يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة بحثية

التعديل الدوائي لمحور إجهاد الشبكية الإندوبلازمي ALDH2-SIRT1 في التنكس الشبكي الناتج عن MNU في فئران C57BL/6: دراسة داخل الجسم الحي

139 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/70755

⸱

يونيو 23, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Fuzong Clinical Medical College of Fujian Medical University, Dongfang Hospital Affiliated to Xiamen University, 2The Third Hospital of Zhangzhou, 3The General Hospital of Western Theatre Command, 4Xijing Hospital, Air Force Medical University

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

شملت الدراسة إعطاء الميثيل-نيتروزوريا لفئران C57BL/6 لإحداث تلف في الشبكية، تلاها العلاج بمحفزات ومثبطات ALDH2 إلى جانب SIRT1 ومعدلات إجهاد الشبكية الإندوبلازمية (ERS). كان هدف البروتوكول إلى دراسة التأثيرات الوقائية لهذه العلاجات على تدهور الشبكية وتأثيرها على استقلاب الألدهيد.

الملخص

بحثت هذه الدراسة في التأثيرات الوقائية لتنشيط إنزيم الألديهيد ديهيدروجيناز 2 (ALDH2) (عبر ألدا-1)، وتثبيط ALDH2 (عبر دايدزين)، وتعديل السيرتيين 1 (SIRT1) وإجهاد الشبكة الإندوبلازمية (ERS) على تلف الشبكية الناتج عن ميثيل نيتروزوريا (MNU) في فئران C57BL/6. تم توزيع اثنين وسبعين فأرا عشوائيا إلى ثماني مجموعات، بما في ذلك مجموعة ضابطة، ومجموعة من MNU وحدها، ومجموعات علاجية مختلفة. تم إعطاء الفئران حقن داخل الصفاق من المنبهات والمثبطات التي تستهدف محور ALDH2-SIRT1-ERS على التوالي. تم تقييم وزن الجسم، وسمك طبقة الشبكية، ومؤشرات أيض الألدهايد في اليوم الثاني والرابع من العلاج. أدى تناول MNU إلى تدهور الشبكية، مما أدى إلى فقدان كبير في وزن الجسم في جميع المجموعات باستثناء المجموعة الضابطة. العلاج بألدا-1 خفف من تلف الشبكية، بينما زادت دايدزين من حدته. أدى التثبيط الدوائي ل SIRT1 (عبر EX-527) إلى تقليل التأثيرات الوقائية لألدا-1، وكاد تحريض ERS (عبر TUN) أن يلغي فوائده. وعلى العكس، خفف تنشيط SIRT1 (عبر SRT1720) من الآثار الجانبية لدايدزين، بينما خفف تثبيط ERS (عبر 4-PBA) جزئيا من تأثير دايدزين. علاوة على ذلك، زاد MNU من مستويات مؤشرات أيض الألدهيد (مالونديالديهيد [MDA] و4-هيدروكسي-2-نونينال [4-HNE])، مع تقليل ألدا-1 ورفع دايدزين هذه المستويات. بالإضافة إلى ذلك، تدخل التعديل الدوائي لمسارات SIRT1/ERS في التأثيرات التنظيمية لألدا-1 ودايدزين على استقلاب الألدهيد. بشكل عام، حمى تنشيط ALDH2 بنية الشبكية ونظم أيض الألدهيد، مما يبرز الدور الحاسم لمحور الإشارة ALDH2-SIRT1/ERS في التخفيف من تدهور الشبكية.

المقدمة

يعد تدهور الشبكية، وهو سبب رئيسي للعمى في العالم، حالات مثل التهاب الشبكية الصباغي (RP)، والتنكس البقعي المرتبط بالعمر (AMD)، واعتلال الشبكية السكري (DR)، والتي تؤثر مجتمعة على ملايين الأفراد وتفرض أعباء اجتماعية واقتصاديةكبيرة. ومع ذلك، هناك حاليا نقص في العلاجات الدوائية الفعالة للغاية لوقف تقدم هذه الأمراض الشبكية العمياء في الممارسة السريرية. المرض لتنكس الشبكية متعدد العوامل، ويشمل الإجهاد التأكسدي، والالتهاب المزمن، وإجهاد الشبكة الإندوبلازمية (ERS)، الذي يعطل توازن خلايا الشبكية. غالبا ما تتحفز هذه الضغوط بسبب خلل الأيض الداخلي (مثل خلل الميتوكوندريا)، مما يؤدي في النهاية إلى الاستماتة المبرمجةوتلف الشبكية غير القابل للعكس. الميثيل-نيتروزوريا (MNU)، وهو عامل قوي لتحويل الحمض النووي، برز كمحفز كيميائي واسع الاستخدام لنمذجة تدهور الشبكية5. يعد نموذج مرض الشبكية الناتج عن MNU أداة قيمة للتحقيق في آليات المرض وتقييم التدخلات العلاجية المحتملة. ميكانيكيا، يحفز MNU إجهادا تأكسديا عن طريق توليد أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) وتعطيل توازن الأكسدة والاختزال، مما يضر بأغشية المستقبلات الضوئية والعضيات. وقد يؤثر ذلك أيضا على أيض الألدهيد، مما يعيق عملية إزالة السموم من بيروكسيد الدهون. قد يؤدي تراكم الألديهيدات السامة لاحقا إلى تفاقم الضرر التأكسدي، مما يزيد من استماتة مستقبلات الضوء6.

إنزيم ألديهيد ديهيدروجيناز 2 (ALDH2)، وهو إنزيم معتمد على NAD+ في الميتوكوندريا، يلعب دورا حيويا في إزالة سموم الألدهيدات السامة مثل 4-هيدروكسي-2-نونينال (4-HNE) ومالونديالديهايد (MDA) عن طريق تحويلها إلى أحماض كربوكسيلية أقل تفاعلية، وبالتالي يمنع التلف التأكسدي7. النشاط القوي ل ALDH2 ضروري للحفاظ على توازن الأكسدة والاختزال، وقد تم ربط ضعف وظيفة ALDH2 بتسريع الشيخوختة والأمراض التنكسية العصبية8. لقد ثبت أن التنشيط الدوائي ل ALDH2، لا سيما عبر المنشط الجزيئي الصغير ألدا-1، يمارس تأثيرات حماية خلايا في نماذج مختلفة 9,10. سيرتوين 1 (SIRT1)، وهو ديأسيتيلاز يعتمد على نيكوتيناميد أدينين ثنائي النيوكليوتيد + (NAD+)، ينظم استجابات الإجهاد واستقلاب الطاقة من خلال تعديل عوامل النسخ، بما في ذلك p53 والعامل النووي كابا B (NF-κB)11. أظهر تنشيط SIRT1 وعدا في تعزيز وظيفة الميتوكوندريا وبقاء الخلايا، حيث ربطت الدراسات بين زيادة تنظيمه وتقليل الضرر التأكسدي والالتهاب في تنكس الشبكية12. إجهاد الشبكة الإندوبلازمية (ERS)، الذي يثار تراكم البروتينات غير المطوية بشكل خاطئ، ينشط استجابة البروتين غير المطوي (UPR)، والتي يمكن أن تتحول إلى سلسلة مؤيدة للاستماتة تحت الضغط المزمن. تم ربط ERS بتنكس الشبكية، مما ساهم في موت الخلايا المبرمجة للمستقبلات الضوئية13. على الرغم من هذه النتائج، لا يزال التفاعل المحدد بين ALDH2 وSIRT1 وERS في سياق نموذج تدهور الشبكية الناتج عن MNU غير مفهوم جيدا. بالإضافة إلى ذلك، تتطلب الأدوار المنسقة لهذه المسارات المترابطة مزيدا من التحقيق المنهجي.

لذلك، هدفت الدراسة الحالية إلى دراسة تأثيرات المكونات الرئيسية لمحور ALDH2-SIRT1-ERS—ALDH2 (عبر ألدا-1 أو دايدزين)، SIRT1 (عبر SRT1720 أو EX527)، وERS (عبر 4-PBA أو TUN)—على تلف الشبكية الناتج عن MNU في فئران C57BL/6. باستخدام تحليلات نسيجية وكيميائية حيوية، درسنا كيف يؤثر استهداف هذا المحور على بقاء المستقبلات الضوئية واستقلاب الألدهيد. افترضنا أن التنشيط المنسق ل ALDH2، وتعزيز SIRT1، وكبح ERS سيخفف بشكل تآزري من تنكس الشبكية الناتج عن MNU، مما يوفر مبررا لاستهداف هذا المحور في الأمراض التنكسية الشبكية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

البيان الأخلاقي
تمت مراجعة جميع البروتوكولات التجريبية والموافقة عليها من قبل لجنة العناية واستخدام الحيوانات التجريبية في كلية فوزونغ الطبية السريرية بجامعة فوجيان الطبية، وأجريت وفقا لبيان جمعية أبحاث الرؤية وطب العيون (ARVO) لاستخدام الحيوانات في أبحاث العيون والرؤية.

الحيوانات وتوزيع المجموعات
تم الحصول على ما مجموعه 72 فأرا ذكرا من نوع C57BL/6 (عمره 8–10 أسابيع، وزن الجسم 20–25 جم) من المورد المعتمد، مع الالتزام بالمعايير الوطنية لتربية الحيوانات المختبرية. تم إيواء الفئران في أقفاص مهواة بشكل فردي تحت ظروف بيئية موحدة، بما في ذلك دورة ضوء/ظلام لمدة 12 ساعة، ودرجة حرارة محكمة (22 ± 2 درجة مئوية)، ورطوبة نسبية (50٪ ± 10٪)، مع إمكانية الوصول إلى الطعام والماء بشكل مرضي. لدراسة التأثيرات التعديلية لمسارات ALDH2 وSIRT1 وERS على تلف الشبكية الناتج عن MNU، تم توزيع الفئران عشوائيا إلى ثماني مجموعات تجريبية (n = 9 لكل مجموعة؛ n = 5 لمجموعة اليوم الثاني؛ n = 4 لمجموعة اليوم الرابع) باستخدام تسلسل عشوائي مولد بالحاسوب لتقليل تحيز الاختيار. تم عرض الملخص الرسومي للدراسة في الشكل 1.

تحضير وبرامج العلاج للمواد
تم إدراج الكواشف التجريبية المستخدمة في هذه الدراسة في جدول المواد، مع معلومات مفصلة عن التحضير والجرعة كما يلي. (1) MNU (50 ملغ/كغ): تم إذابة 100 ملغ من MNU في 2 مل من المحلول الملحي العادي لتحضير محلول 50 ملغ/مل. ثم تم تخفيف 1.4 مل من هذا المحلول ب 5.6 مل من المحلول الملحي الطبيعي إلى تركيز نهائي 10 ملغ/مل للإعطاء الحيواني. (2) ألدا-1 (10 ملغ/كغ): تم إذابة 50 ملغ من مسحوق ألدا-1 في 1 مل من كبريتات ثنائي ميثيل (DMSO) لتحضير محلول بسعة 50 ملغ/مل، تم تخفيفه ب 24 مل من المحلول الملحي العادي إلى تركيز نهائي 2 ملغ/مل. (3) دايدزين (10 ملغ/كغ): تم إذابة 50 ملغ من مسحوق دايتزين في 1 مل من DMSO لتحضير محلول 50 ملغ/مل، ثم تم تخفيفه ب 24 مل من المحلول الملحي العادي إلى تركيز نهائي 2 ملغ/مل. (4) EX-527 (10 ملغ/كغ): تم إذابة 5 ملغ من مسحوق EX-527 في 0.1 مل من DMSO لتحضير محلول 50 ملغ/مل، تم تخفيفه ب 2.4 مل من المحلول الملحي العادي إلى تركيز نهائي 2 ملغ/مل. (5) SRT1720 (10 ملغ/كغ): تم إذابة 5 ملغ من مسحوق SRT1720 في 0.1 مل من DMSO وخلطها جيدا. ثم أضيفت 400 ميكرولتر من PEG300، و50 ميكرولتر من Tween-80، و450 ميكرولتر من المحلول الملحي العادي لتحضير محلول عمل بمعدل 2 ملغ/مل. (6) TUN (10 ملغ/كغ): تم إذابة 5 ملغ من مسحوق TUN في 0.1 مل من DMSO لتحضير محلول 50 ملغ/مل، ثم تم تخفيفه ب 2.4 مل من المحلول الملحي العادي إلى تركيز نهائي 2 ملغ/مل. (7) 4-فينيل بوتيرات (4-PBA؛ 10 ملغ/كغ): تم إذابة 2 ملغ من مسحوق 4-PBA في 1 مل من المحلول الملحي العادي لتحضير محلول 2 ملغ/مل. جميع أحجام الإدارة المذكورة أعلاه كانت 5 × M مليلتر (حيث M = وزن جسم الحيوان بالكيلوغرام). بعد ذلك، تم تقسيم الفئران إلى ثماني مجموعات مع بروتوكولات العلاج التالية:

مجموعة الضابطة: حقن واحد داخل الصفاق من محلول ملحي طبيعي.
مجموعة MNU: حقنة واحدة داخل الصفاق من MNU.
مجموعة MNU + ألدا-1: حقن داخل الصفاق من ألدا-1، تليها إعطاء واحد من MNU بعد ساعتين. ثم تم إعطاء ألدا-1 داخل الصفاق مرة واحدة يوميا.
مجموعة MNU + Daidzin: حقن داخل الصفاق من Daidzin، تليها حقن MNU مرة واحدة بعد ساعتين. ثم كان يعطى دايدزين عبر الصفاق مرة واحدة يوميا.
مجموعة MNU + ألدا-1 + EX-527: حقن داخل الصفاق من ألدا-1، تليها حقن EX-527 بعد ساعة، وحقن MNU بعد ساعة واحدة (إعطاء واحد). ثم تم إعطاء ألدا-1 داخل الصفاق مرة واحدة يوميا.
مجموعة MNU + Alda-1 + TUN: حقن داخل الصفاق من ألدا-1، يليه حقن TUN بعد ساعة، وحقن MNU بعد ساعة واحدة من ذلك. ثم تم إعطاء ألدا-1 داخل الصفاق مرة واحدة يوميا.
مجموعة MNU + دايدزين + SRT1720: حقن داخل الصفاق من دايدزين، يتبعه حقن SRT1720 بعد ساعة، وحقن MNU بعد ساعة واحدة من ذلك. ثم كان يعطى دايدزين عبر الصفاق مرة واحدة يوميا.
مجموعة MNU + Daidzin + 4-PBA: حقن داخل الصفاق من Daidzin، تليها حقن 4-PBA بعد ساعة، وحقن MNU بعد ساعة واحدة من ذلك. ثم كان يعطى دايدزين عبر الصفاق مرة واحدة يوميا.

مراقبة وزن الجسم
تمت مراقبة السمية الجهازية والتأثيرات الفسيولوجية المرتبطة بالعلاج من خلال تسجيل وزن جسم كل فأر يوميا لمدة أربعة أيام متتالية بعد إعطاء MNU. تم قياس الأوزان باستخدام ميزان رقمي دقيق بدقة ±0.1 جرام، وتم توثيق بيانات لتتبع اتجاهات فقدان أو زيادة الوزن عبر المجموعات، والتي كانت مؤشرات غير مباشرة على تحمل العلاج والإجهاد الجهازي.

فحص علم الأمراض النسيجي الشبكية
في الفترات الزمنية بعد اليوم الثاني والرابع من التجربة، تم القتل الرحيم للفئران عن طريق خلع عنق الرحم بعد التخدير بحقن الصوديوم بنتوباربيتال داخل الصوغ بجرعة 50–60 ملغ/كجم من وزن الجسم، مع الالتزام الصارم بإرشادات القتل الرحيم المؤسسية. تم استئصال العيون، وخاصة العينين اليسرى، على الفور. قبل إزالة النصيحة، كان يتم عمل شق صغير في الطول الأنفي لتحديد الاتجاه. ثم تم غمر الكرات في 4٪ بارافورمالديهيد (PFA) في محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS، pH 7.4) لمدة 24 ساعة عند 4 درجات مئوية للتثبيت. ثم تم تجفيف العيون الثابتة من خلال سلسلة إيثانول متدرجة (70٪، 80٪، 95٪، و100٪)، وتم تطهيرها في الزيلين، وغرس في كتل البارافين للمعالجة النسيجة. أثناء التضمين، تم توحيد الاتجاه بوضع الجانب الأنفي المميز للأسفل.

تم إعداد مقاطع متسلسلة (بسماكة 5 ميكرومتر) باستخدام ميكروتوم دوار عبر رأس العصب البصري (ONH) لضمان أخذ عينات تمثيلية من منطقة الشبكية المركزية. تحديدا، تم قطع المقاطع من الجانب العلوي نحو نقطة الأنف المحددة، مما يضمن مرور جميع الأقسام عبر ال ONH. ثم تم تركيب الأقسام على شرائح زجاجية موجبة الشحنة. تم إجراء تلوين الهيماتوكسيلين والإيوزين (HE) وفقا للبروتوكولات القياسية. تم تقييم شكل الشبكية بواسطة المجهر الضوئي بتكبير 400×. تم أخذ القياسات بشكل منهجي من الشبكية الصدغية على مسافات محددة مسبقا من ONH: 200، 400، 600، 800، 1000، و1200 ميكرومتر. في كل موقع، تم قياس سمك الشبكية الكلي، وطول الجزء الداخلي والخارجي (IS/OS)، وسماكة الطبقة النووية الخارجية (ONL)، وسمك الطبقة الخارجية الشبكية (OPL)، وطبقة النواة الداخلية (INL).

لضمان الموضوعية وتقليل تحيز القياس، تم تنفيذ بروتوكول صارم لمراقبة الجودة. تحديدا، تم تقسيم كل من المجموعات التجريبية الثمانية إلى خمس أو أربع مجموعات فرعية (مثل المجموعات الفرعية 1، 2، 3، 4، 5). تم تعيين خمسة أو أربعة مراقبين مستقلين، أعمى عن تعيينات المجموعات، لقياس نفس المجموعة الفرعية المقابلة عبر جميع المجموعات التجريبية (مثلا، كان المراقب أ يقيس دائما المجموعة الفرعية 1 من كل مجموعة). عند كل نقطة قياس، تم أخذ ثلاث قراءات ضمن نطاق ~5 ميكرومتر (مثلا عند 200 ميكرومتر، 195 ميكرومتر، و205 ميكرومتر) وتم قياسها لتقليل الخطأ الفني. تم إجراء قياسات كمية باستخدام برنامج ImageJ (الإصدار 1.54g)، وتم حساب متوسط قيمة السماكة لكل نقطة لضمان قابلية التكرار.

مؤشرات أيض الألدهايد
لتقييم الإجهاد التأكسدي واستقلاب الألدهيد، تم تحليل عينات المصل لمستويات MDA و4-HNE، وهي مؤشرات حيوية رئيسية لتكسيد الدهون وإجهاد الألدهيد. على وجه التحديد، تم تخدير جميع الفئران عن طريق حقن الصوديوم بنتوباربيتال داخل الصفاق (i.p.) بجرعة تتراوح بين 50–60 ملغ/كجم من وزن الجسم. بعد تخدير الفئران بعمق، تم تنفيذ القتل الرحيم عن طريق خلع عنق الرحم. مباشرة بعد القتل الرحيم، تم استئصال كرات العين، وجمع دم الخلف الخلفي بسرعة. تم السماح للعينات بالتجلط في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة، تلاها الطرد المركزي عند 3,000 × جرام لمدة 10 دقائق. تم نقل جزء المصل بعناية إلى أنابيب الطرد المركزي الدقيق الخالية من الإنزيمات وتخزينه عند -80 درجة مئوية حتى التحليل اللاحق. تم قياس مستويات MDA في المصل باستخدام مجموعات اختبار التشويذ المناعي المرتبطة بالإنزيمات (ELISA) المتوفرة تجاريا وفقا لبروتوكولات الشركة المصنعة. باختصار، أضيفت المعايير والعينات إلى صفائح دقيقة مغلفة مسبقا، وحضنت بأجسام مضادة أولية محددة، وغسلت لإزالة المواد غير المرتبطة، وتفاعلت مع الأجسام المضادة الثانوية المتقاربة مع بيروكسيداز الفجل الحار (HRP). ثم أضيف ركيزة تتراميثيلبينزيدين (TMB)، وتم إنهاء التفاعل بحمض الكبريتيك. تمت قراءة قيم الكثافة البصرية (OD) عند 450 نانومتر باستخدام قارئ الميكروبلايت، وتم تحديد تركيزات MDA/4-HNE بمقارنة قيم OD مع المنحنيات القياسية المولدة باستخدام تركيزات معروفة للمحللات.

التحليل الإحصائي
تم تقديم جميع البيانات كمتوسط ± خطأ معياري (SE). نظرا لصغر حجم العينة (n = 5 لمجموعة اليوم الثاني؛ n = 4 لمجموعة اليوم الرابع)، تم استخدام طرق اختبار بوتستراب الإحصائية. على وجه التحديد، تم استخدام طريقة إعادة أخذ عينات بوتستراب (1,000 تكرار مع الاستبدال) لتقدير فترات الثقة بنسبة 95٪ (CI) لمتوسطات المجموعة ولمقارنة الفروقات بين المجموعات. لكل نتيجة (مثل الوزن، سمك الشبكية، مستويات MDA/4-HNE)، تم سحب عينات Bootstrap من مجموعة البيانات الأصلية، وتم حساب المتوسط لكل إعادة عينة. تم اشتقاق 95٪ CIمن النسبة المئوية 2.5 و97.5 لتوزيع الbootstrap. تم تقييم الأهمية بشكل غير مباشر من خلال النهج التالي من خلال فحص فترة الثقة. إذا لم يتضمن CI نتائج Bootstrap صفرا، فهذا عادة ما يشير إلى أن الفرق كان ذا دلالة كبيرة (بافتراض مقارنة المتوسطات بين مجموعتين أو أكثر). تم إنشاء الأشكال باستخدام برنامج Graphpad (الإصدار 5.01).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

تغيرات وزن الجسم
قبل التجربة، لم تكن هناك فروق ذات دلالة إحصائية في وزن الجسم بين المجموعات. في اليوم الثاني بعد التجربة، باستثناء مجموعة الضابطة، التي أظهرت زيادة في وزن الجسم من 17.0 ± 0.5 جرام إلى 17.4 ± 0.4 جم، انخفض وزن أجسام الفئران في جميع المجموعات الأخرى بشكل ملحوظ. على وجه التحديد، انخفضت فئران مجموعة MNU من 17.4 ± 0.3 جرام إلى 16.2 ± 0.2 جم، ومجموعة MNU + ألدا-1 من 17.3 ± 0.3 جم إلى 16.7 ± 0.4 جم، ومجموعة MNU + دايدزين من 17.3 ± 0.3 جم إلى 16.2 ± 0.3 جم، وم...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

أشارت دراسات سابقة إلى أن منشطات ALDH2 يمكن أن توفر تأثيرات وقائية ضد تنكس الشبكية الناتج عن MNU14. ومع ذلك، لم يتم استكشاف تأثيرات التدخل لمثبطه، إلى جانب المسارات المحتملة في المسار السفلي مثل SIRT1 وERS، بالتفصيل. تشير الدراسات إلى تورط SIRT1 وERS في نماذج تدهور الشبكية، بما في ذلك تنكس الشبكية الناتج عن الضوء والفئران المعدلة وراثيا مع تنكس الشبكية15,16. النتيجة الرئيسية لهذه الدراسة الحالية كانت أن MN...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

أعلن المؤلفون عدم وجود تضارب محتمل في المصالح فيما يتعلق بالبحث أو التأليف أو نشر هذا المقال.

شكر وتقدير

وقد تم دعم هذا العمل بمنح من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 82301245)، والصناديق المشتركة لابتكار العلوم والتكنولوجيا، مقاطعة فوجيان (رقم 2024Y9653)، ومؤسسة العلوم الطبيعية في مقاطعة فوجيان في الصين (رقم 2024J011148)، ومؤسسة ما بعد الدكتوراه للعلوم في مستشفى فوتشو العام (رقم المنحة: 48678).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
4HNE KitElabscience,ChinaE-EL-0128لقياس مستويات 4HNE في المصل
4-Phenylbutyric acid (4-PBA)MCE, USHY-A0281مادة كيميائية لمنع ERS
Alda-1MCE, USHY-18936منشط ALDH2 للبحث
DaidzinMCE, USHY-N0018مثبط ALDH2 للبحث
Fluorescein sodiumGuangzhouN/Aيستخدم في  تم الحصول عليها باستخدام نظام تصوير الأوعية الفلوريسين. تم تحليل الصور الوعائية لوجود أي تسرب، مناطق غير مروية، أو التغيرات في مورفولوجيا الأوعية الشبكية.
برنامج ImageJمعاهد الصحة الوطنية، الولايات المتحدةالإصدار 1.53t
MDA KitBeyotime, ChinaS0131Sلقياس مستويات MDA في المصل
N-Nitroso-N-methylurea (MNU)MCE, USHY-34758عامل ألكلة الحمض النووي لتحريض تنكس الشبكية
ParaformaldehydeSigma-Aldrich, US30525-89-4يستخدم في أقسام من الأنسجة الشبكية 
مقياس رقمي دقيقمقياس إلكتروني، الصينSF-400السعة: 5000 غرام ´ 1 غرام/177 أونصة X0.10 أونصة، يُستخدم لتسجيل وزن جسم كل فأر 
PrismGraphPad الإصدار 5.01 برنامج التحليل الإحصائي
المجهري الدوارLEICA, GermanyRM2016يُستخدم في تحضير أقسام الشبكية
Selisistat (EX-527)MCE, USHY-15452مثبط SIRT1 للبحث
Sodium PentobarbitalSigma-Aldrich, US1.93248يُستخدم للتخدير لأبحاث لاحقة عبر الحقن داخل الصفاق (IP) 
SRT1720MCE, USHY-10532منشط SIRT1 للبحث
SumianxinJilin Shengda Animal Pharmaceutical CoN/Aيُستخدم للتخدير لأبحاث لاحقة عبر الحقن داخل الصفاق (IP) 
Tunicamycin (TUN)MCE, USHY-A0098مادة كيميائية لتحريض ERS

المراجع

  1. Gouveia, N., et al. Retinitis Pigmentosa GTPase regulator-associated retinal degeneration: integrating patient-reported outcomes, genetic, and structural biomarkers. Ophthalmol Sci. 6 (1), 100915 (2026).
  2. Sturzbecher, L., et al. Outer retina micro-inflammation is driven by T cell responses prior to retinal degeneration in early age-related macular degeneration. Front Immunol. 16, 1520188 (2025).
  3. Hajari, J. N., et al. Novel blood biomarkers to detect retinal neurodegeneration and inflammation in diabetic retinopathy. Int J Mol Sci. 26 (6), 2625 (2025).
  4. Chen, Y., et al. Retinal degeneration protein 3 mutants are associated with cell-cycle arrest and apoptosis. Cell Death Discov. 11 (1), 175 (2025).
  5. Reisenhofer, M., et al. Characteristics of Muller glial cells in MNU-induced retinal degeneration. Vis Neurosci. 33, E013 (2016).
  6. Park, D., et al. Preventive effects against retinal degeneration by Centella asiatica extract (CA-HE50) and asiaticoside through apoptosis suppression by the Nrf2/HO-1 signaling pathway. Antioxidants (Basel). 10 (4), 613 (2021).
  7. Duan, Y., et al. ALDH2 in autophagy and cell death: molecular mechanisms and implications for diseases. Mil Med Res. 12 (1), 58 (2025).
  8. Liu, H., et al. Association between ALDH2 gene polymorphism and late-onset Alzheimer disease: an up-to-date meta-analysis. Curr Alzheimer Res. 17 (2), 105-111 (2020).
  9. Lin, Y., et al. Alda-1 restores ALDH2-mediated alcohol metabolism to inhibit the NF-kappaB/VEGFC axis in head and neck cancer. Int J Mol Med. 55 (4), 55 (2025).
  10. Wang, J., et al. Alda-1 mediates cell senescence and counteracts bone loss in weightlessness through regulating mitophagy. Life Sci. 366-367, 123482 (2025).
  11. Abdulkhaliq, A. A., et al. SIRT1 in aging and diseases. J Cell Biochem. 126 (10), e70069 (2025).
  12. Yang, W., et al. CRYAA activates the SIRT1-PI3K/AKT signaling pathway by suppressing miR-155-5p to protect the RPE. Arch Biochem Biophys. 770, 110435 (2025).
  13. Navines-Ferrer, A., Pomares, E. Endoplasmic reticulum stress and rhodopsin accumulation in an organoid model of retinitis pigmentosa carrying a RHO pathogenic variant. Stem Cell Res Ther. 16 (1), 71 (2025).
  14. Yan, W., et al. Protection of retinal function and morphology in MNU-induced retinitis pigmentosa rats by ALDH2: an in vivo study. BMC Ophthalmol. 20 (1), 55 (2020).
  15. Qi, L., et al. Sirtuin type 1 mediates the retinal protective effect of hydrogen-rich saline against light-induced damage in rats. Invest Ophthalmol Vis Sci. 56 (13), 8268-8279 (2015).
  16. Ou, C., et al. Lycium barbarum L. and Salvia miltiorrhiza Bunge extract ameliorates retinitis pigmentosa in rd10 mice by affecting endoplasmic reticulum stress. J Ethnopharmacol. 337 (Pt 3), 118971 (2025).
  17. Tsubura, A., et al. Animal models for retinitis pigmentosa induced by MNU: disease progression, mechanisms and therapeutic trials. Histol Histopathol. 25 (7), 933-944 (2010).
  18. An, M., et al. Predictors of foveal microstructural reconstruction after idiopathic macular hole surgery. Photodiagnosis Photodyn Ther. 53, 104541 (2025).
  19. Chen, T., et al. Protective effects of hydrogen-rich saline against N-methyl-N-nitrosourea-induced photoreceptor degeneration. Exp Eye Res. 148, 65-73 (2016).
  20. Tao, Y., et al. The temporal topography of the N-methyl-N-nitrosourea-induced photoreceptor degeneration in mouse retina. Sci Rep. 5, 18612 (2015).
  21. Nixon, E., Simpkins, J. W. Neuroprotective effects of nonfeminizing estrogens in retinal photoreceptor neurons. Invest Ophthalmol Vis Sci. 53 (8), 4739-4747 (2012).
  22. Hu, W., et al. Global research trends on endoplasmic reticulum stress in retinal diseases from 2000 to 2024. Int Ophthalmol. 45 (1), 210 (2025).
  23. Teng, C., et al. Fucoxanthin ameliorates endoplasmic reticulum stress and inhibits apoptosis and alleviates intervertebral disc degeneration in rats by upregulating Sirt1. Phytother Res. 38 (5), 2114-2127 (2024).
  24. Sari, F. R., et al. 14-3-3 protein protects against cardiac endoplasmic reticulum stress and ERS-initiated apoptosis in experimental diabetes. J Pharmacol Sci. 113 (4), 325-334 (2010).
  25. Wan, F., et al. Knockdown of YTHDF2 initiates ERS-induced apoptosis and cancer stemness suppression by sustaining GLI2 stability in cervical cancer. Transl Oncol. 46, 101994 (2024).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

ALDH2 SIRT1 MNU Alda 1

تم نشر هذه المقالة

الفيديو قريباً

تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.