مقالة بحثية

نموذج زراعة ثلاثي الأبعاد يدعم تطور الجريبات الثانوية إلى الجنبية البشرية في المختبر

DOI:

10.3791/70713

⸱

يونيو 16, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Female Fertility Promotion, Center for Reproductive Medicine, Department of Obstetrics and Gynecology, Peking University Third Hospital, 2National Clinical Research Center for Obstetrics and Gynecology, Peking University Third Hospital, 3Key Laboratory of Assisted Reproduction (Peking University), Ministry of Education, 4Beijing Key Laboratory of Collaborative Innovation in Frontier Technologies for Population Quality, 5Department of Surgical Oncology, Beijing Children's Hospital, Capital Medical University, National Center for Children's Health, 6The University of Hong Kong- Shenzhen Hospital

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

أسست هذه الدراسة نموذج زراعة ثلاثي الأبعاد (ثلاثي الأبعاد) يدعم تطور الجريبات البشرية من المرحلة الثانوية إلى المرحلة الشربية في المختبر. يتيح هذا النظام نمو الجريبات وتكوين الأنتروم مع الحفاظ على خصائص جزيئية الخلية الجسدية، مما يوفر نموذجا حيويا لأبحاث تكوين الجريبات البشرية.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تكون بصيلات المبيض البشرية هي عملية معقدة ومنظمة بدقة، يصعب دراستها مباشرة في الجسم الحي. على الرغم من أن النماذج المختبرية ضرورية للبحث الميكانيكي، إلا أن الأنظمة الحالية تظل أقل مثالية لأنها لا تستطيع إعادة تلخيص الديناميكيات الزمانية المكانية لتطور الجريبات. تقدم هذه الدراسة نموذج زراعة ثلاثي الأبعاد يدعم تطور الجريبات البشرية من المرحلة الثانوية إلى المرحلة الجنائية. يعيد هذا النموذج بنجاح الأحداث الشكلية الرئيسية في الجسم الحي ، بما في ذلك النمو الجريب المستمر، ومرحلة توسع القطر المميزة من اليوم العاشر، وتكوين التجويف الشرجي حوالي اليوم العشرين. ومن المهم أن هذا التقدم التطوري أدى إلى استرجاع ناجح للبويضات الحية في مرحلة الحويصلة الجرثومية (GV). علاوة على ذلك، كشف تحليل التألق المناعي عن أنماط تعبير مميزة لمستقبلات الغونادوتروبين في الخلايا الجسدية، متوافقة مع هوية خلايا الغرانولوزا والثيكا. أظهرت الخلايا الشبيهة بالحبيبات الداخلية مستقبلا هرمونيا محفزا للجريبات (FSHR) مرتفعا، بينما أظهرت الخلايا الخارجية الشبيهة بالثيكا تعبيرا عاليا لمستقبلات هرمونات اللوتينية (LHR). يوفر هذا النموذج منصة قيمة لدراسة تكوين الجريبات البشرية وعلم السموم التناسلية، ويوفر مرجعا لتحسين أنظمة زراعة الجريبات في المختبر لتطور المرحلة الثانوية إلى الجنائية.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

العملية الفسيولوجية لتطور جريبات المبيض، من المرحلة الأولية إلى المرحلة قبل الإباضة، أساسية في خصوبة المرأة1. تتضمن هذه العملية سلسلة منسقة للغاية من الأحداث، بما في ذلك نمو/نضج البويضات وتكاثر/تمايز خلايا الحبيات2. تمثل الاضطرابات في هذه الآليات المعقدة سببا رئيسيا للعقم وخلل المبيض. لذا، فإن الفهم التفصيلي للشبكات التنظيمية التي تقوم عليها الجريبات — بما في ذلك الإشارات الباراكرينية، والتفاعلات بين الخلايا البويضية والجسدية، وديناميكيات المصفوفة خارج الخلية — هو ذو أهمية مرضية حاسمة. ومع ذلك، لا يزال التحقيق المباشر في تكوين الجريبات البشرية في الجسم الحي مقيدا بقيود أخلاقية وعملية، مما يدفع الحاجة إلى نماذج موثوقة في المختبر لتوضيح هذه الآليات. على الرغم من التطورات، لا يزال هناك نقص حاد في نموذج زراعة طويل الأمد يدعم تطور الجريبات البشرية، خاصة من المرحلة الثانوية إلى المرحلة الجنائية.

بينما تتمتع ثقافة الجريبات البشرية في المصفوفات ثنائية الأبعاد (ثنائية الأبعاد) أو ثلاثية الأبعاد (ثلاثية الأبعاد) بفهم متقدم للتطور المبكرللجريبات 3,4، تظل هذه الأنظمة محدودة في دعم التقدم إلى المراحل اللاحقة. ومن الجدير بالذكر أن تحقيق تكوين الجريبات البشرية في المختبر خلال مراحل النمو المتأخرة لا يزال تحديا خاصا بسبب حجم الجريبات الأكبر وخط النضج الممتد5. حتى بين العدد المحدود من أنظمة زراعة الجريبات البشرية في المختبر التي نجحت في إنتاج بويضات MII، تظل معدلات النضج منخفضة (حوالي 20٪ على الأكثر) 6,7,8,9. ربما يكون التحدي الأكثر جوهرية هو إعادة استرجاع الانتقال من الثانوي إلى المسار القذبي، وهو مرحلة حرجة ومعقدة هيكليا لم يتم نمذجتها بشكل كاف بعد في المختبر.

أسست هذه الدراسة نموذج زراعة ثلاثي الأبعاد يدعم التطور الصناعي للجريبات الثانوية البشرية إلى جريبات شربية ذات هياكل تجاويف مميزة. يوفر هذا النموذج منصة أساسية لمزيد من الدراسة في الآليات التنظيمية الكامنة وراء تطور الجريبات البشرية، ويعد مرجعا لتحسين أنظمة زراعة الجريبات المستقبلية التي تستهدف التطور من الثانوية إلى الأنفية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة هذا البروتوكول واعتماده من قبل لجنة الأخلاقيات في مستشفى بكين الجامعي الثالث (رقم الموافقة M2024151). جميع الأوصياء القانونيين على القصر المشاركين في الدراسة وقعوا على نموذج الموافقة المستنيرة.

مصدر الأنسجة
تم الحصول على نسيج النخاع المبيض المستخدم في هذا البروتوكول من أربعة مرضى أطفال تم تشخيصهم بورم تباثيري في المبيض (أعمارهم 2، 6، 13، و16 سنة) الذين تبرعوا بأنسجة مبيضية لأغراض البحث (الجدول 1). تم استخدام قشرة المبيض في دراسات حفظ أنسجة المبيض بالتبريد، بينما تم استخدام الأنسجة النخاعية المتبقية لزراعة الجريبات في المختبر . تم عزل ما مجموعه 33 جريبا ثانويا، حيث تم تخصيص 16 جريبا للمجموعة الضابطة و17 لمجموعة الزراعة ثلاثية الأبعاد.

تحضير المواد الكيميائية
تكون وسط النقل من وسط L-15 الخاص بليبوفيتز مدعوما بمكمل بديل مصل بنسبة 10٪ وتم تخزينه عند 4 درجات مئوية. تم تحضير محلول الهضم الكامل بإضافة 0.04 ملغ/ملتر ليبيراز DH إلى MEMα، و10 IU/mL DNase I، و100 IU/mL بنسلين-ستربتومايسين، وتم تخزينه عند -20 درجة مئوية. تم إضافة محلول توقف الهضم إلى DPBS بمكمل بديل مصل بنسبة 10٪ وتم تخزينه عند 4 درجات مئوية. تم تحضير وسط النمو الكامل عن طريق إضافة MEMα بمكمل بديل مصلي بنسبة 10٪، و1٪ من الإنسولين-ترانسفيرين-سيلينيوم، و50 ميكروغرام/مل من حمض L-الأسكوربيك، و2 ملليمول بيروفات الصوديوم، و100 وحدة دولية/مل من البنسلين-ستريبتومايسين. كان الوسط يخزن عند 4 درجات مئوية. تمت إضافة هرمون تحفيز الجريبات البشري المؤتلف (FSH) إلى تركيز نهائي يبلغ 100 ميكروي إندونيت/مل عند بدء الزراعة، كما هو موضح في دراسة سابقة10. عند الكشف البصري عن تكوين الأنتروم المبكر (حوالي اليوم العشرين)، تم إضافة هرمون اللوتينيز البشري المؤتلف (LH) إلى تركيز نهائي 10 mIU/mL خلال تغيرات الوسط. تم إعداد مصفوفة الزراعة الصلبة بخلط مصفوفة غشاء قاعدة بنسبة 70٪ (v/v) مع وسط نمو كامل بارد مثلج بنسبة 30٪ (v/v) وتم إبقاؤها على الثلج أثناء جميع خطوات التعامل.

هضم الأنسجة وعزل الجريبات الثانوي
تم وضع نسيج المبيض في وسط نقل ونقل إلى المختبر عند درجة حرارة 4 درجات مئوية. في ظروف معقمة، كان يتم تشريح النخاع المبيض باستخدام مشرط. تم تقطيع النسيج إلى قطع رقيقة (~3 × 3 × 1 مم) ثم تم تقطيعه إلى شظايا صغيرة (~0.5 × 0.5 × 1 مم) باستخدام آلة تقطيع الأنسجة، مما حافظ على رطوبة الأنسجة طوال الوقت. تم نقل الأنسجة المفروم إلى طبق بحجم 35 مم، وأضيف محلول هضم كامل مسخن مسبقا بمعدل 2 مل لكل نسيج بسعة 100 ملغ. تم إجراء الحضانة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 45–80 دقيقة (المتوسط: 60 ± 15 دقيقة)، مع خلط لطيف كل 10 دقائق. توقف الهضم عندما كشف الفحص المجهري عن ارتخاء مصفوفة البسكوماتور وإطلاق جريبات فردية (الشكل 1). تم اختيار الجريبات الثانوية السليمة (قطرها 100–200 ميكرومتر، مع ≥ طبقتين من خلايا الحبيبات وبويضة مرئية) تحت ميكروسكوب ستيريو باستخدام ماصة زجاجية يتم التحكم بها بفم (قطر داخلي 200 ميكرومتر) وغسلها مرتين باستخدام وسط نمو كامل مسخن مسبقا.

التضمين ثلاثي الأبعاد والثقافة طويلة الأمد
تم وضع إدخال مزرعة خلية في طبق بحجم 35 مم مبلل بوسط نمو كامل بسعة 2 مل، وتم توازنه مسبقا في حاضنة (37 درجة مئوية، 5٪ CO₂) لمدة ساعتين. تم نقل جريبات ثانوية مختارة إلى الإدخال وزراعتها مسبقا طوال الليل تحت نفس الظروف. في نهاية فترة ما قبل الزرعة، تم تربية الجريبات في المجموعة الضابطة مباشرة داخل الإدخال (الزراعة ثنائية الأبعاد). على النقيض من ذلك، تم تجهيز الجريبات المخصصة لمجموعة الزراعة ثلاثية الأبعاد للدمج في مصفوفة الغشاء القاعدي المنخفض بعامل النمو (إجمالي البروتين 8~12 ملغ/مل). تم إذابة المصفوفة على الجليد وخلطها مع وسط نمو كامل بارد بنسبة 30٪ (v/v). تم وضع قطرات بحجم 40 ميكرولتر من الخليط في طبق بحجم 35 مم (مع الحد الأقصى ست قطرات في كل طبق)، لتشكيل طبقة هلامية موحدة بارتفاع يقارب 1.5 مم. ثم تم نقل جريبة ثانوية واحدة إلى كل قطرة باستخدام ماصة زجاجية تتحكم بها الفم، موضوعة بعناية في الثلث الأوسط إلى العلوي من القطرة لمنع الغوص. وضع الطبق في حاضنة (37 درجة مئوية، 5٪ ثاني أكسيد الكربون) لمدة 30 دقيقة للسماح بالتجليل. بعد التصلب، أضيف 2 مل من وسط النمو الكامل بلطف إلى الطبق لبدء الزراعة طويلة الأمد.

صيانة ومراقبة الزراعة
تم إجراء تغيير متوسط بنسبة 50٪ مع وسط نمو كامل جديد (يحتوي على FSH) كل 48 ساعة. تمت ملاحظة الجريبات يوميا تحت المجهر المجسم، وتم تسجيل أقطارها وخصائصها الشكلية المختلفة. عند الكشف البصري عن تكوين الأنتروم المبكر (حوالي اليوم العشرين)، أضيف LH البشري المؤتلف إلى الوسط خلال التغيرات اللاحقة. تم الحفاظ على الزراعة لمدة تصل إلى 30 يوما أو حتى تصل الجريبات إلى المرحلة الشربية (قطر > 400 ميكرومتر مع تجويف مملوء بالسائل واضح التحديد).

تفكك الخلايا بعد الزراعة
في نهاية الزراعة، تم نقل الجريبات الشربية إلى طبق يحتوي على DPBS طازجة وتم تفكيكها ميكانيكيا باستخدام حقنة معقمة عيار 29. تم نقل مركبات البويضات الركامية المعزولة (COCs) إلى طبق منفصل لمزيد من التحليل. تم نقل تعليق جرانولوزا وخلايا الثيكا المتبقية إلى طبق جديد بحجم 35 مم يحتوي على وسط نمو كامل مدفأ مسبقا بسعة 2 مل، وتم تحريكه بلطف لتوزيع متساو، وحضنه لمدة 48 ساعة (37 درجة مئوية، 5٪ ثاني أكسيد الكربون).

تحليل التألق المناعي
بعد الزراعة، تم تثبيت الخلايا ب 4٪ بارافورمالديهيد لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. ثم تم غسل العينات ثلاث مرات باستخدام PBS، ونفرت ب 0.5٪ ترايتون X-100 لمدة 20 دقيقة، ثم تم حجبها طوال الليل عند 4 درجات مئوية باستخدام 1٪ BSA في PBS. تم حضان الخلايا طوال الليل عند درجة حرارة 4 درجات مئوية مع الأجسام المضادة الأولية. الأجسام المضادة الأساسية المستخدمة كانت مضادة FSHR (أرنب، 1:200) ومضادة ل-LHR (فأر، 1:100). بعد الحضانة، تم غسل الخلايا ثلاث مرات لمدة 15 دقيقة لكل منها باستخدام PBS يحتوي على 1٪ BSA. لاحقا، تم حضانها بأجسام مضادة ثانوية فلورية (مضادة للأرانب ومضادة للفأر، 1:200) لمدة ساعتين في درجة حرارة الغرفة في الظلام. وأخيرا، خضعت الخلايا لثلاث غسلات نهائية، كل منها استمر 20 دقيقة. تم صبغ النوى بمادة DAPI لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة. ثم تم غسل العينات ثلاث مرات لمدة 5 دقائق باستخدام PBS يحتوي على 1٪ BSA. تم إجراء التصوير باستخدام نظام تصوير عالي المحتوى من Operetta CLS في الوضع الكونفوكالي. تم التقاط إشارات الفلورة باستخدام القنوات التالية: DAPI (405 نانومتر)، أليكسا فلور 488 (LHR)، وأليكسا فلور 647 (FSHR)، مع إعدادات تعريض متسقة عبر جميع العينات.

التحليل الإحصائي
أجريت مقارنات قطر الجريبات بين مجموعة الضابطة ومجموعة الزراعة ثلاثية الأبعاد في الأيام 5 و10 و15 باستخدام اختبار t مستقل للعينات. تم اعتبار قيمة p < 0.05 ذات دلالة إحصائية. لم يتم إجراء تحليل إحصائي لقطر الجريبات بعد اليوم الخامس عشر، حيث فشلت معظم الجريبات في المجموعة الضابطة في البقاء بعد اليوم الخامس عشر. أدى ذلك إلى حجم عينة غير كاف، مما منع إجراء مقارنات جماعية موثوقة وذات معنى. تم إجراء جميع التحليلات الإحصائية باستخدام منشور GraphPad (الإصدار 9.0).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تطوير نموذج ثقافة ثلاثي الأبعاد يدعم نمو الجريبات البشرية حتى المرحلة الشربية
أحد التحديات الرئيسية في أبحاث بصيلات المبيض هو تطوير نظام زراعة في المختبر يدعم التطور الكامل للجريبات، مع كون تكوين التجويف الخلفي علامة فارقة رئيسية. لذا، أنشأت هذه الدراسة نموذجا ثلاثي الأبعاد للزراعة لجريبات الإنسان في المختبر (الشكل 2). تم عزل ما مجموعه 33 جريبا ثانويا من 4 متبرعين، حيث تم تعيين 16 إلى مجموعة الضابطة (الز...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يمثل الحفاظ الناجح على بصيلات المبيض البشرية في المختبر خلال الانتقال من الثانوي إلى الأنف تقدما تقنيا كبيرا. في هذه الدراسة، مكن نظام الزراعة ثلاثي الأبعاد الذي قدم الدعم الفيزيائي الحيوي المناسب وإشارات هرمونية خاصة بالمرحلة من هذا التطور. تتوافق هذه النتائج مع الأدلة الحديثة التي تؤكد الحاجة إلى أنظمة زراعة ثلاثية الأبعاد لإعادة تلخيص فسيولوجيا الأنسجة. بينما الطبقات الأحادية التقليدية ثنائية الأبعاد بسيطة من الناحية التشغيلية، إلا أنها تفتقر إلى البنية المكانية اللازمة للتفا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

جميع المؤلفين يعلنون أنه لا توجد لديهم مصالح متنافسة.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد دعم هذا العمل مؤسسة بكين للعلوم الطبيعية (Z230013)؛ المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (T2293764، 82501980، 82288102)؛ البحث الوطني للتقنية الرئيسية برنامج D في الصين (2022YFC2703000)؛ مشروع الطب السريري بلس إكس - مشروع العلماء الشباب في جامعة بكين (PKU2025PKULCXQ033)؛ مشروع المستشفى الثالث لمركز المفاتيح السريرية بجامعة بكين (BYSYZD2021019)؛ خطة الابتكار العالي (202504841089)؛ ومؤسسة الصين للعلوم ما بعد الدكتوراه (GZC20230145). تم إنشاء المخطط التخطيطي في عام https://BioRender.com.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
Anti-FSHRHuaBioER1909-08
Anti-LHRSanta Cruzsc-293165
Anti-mouse(secondary)AbcamAB150113
Anti-rabbit(secondary)AbcamAB205718
Basement membrane matrix for organoid cultureMCEK6004 
BSASigmaA1933
Cell culture insert MilliporePICMORG50
Culture dishCorning430165
DAPIBeyotimeC1006
DNase I ThermoEN0525
DPBSGibco14190144
FSHMerckF4021
IncubatorThermoHeracell 3111
Insulin-Transferrin-SeleniumGibco41400045
L-Ascorbic acidMCEHY-B0166
Leibovitz's L-15 mediumGibco11415064
LHMerckL6420
Liberase DHRoche5401054001
McIlwain Tissue chopperMickle Laboratory Engineering Co. Ltd.MP10180-220
MEMαGibco41061029
ParaformaldehydeSolarbioP1110
PBSGibco10010023
Penicillin-StreptomycinGibco15140122
Serum substitute supplementFUJiFILM Irvine90194
Sodium pyruvateGibco11360070
StereomicroscopeNikonSMZ1270
The high-content imaging systemPerkinElmer Operetta CLS
Triton X-100SigmaX100

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Zhang, H., Liu, K. Cellular and molecular regulation of the activation of mammalian primordial follicles: somatic cells initiate follicle activation in adulthood. Hum Reprod Update. 21 (6), 779-786 (2015).
  2. McGee, E. A., Hsueh, A. J. Initial and cyclic recruitment of ovarian follicles. Endocr Rev. 21 (2), 200-214 (2000).
  3. Hovatta, O. Cryopreservation and culture of human primordial and primary ovarian follicles. Mol Cell Endocrinol. 169 (1-2), 95-97 (2000).
  4. Wang, T. R., et al. Basic fibroblast growth factor promotes the development of human ovarian early follicles during growth in vitro. Hum Reprod. 29 (3), 568-576 (2014).
  5. Telfer, E. E. Future developments: In vitro growth (IVG) of human ovarian follicles. Acta Obstet Gynecol Scand. 98 (5), 653-658 (2019).
  6. Guo, Y., et al. Neurotrophin-4 promotes in vitro development and maturation of human secondary follicles yielding metaphase II oocytes and successful blastocyst formation. Hum Reprod Open. 2024 (1), hoae005(2024).
  7. Xiao, S., et al. In vitro follicle growth supports human oocyte meiotic maturation. Sci Rep. 5, 17323(2015).
  8. McLaughlin, M., Albertini, D. F., Wallace, W. H. B., Anderson, R. A., Telfer, E. E. Metaphase II oocytes from human unilaminar follicles grown in a multi-step culture system. Mol Hum Reprod. 24 (3), 135-142 (2018).
  9. Xu, F., et al. Matrix-free 3D culture supports human follicular development from the unilaminar to the antral stage in vitro yielding morphologically normal metaphase II oocytes. Hum Reprod. 36 (5), 1326-1338 (2021).
  10. Wang, H., et al. Rejuvenation of aged oocyte through exposure to young follicular microenvironment. Nat Aging. 4 (9), 1194-1210 (2024).
  11. Brevini, T. A. L., Pennarossa, G., Gandolfi, F. A 3D approach to reproduction. Theriogenology. 150, 2-7 (2020).
  12. Kapałczyńska, M., et al. 2D and 3D cell cultures - a comparison of different types of cancer cell cultures. Arch Med Sci. 14 (4), 910-919 (2018).
  13. Francés-Herrero, E., et al. Bioengineering trends in female reproduction: a systematic review. Hum Reprod Update. 28 (6), 798-837 (2022).
  14. He, X. Microfluidic Encapsulation of Ovarian Follicles for 3D Culture. Ann Biomed Eng. 45 (7), 1676-1684 (2017).
  15. Healy, M. W., et al. Creating an Artificial 3-Dimensional Ovarian Follicle Culture System Using a Microfluidic System. Micromachines (Basel). 12 (3), 261(2021).
  16. Aziz, A. U. R., et al. A Microfluidic Device for Culturing an Encapsulated Ovarian Follicle. Micromachines (Basel). 8 (11), 335(2017).
  17. Laronda, M. M., et al. A bioprosthetic ovary created using 3D printed microporous scaffolds restores ovarian function in sterilized mice. Nat Commun. 8, 15261(2017).
  18. Hugues, J. N., Massart, P., Cedrin-Durnerin, I. Assessment of theca cell function: a prerequisite to androgen or luteinizing hormone supplementation in poor responders. Fertil Steril. 99 (2), 333-336 (2013).
  19. Zhu, Z., et al. LSD1 promotes the FSH responsive follicle formation by regulating autophagy and repressing Wt1 in the granulosa cells. Sci Bull. 69 (8), 1122-1136 (2024).
  20. Shao, T., et al. Autophagy regulates differentiation of ovarian granulosa cells through degradation of WT1. Autophagy. 18 (8), 1864-1878 (2022).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة