXZQ التجاري. انقل بدقة 0.1 مل من HXZQ إلى زجاجة عينة بسعة 2 مل، ثم أضف 0.9 مل من الماء. اهز المحلول حتى يختلط جيدا.
  2. جهز حقنة حقن (1 مل) ومرشح غشاء دقيق المسامي (0.22 ميكرومتر). قم بتصفية المحلول إلى زجاجة عينة جديدة بسعة 2 مل.
    ملاحظة: اتخذ الاحتياطات الشخصية المناسبة أثناء الإجراءات التجريبية.

2. تحضير الكروماتوغرافيا السائلة فائقة الأداء (UPLC)

  1. انقر مرتين على برنامج Xcalibur . انقر على جاهز للتحميل، ثم اضغط على زر التحكم المباشر . انقر على عمود وحدة المضخة في نافذة المنبثقة، وقم بتعيين ٪B على 50، ونسبة C إلى 0، و٪ D على 0 (الشكل 1).
  2. انقر على زر المحرك لتحويله إلى حالة التشغيل. انقر على زر المزيد من الخيارات ، واضبط التدفق على 5 [مل/دقيقة] والوقت على 180 [ثانية] في نافذة المنبثقة. انقر على زر التطهير ، ثم اضغط على زر الموافقة في نافذة النوافذ المنبثقة.
    ملاحظة: الطور المتحرك ثابت عند 0.3 مل/دقيقة مع 50٪ من A (محلول حمض الفورميك 0.1٪) و50٪ B (الأسيتونيتريل) بدون درجة حرارة عمود في غياب عمود كروماتوغرافي. حجم الحقن الافتراضي عادة ما يكون 1 ميكرولتر.

3. التحضير للتصلب المتعدد

  1. ارجع إلى النافذة الرئيسية للبرنامج، واضغط على زر عرض إعداد التسلسل . انقر على زر الفتح لاستيراد القالب المعدل بالفعل، ثم انقر بزر الفأرة الأيمن على اسم الطريقة ثم انقر على زر فتح الملف لفتح ملف الطريقة.
  2. في نافذة إعداد الآلات المنبثقة، اضبط الكتلة الأولى (m/z) إلى 100 والكتلة الأخيرة (m/z) على 1200. انقر على زر الحفظ لحفظ الطريقة.
    ملاحظة: شملت شروط التصلب الافتراضي درجة حرارة مصدر الأيونات عند 350 درجة مئوية، ونطاق التصلب المتعدد الأولي خلال 80 – 1200 دالتون، ووضع التصادم عند التفكك الناتج عن التصادم (CID)، وطاقة التصادم عند 35.

4. اختبار التصلب المتعدد الكامل

  1. انقر على زر تسلسل الركض ، ثم اضغط على زر الموافقة في نافذة النوافذ المنبثقة. انتظر حتى يكتمل حقن العينة (الشكل 2).
    ملاحظة: قبل الاختبار، يرجى وضع زجاجة العينة سعة 2 مل في صينية العينات الخاصة بالآلة.
  2. انقر على زر عرض خارطة الطريق ، ثم على أيقونة متصفح كوال لفتح نافذة متصفح كوال. انقر على زر الفتح ، واختر ملف البيانات بتنسيق .raw في المجلد، ثم انقر عليه مرتين لفتح الملف.
  3. انقر بزر الفأرة الأيمن على نافذة الكروماتوغراف، ثم انقر على زر النطاقات . في قسم فلتر المسح، اختر ESI Full MS. في قسم نوع الحبكة، اختر TIC. انقر على زر الموافق ، ثم ستعرض النافذة الكروماتوجرام الأيوني الكلي للعينة.
  4. انقر على زر Pushpin في الزاوية العلوية اليمنى من نافذة الطيف الكتلي.
  5. في نافذة الكروماتوغراف، انقر وانزلق لاختيار منطقة زمنية ذات أقوى وفرة نسبية. نافذة الطيف الكتلي ستعرض أيونات طيف الكتلة المقابلة. سجل قيم m/z للمستوى التالي من مطيافية الكتلة.

5. اختبار التصلب المتعدد/الماجستير

  1. ارجع إلى نافذة إعداد الآلات. في عمود الكتلة الأب في الصف n=2، أدخل قيمة m/z للمركب المسجلة في الخطوة السابقة. انقر على زر الحفظ لحفظ الطريقة.
  2. ارجع إلى نافذة البرمجيات. انقر على زر عرض إعداد التسلسل ، وعدل اسم الملف، ثم اضغط على زر الحفظ لحفظ التسلسل.
  3. انقر على زر تسلسل الركض ، ثم اضغط على زر الموافقة في نافذة النوافذ المنبثقة. انتظر حتى يكتمل حقن العينة.
  4. ارجع إلى نافذة متصفح Qual. انقر على زر الفتح ، واختر ملف البيانات بتنسيق .raw في المجلد، ثم انقر مرتين عليه لفتح الملف
  5. انقر بزر الفأرة الأيمن على نافذة الكروماتوغراف، ثم انقر على زر النطاقات . في قسم فلتر المسح، اختر ESI Full MS. في قسم نوع الحبكة، اختر TIC. انقر على زر الموافق ، ثم ستعرض النافذة الكروماتوجرام الأيوني الكلي للعينة.
  6. انقر على زر Pushpin في الزاوية العلوية اليمنى من نافذة الطيف الكتلي.
  7. في نافذة الكروماتوغراف، انقر وانزلق لاختيار منطقة زمنية ذات أقوى وفرة نسبية. نافذة الطيف الكتلي ستعرض أيونات طيف الكتلة المقابلة. سجل قيم m/z للمستوى التالي من مطيافية الكتلة.

6. اختبار MSn

  1. ارجع إلى نافذة إعداد الآلات. في عمود الكتلة الأب في الصف n=3، أدخل قيمة m/z للمركب المسجلة في الخطوة السابقة. انقر على زر الحفظ لحفظ الطريقة.
  2. كرر الخطوات من 4.2 إلى 4.5 لإكمال حقن العينة وعرض البيانات. توقف تحليل MSn بمجرد عدم ملاحظة أيونات شظايا مستقرة.

7. تحسين المعلمات

  1. ارجع إلى نافذة إعداد الآلات. في عمود نوع الفعل، اضغط على CID ثم اختر PQD أو ETD لتغيير وضع التصادم.
  2. في عمود طاقة التصادم المعاد، اضغط على 35 ثم اضبطه على 20 أو 50 لتغيير طاقة التصادم.
    ملاحظة: ادمج جميع البقايا الكيميائية والمذيبات في حاوية النفايات العضوية.

8. تحليل النتائج

  1. ارسم يدويا الأيون الأب وأيون التجزئة في برنامج الرسم، بما في ذلك بنية الأيونات الأب، واسم المركب، وقيمة نسبة الكتلة إلى الشحنة (m/z).
  2. على سبيل المثال، بالنسبة للمركب المجهول الذي يحتوي على m/z=623.21، لاحظ التجزئة الناتجة. هنا، كان متوسط الشظية يحمل m/z=461.15 عند MS/MS. كان فرق الكتلة 162.06 دالتون، وهو ما يعادل بنية سداسية.
  3. وعند تحليل ذلك أكثر، فإن الشظية الوسيطة مع m/z=461.15 قد تفككت مرة أخرى لتشكل نيوبياكانجيليكول مع m/z=315.09 عند MS3. كان فرق الكتلة 146.06 دالتون، وهو ما يعادل بنية ديوكسي هيكساميثيلوز. أي أن الوسيط الذي كان لديه m/z=461.15 كان لديه وحدة واحدة أكثر من نيوبياكانجيليكول.
  4. في بنية نيوبياكانجيليكول، حلل موضع الترابط. هنا، كانت مجموعة الهيدروكسيل المعرضة هي الموقع الأكثر احتمالا لتكون مرتبطة بدي أوكسي هيكساميثيلوز. وبالمثل، كانت مجموعة الهيدروكسيل عند C1 على وحدة ديوكسيهيكساميثيلوز هي الأكثر احتمالا لأن تكون مرتبطة بالهيكسوز. وأخيرا، احصل على بنية المركب المجهول مع m/z=623.21.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

اقترحنا أن جميع معلومات m/z يجب تجميعها أولا، ثم يتم حساب قيمة فرق الكتلة بين الأيون الأم وأيون الجزء. وجدت المركب الذي تم الإبلاغ عنه في قاعدة البيانات أو الأدبيات، ثم استنتجت بنية المركب المجهولة عكسيا بناء على هذا الهيكل المعروف.

جميع المركبات المكتشفة وأيونات الشظايا المقابلة لها كانت تعرض بقيم m/z. يمكن مطابقة مجموعة فرعية من هذه الأيونات الجزئية مع معايير مرجعية مصدقةرقم 20. تم تجميع هياكل المركبات المستهدفة غير المعروفة تدريجيا من خلال تعديلات منهجية للمجموعات ال...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يوفر الجمع بين LIT-MS وتقنية تجزئة MSn طريقة لتحديد المركبات غير المعروفة في مركبات CHC. على عكس أوضاع MS التقليدية المتتالية في Orbitrap وQ-TOF MS، يمكن لفخ الأيونات الخطية التقاط أيونات الهدف تحديدا، مما يتجنب التداخل الناتج عن التداخل المشتركمع الأيونات 23. تحقق هذه الطريقة دقة على المستوى الجزيئي، مما يوفر معلومات كيميائية دقيقة نسبيا عن الهيكل، مما يعالج جزئيا تحدي تأهيل المركبات غير المعروفة بسبب فجوات في قواعد البيانات.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعلن المؤلفون عدم وجود مصالح مالية متنافسة.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تمويل هذا العمل من خلال مشروع خاص لتحفيز الأداء والإرشاد من معهد تشونغتشينغ للأبحاث العلمية (cstc2022jxjl120005). مشروع أبحاث العلوم والتكنولوجيا التابع للجنة التعليم البلدية في تشونغتشينغ (KJZD-K202315102). مشروع البحث العلمي الطبي في تشونغتشينغ (مشروع مشترك بين لجنة صحة تشونغتشينغ ومكتب العلوم والتكنولوجيا (2022DBXM007). المستشفى الخاص بعالم شينغلين من جامعة تشنغدو في طب الطب الصيني التقليدي (YYZX202160).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
AcetonitrileThermo ScientificCAS 75-05-8الحالة السائلة
Formic acidThermo ScientificCAS 64-18-6الحالة السائلة
Huoxiang Zhengqi Oral LiquidChongqing Taiji Industry (Group) Co., Ltd.State Drug Standard Code Z50020409كائن الدراسة
Linear ion trap mass spectrometerThermo ScientificLTQ XLأداة IT-MS
liquid chromatographThermo ScientificU3000أداة UPLC
XcaliburThermo Scientificالإصدار 2.0برنامج تشغيل UPLC-IT-MS

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chao, J., et al. Major achievements of evidence-based traditional Chinese medicine in treating major diseases. Biochem Pharmacol. 139, 94-104 (2017).
  2. Zou, Q., et al. The role and mechanism of TCM in the prevention and treatment of infectious diseases. Front Microbiol. 14, 1286364(2023).
  3. Zhou, X., et al. Synergistic effects of Chinese herbal medicine: a comprehensive review of methodology and current research. Front Pharmacol. 7, 201(2016).
  4. Li, X., et al. Advancing traditional Chinese medicine research through network pharmacology: strategies for target identification, mechanism elucidation, and innovative therapeutic applications. Am J Chinese Med. 53 (07), 2021-2042 (2025).
  5. Li, B. H., Li, Z. Y., Liu, M. M., Tian, J. Z., Cui, Q. H. Progress in traditional Chinese medicine against respiratory viruses: a review. Front Pharmacol. 12, 743623(2021).
  6. Xu, Q., et al. An evaluation strategy of high-quality traditional Chinese patent medicines with consistency as the core: A case study of Huoxiang Zhengqi Shui. Arabian J Chem. 18, 1302024(2025).
  7. Li, L., et al. Huoxiang Zhengqi dropping pills alleviate exertional heat stroke–induced multiple organ injury through sustaining intestinal homeostasis via regulating MAPK/NF-κB pathway and gut microbiota in rats. Front Pharmacol. 15, 1534713(2025).
  8. Wu, Y., et al. Unlocking the therapeutic potential of Huoxiang Zhengqi San in cold and high humidity-induced diarrhea: Insights into intestinal microbiota modulation and digestive enzyme activity. Heliyon. 10 (12), e32789(2024).
  9. Hua, H., et al. From traditional medicine to modern medicine: the importance of TCM regulatory science (TCMRS) as an emerging discipline. Chinese Med. 20 (1), 92(2025).
  10. Zhang, C., et al. Multi-component Chinese medicine formulas for drug discovery: state of the art and future perspectives. Acta Mater Med. 2 (1), 106-125 (2023).
  11. Li, X., et al. Integration of non-targeted multicomponent profiling, targeted characteristic chromatograms and quantitative to accomplish systematic quality evaluation strategy of Huo-Xiang-Zheng-Qi oral liquid. J Pharma Biomed Anal. 236, 115715(2023).
  12. Chen, Y., et al. Identification and quality control of isomers in Huo-Xiang-Zheng-Qi Mixture using ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry and inductive effects analysis. J Pharma Biomed Anal. 255, 116646(2025).
  13. Guo, H., Pang, X., Zhang, W., Jiang, W., Pang, X. Dissolution determination of five components in Huoxiang Zhengqi tablets using partitioned dispersive liquid-liquid microextraction combined with HPLC-UV. Anal Meth. 5 (11), 2674-2678 (2013).
  14. Bhadange, Y. A., Carpenter, J., Saharan, V. K. A comprehensive review on advanced extraction techniques for retrieving bioactive components from natural sources. ACS Omega. 9 (29), 31274-31297 (2024).
  15. Silva, A. S., et al. Evaluation of the status quo of polyphenols analysis: Part I—phytochemistry, bioactivity, interactions, and industrial uses. Comp Rev Food Sc Food Safety. 19 (6), 3191-3218 (2020).
  16. Kaufmann, A., Teale, P. Capabilities and Limitations of High-Resolution Mass Spectrometry (HRMS): Time-of-flight and Orbitrap. Chem Anal Non-antimicrob Vet Drug Resid Food. , 93-139 (2016).
  17. Vaniya, A., Fiehn, O. Using fragmentation trees and mass spectral trees for identifying unknown compounds in metabolomics. TrAC Trends Anal Chem. 69, 52-61 (2015).
  18. Belov, M. E., et al. From protein complexes to subunit backbone fragments: a multi-stage approach to native mass spectrometry. Anal Chem. 85 (23), 11163-11173 (2013).
  19. Ma, X. Recent advances in mass spectrometry-based structural elucidation techniques. Molecules. 27 (19), 6466(2022).
  20. Ridder, L., et al. Substructure-based annotation of high-resolution multistage MSn spectral trees. Rapid Comm Mass Spectr. 26 (20), 2461-2471 (2012).
  21. Tao, Y., et al. Abelmoschus manihot (L.) medik. seeds alleviate rheumatoid arthritis by modulating JAK2/STAT3 signaling pathway. J Ethnopharmacol. 325, 117641(2024).
  22. Liu, J., et al. Qi-Sai-Er-Sang-Dang-Song decoction inhibits pyroptosis and inflammation in THP-1 cells and alleviates rheumatoid arthritis by inhibiting the NLRP3-pyroptosis signaling pathway. Phytomedicine. 148, 157481(2025).
  23. Jian, W. Modern liquid chromatography and mass spectrometry for targeted biomarker quantitation. Target Biomarker Quantitat LC–MS. , 45-63 (2017).
  24. Zeng, P., Li, J., Chen, Y., Zhang, L. The structures and biological functions of polysaccharides from traditional Chinese herbs. Progr Mol Biol Transl Sci. 163, 423-444 (2019).
  25. Abdel Tawab, M., et al. Electrospray mass spectrometry with consecutive fragmentation steps (ESI-MSn) as a tool for rapid and sensitive analysis of ginsenosides and their galactosyl derivatives. Helvetica Chim Acta. 83 (4), 739-747 (2000).
  26. Zhang, A., Sun, H., Yan, G., Wang, X. Recent developments and emerging trends of mass spectrometry for herbal ingredients analysis. TrAC Trends Anal Chem. 94, 70-76 (2017).
  27. Vukics, V., Guttman, A. Structural characterization of flavonoid glycosides by multi-stage mass spectrometry. Mass Spectr Rev. 29 (1), 1-16 (2010).
  28. Cortese, M., Gigliobianco, M. R., Magnoni, F., Censi, R., Di Martino, P. Compensate for or minimize matrix effects? Strategies for overcoming matrix effects in liquid chromatography-mass spectrometry technique: a tutorial review. Molecules. 25 (13), 3047(2020).
  29. Gerothanassis, I. P., Troganis, A., Exarchou, V., Barbarossou, K. Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy: basic principles and phenomena, and their applications to chemistry, biology and medicine. Che Edu Res Pract. 3 (2), 229-252 (2002).
  30. Kumar, N., Jaitak, V. Recent advancement in NMR based plant metabolomics: techniques, tools, and analytical approaches. Crit Rev Anal Chem. 56 (1), 1-25 (2026).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Linear Ion TrapMass SpectrometryStructural AnalysisUnknown CompoundChinese Herbal CompoundsHuoxiang ZhengqiUltra Performance Liquid ChromatographyMultistage FragmentationMolecular Structure DerivationBioactive Small Molecules

Related Articles