مقالة منهجية

استراتيجية متكاملة بين UHPLC-MS/MS وHRMS لفحص المركبات السامة المحتملة تحتوي على الفوران في Dioscorea bulbifera L.

DOI:

10.3791/70865

⸱

مايو 19, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1The First Affiliated Hospital of Guizhou University of Traditional Chinese Medicine, 2School of Pharmacy, Guizhou University of Traditional Chinese Medicine, 3School of Medicine and Health Management, Guizhou Medical University, 4Guizhou Provincial Engineering Research Center for the Development and Application of Ethnic Medicine and TCM, Guizhou Medical University

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

طورت هذه الدراسة استراتيجية متكاملة تجمع بين UHPLC–MS/MS وHRMS لفحص المركبات المحتملة التي تحتوي على فوران سام للكبد في Dioscorea bulbifera L.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ديوسكورا بوليفيرا إل. (DBL)، وهو دواء عشبي تقليدي يستخدم لعلاج اضطرابات وأورام الغدة الدرقية، أثار مخاوف كبيرة بشأن السلامة بسبب تأثيراته المحتملة على السمية الكبدية. تشير أبحاث سابقة إلى أن إصابة الكبد هذه قد تكون مرتبطة بالتنشيط الأيضي للمركبات المحتوية على الفوران (FCCs) الموجودة في DBL. هنا، قمنا بتوصيف FCCs ومستقلباتها التفاعلية في مستخلص DBL بشكل منهجي من خلال نهج تحليلي متكامل يجمع بين الكروماتوغرافيا السائلة فائقة الأداء مع مطيافية الكتلة التاثلية (UHPLC-MS/MS) والكروماتوغرافيا السائلة فائقة الأداء مع مطيافية الكتلة عالية الدقة (UHPLC-HRMS) المتتالية. باستخدام تحليلات مطيافية كتلية مستهدفة وغير مستهدفة، حددنا ما مجموعه 849 مكونا في مستخلص DBL المائي، بما في ذلك 10 فورانوديتيربينويدات و17 وحدة إضافية من FCC. لتوضيح مسارات تنشيط الأيض، استخدمنا الجلوتاثيون (GSH) و4-بروموبينزيلامين (BBA) كعوامل احتجاز مزدوجة ضمن نظام حضانة كبد الفئران (MLM). من خلال الأيض الذي يتوسط P450، تم حجز وتوصيف سبعة مقاربات مقابلة مشتقة من ديوسبولبين B (DSB)، C (DSC)، D (DSD)، E (DSE)، L (DSL)، N (DSN)، و2-بنتيل فوران بنجاح. تضع هذه الدراسة نهجا حساسا ومحددا للتنميط الشامل لمركبات الفوران السامة للكبد المحتمل في DBL، وتوفر رؤى قيمة حول تكوين المستقلبات التفاعلية وآليات السمية المتعلقة بالطب العشبي المحتوي على الفوران.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تعيق مخاوف السلامة المتعلقة بالطب الصيني التقليدي (TCM)، وخاصة إصابات الكبد الناتجة عن الأدوية (DILI)، فائدتها السريرية الواسعة وتحديثها 1,2,3. تشير الأدلة المتزايدة إلى أن معظم مكونات الطب الصيني التقليدي ليست سامة بطبيعتها؛ بدلا من ذلك، تنتج سمية الكبد لديهم عن تنشيط الأيض في الجسم الحي 1,4,5. تعتبر المركبات التي تحتوي على الفوران (FCCs) معروفة جيدا كمقدمات سمة للكبد بارزة، تخضع لتنشيط أيضي بوساطة P450 لإنتاج وسطيات كهرومحية عالية التفاعل، وخاصة السائدات الساينديالية، والتي تعد حاسمة في بدء سمية الكبد. تشكل هذه المستقلبات الكهروفيلية مقاربات تساهمية مع ثيولات السيستين ومجموعات أمينية من البروتينات الأساسية، مما يسهل تطور التأثيرات السامة 6,7,8.

في طب الطب الصيني الصيني، تم استخدام ديوسكورا بوليفيرا L. (DBL) على نطاق واسع لعلاج اضطرابات الغدة الدرقية والأورام وأمراض الجلد 9,10. تم عزل وتوصيف 152 مكونا كيميائيا من DBL، بما في ذلك 41 فورانوديتيربينويد11. من بين هذه المادات، ثبت أن ديوسبولبين B (DSB)، وهو مكون حيوي رئيسي، يسبب إصابات كبدية في نماذج الفئران، وهو تأثير مرتبط ارتباطا وثيقا بتكوين المادة السوبية الذاتية المشتق من DSB (DDE)12,13. مدفوعا بالتقدم في الأجهزة التحليلية، أصبح مطيافية الكتلة أداة مهمة لتحليل المكونات الكيميائية المعقدة والمستقلبات في الطب الصينيالتقليدي 14,15. تقليديا، يتم اكتشاف الأنواع المتوافقة ذات النيديال الناتج عن الأيض DSB عن طريق احتجاز أنواع كهروفيلية تحتوي على N-أسيتيل-L-ليسين مع الجلوتاثيون أو N-أسيتيل-L-سيستين، يليه تحليل LC-MS/MS لمشتقات البيرول المستقرة كيميائيا الناتجة 16,17. استنادا إلى هذا النهج، طورنا سابقا استراتيجية محسنة تستخدم الصيد المتزامن للوسطات الأيضية المشتقة من الفوران مع GSH وBBA، مع تحليل LC-MS/MS باستخدام مسح فقدان محايد بمقدار 129 دالتون ومسح أيونات تمهيدية بمقدار m/z 272 لمقتربات GSH، إلى جانب مسح أيونات التمهيد بنسبة 1:1 ل m/z 169 و171 مشتق من قسم BBA للكشف عن البيرولات (الشكل 1)18، 19. على الرغم من فعاليته للفورانويدات المعروفة، إلا أن هذا النهج يظهر محدودية ملحوظة عند تطبيقه على الخلطات المعقدة، خصوصا بالنسبة لمراكز التحكم الوظيفي التي تفتقر إلى معلومات هيكلية سابقة. لذلك، لا تزال هناك حاجة ملحة لاستراتيجية تحليلية شاملة قادرة على تمكين توصيف كيميائي دقيق للمصفوفات المعقدة للطب الصيني التقليدي مع دعم الفحص الفعال للسلفات السامة للكبد.

هنا، نقدم تقريرا عن استراتيجية متكاملة لتوصيف مراكز FCC المحتملة السمية للكبد في DBL (الشكل 2). تتضمن الاستراتيجية ثلاث خطوات رئيسية: (1) التحليل الكيميائي الشامل لمستخلص DBL المائي باستخدام علم الأيض المستهدف على نطاق واسع (WTM) بناء على UHPLC–MS/MS؛ (2) احتجاز الوسطيات التفاعلية الناتجة عن FCCs مع GSH وBBA؛ و(3) الكشف والتوضيح البنيوي لمواد GSH/BBA التي تتكون من خلال التنشيط الأيضي لمكونات سامة محتملة باستخدام HPLC–MS/MS و UHPLC–MS/MS. يتيح هذا النهج المتكامل تحديد واضح للسلفات السامة الرئيسية المسؤولة عن سمية الكبد الناتجة عن DBL من مصفوفات الطب الصيني التقليدي المعقدة، ويوفر إطارا حساسا ومحددا للغاية لتقييم سلامة طب الطب الصيني التقليدي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ملاحظة: المواد الكيميائية والمعدات المستخدمة في هذه الدراسة مدرجة في جدول المواد.

1. إعداد حل اختبار DBL

  1. جمع وتوثيق ثلاث دفعات من درنات Dioscorea bulbifera L. وفقا للمذاعة الوطنية لمعالجة الطب الصيني الصيني، قم بإزالة الجذور الليفية من الدرنات، واغسلها لإزالة الأوساخ، ثم تقطيعها إلى شرائح دائرية بسماكة 1 سم وهي طازجة، ثم جفف الشرائح في فرن هواء قسري على حرارة 60 درجة مئوية، ثم أزلها وتبردها حتى تصل إلى درجة حرارةالغرفة 20.
  2. وزن 200 جرام من DBL من كل دفعة وطحنها إلى مسحوق خشن (بحجم الجسيمات 250-850 ميكرومتر) باستخدام كسارة عالية السرعة.
  3. نقع 20 جرام من مسحوق النفط الخام في 200 مل من الماء منزعد الأيونات (1:10، بطاقت) لمدة 30 دقيقة. في نفس الوقت، تعالج مزيجا من ثلاث دفعات من المسحوق الخشن المحضر في الخطوة 1.2 (مخلوط بنسبة 1:1:1، باللون الأبيض).
  4. استخرج المادة المنقوعة عن طريق التسخين تحت الارتجاع لمدة 60 دقيقة. قم بتصفية المستخلص عبر الشاش أو منخل لإزالة البقايا غير القابلة للذوبان. أضف 200 مل من الماء منزوع الأيونات إلى البقايا المتبقية وكرر عملية الارتجاع مرتين، كل مرة لمدة 60 دقيقة. امزج جميع المصفات الثلاثة وركز المستخلص المجمع عن طريق الغليان حتى يصل إلى حجم نهائي 100 مل.
  5. انقل المستخلص المركز إلى مجفف بالتجميد بالتفريغ وقم بتخميد الليوفيتيل للحصول على المسحوق.
  6. قم بوزن دقيق 18 ملغ من كل دفعة من مسحوق المستخلص بدقة. قم بإذابة كل منهما في 1.5 مل من 50٪ أسيتونيتريل وعمل دوامة في الخليط لمدة 30 ثانية لضمان التجانس.
  7. قم بعمل الطرد المركزي للمحلول عند 13,800 x g لمدة 10 دقائق عند 4°C واجمع المادة الفائقة كمحلول حضانة MLM.
  8. بيبت 20 ميكرولتر من محلول المخزون، ثم تخفيفه إلى 1:50 مع 50٪ أسيتونيتريل ودوامة لمدة 30 ثانية. ثم يتم ترشيح المحلول عبر غشاء دقيق مسامي بحجم 0.22 ميكرومتر لجعل محلول العينة جاهزا للتحليل الطيفي الكتلي.

2. التوصيف الكيميائي ل DBL

  1. الظروف الكروماتوغرافية
    1. استخدم عمود C18 (2.1 مم × 100 مم، 1.8 ميكرومتر) واضبط درجة حرارة فرن العمود على 40 °م. تحضير الطور المحمول A كحمض فورميك 0.1٪ (v/v) في الماء وطور المحرك B كأسيتونيتريل.
    2. برمج التوتر التدرج كما يلي: 0–10 دقائق، 2٪–50٪ B; 10–11 دقيقة، 50٪–95٪ B; و11–13 دقيقة، 95٪ B. اضبط معدل التدفق على 0.4 مل/دقيقة وحقن 2 ميكرولتر من العينة.
  2. إجراء تحليل الطيف الكتلي باستخدام المعلمات التالية: مصدر الأيونات: تأين الترشيش الكهربائي IonDrive Turbo V (ESI)؛ وضع الاستحواذ: مراقبة تفاعلات متعددة (MRM) مع اكتساب متزامن في وضعي الأيونات الإيجابية والسالبة؛ جهد رش الأيون: +5.5 كيلوفولت (موجب) / −4.5 كيلوفولت (سالب)؛ غاز الستارة: 35 رطل لكل بوصة مربعة؛ درجة حرارة المصدر: 400 درجة مئوية؛ غاز مصدر الأيونات 1: 60 رطل لكل بوصة مربعة؛ غاز مصدر الأيونات 2: 60 رطل لكل بوصة مربعة؛ جهد إزالة التجميع (DP): ±100 فولت.
  3. معالجة البيانات
    1. احصل على بيانات MRM ومعالجتها باستخدام برنامج SCIEX Analyst Software (الإصدار 1.6.3). حول ملفات البيانات الخام (.wiff) إلى صيغة TXT باستخدام MSConvert. قم بتوضيح المركبات المكتشفة من خلال الاستعلام في مكتبة مايكروسوفت BiotreeDB (V2.1) المملوكة. استند التعليق إلى مطابقة أوقات الاحتفاظ (RT)، ونسب الكتلة إلى الشحن (m/z)، وأنماط التجزئة مع معايير أصيلة.

3. توصيف الاقتران من GSH/BBA الناتج في حضانات التسويق الشبكي

  1. حضانة التسويق الشبكي
    1. قم بإذابة تعليق كبد الفأر الميكروسومي على الجليد ببطء. على الثلج، جهز خليط الحضانة في أنبوب طرد مركزي دقيق بسعة 2 مل عن طريق إضافة المكونات المدرجة أدناه بشكل متسلسل على التوالي. أضف نظام تجديد NADPH في النهاية. بالنسبة لمجموعة الضابطة، استبدل نظام تجديد NADPH بحجم متساو من PBS البارد جدا. دوامة للخلط لفترة وجيزة.
      1. تحضير خليط حضانة يتكون من المكونات التالية: تعليق كبد الفئران الميكروسومي (MLM، 4 ملغ/ملتر بروتين): 125 ميكرولتر؛ محلول كلوريد المغنيسيوم (MgCl₂) (32 ميليمتر): 10 ميكرولتر؛ DBE (12 ملغ/مل) أو محلول DSB القياسي (35 ميليمتر): 10 ميكرولتر؛ محلول الجلوتاثيون (GSH) (50 ملليمتر): 100 ميكرولتر؛ محلول BBA (250 م: 10 ميكرولتر; مخزن PBS (pH 7.4، يحتوي على 1.0 مول/لتر EDTA و0.1 مول/لتر K2HPO4): 145 ميكرولتر؛ حل نظام تجديد NADPH (5.0 مللي ميل): 100 ميكرولتر.
    2. فور انتهاء الحضانة، قم بإزالة جميع الأنابيب من الحاضنة. إنهاء التفاعل الإنزيمي بإضافة 1 مل من الأسيتونيتريل البارد جدا (-20 درجة مئوية) إلى كل أنبوب.
    3. الدوامة لمدة 3 دقائق لترسيب البروتينات. الطرد المركزي عند 13,800 × g لمدة 10 دقائق عند 4 درجات مئوية.
    4. اجمع السوبرناتان، وفلتر عبر غشاء بحجم 0.22 ميكرومتر، وانقل الترشيح إلى قارورة سامبلر تلقائية.
  2. الفحص الأولي لحضانة مستخلصات DBL باستخدام HPLC-MS/MS
    1. الظروف الكروماتوغرافية
      1. استخدم عمود كربون 18 (150 مم × 4.6 مم، 3 ميكرومتر) واضبط درجة حرارة العمود على 25 درجة مئوية. تحضير الطور المحمول A كحمض فورميك 0.1٪ (v/v) في الماء وطور المحرك B كأسيتونيتريل.
      2. ركض على التدرج التالي: 0–2 دقيقة، 10٪ B; 2–15 دقيقة، زيادة خطية من 10٪ إلى 90٪ B. اضبط معدل التدفق إلى 0.8 مل/دقيقة وحقن 5 μلتر من العينة المحضرة.
    2. ظروف الطيف الكتلي. اضبط نطاق المسح الكامل على m/z 500–1000. مسح الأيونات الأولية (PI) عند m/z 169 و171، ومسح فقدان محايد (NL) بقيمة 129 Da في وضع الأيونات الموجبة، ومسح PI عند m/z 272 في وضع الأيونات السالب. اضبط المعلمات الرئيسية كما يلي: جهد رش الأيونات (IS)، +5,500 فولت (موجب) / −4,500 فولت (سالب); جهد فك التجميع (DP)، ±70 فولت؛ جهد الدخول (EP)، ±10 فولت؛ طاقة التصادم (CE)، +35 فولت (موجب) / −40 فولت (سالب)؛ جهد خروج خلايا التصادم (CXP)، ±10 فولت؛ غاز مصدر الأيون 1 و2 (GS1/GS2)، 50 psi لكل منهما؛ غاز الستارة (CUR)، 40 رطل لكل بوصة مربعة؛ ودرجة حرارة المصدر (TEM)، 650 درجة مئوية.
    3. احصل على جميع بيانات الطيف الكتلي ومعالجتها باستخدام برنامج SCIEX Analyst (الإصدار 1.6.3).
  3. تحديد مشتقات البيرول وFCCs بواسطة UHPLC-HRMS
    1. الظروف الكروماتوغرافية
      1. استخدم عمود C18 (2.1 مم × 100 مم، 1.9 ميكرومتر) واضبط فرن العمود على 30 °م. تحضير الطور المحمول A كحمض فورميك 0.1٪ (v/v) في الماء وطور المحرك B كأسيتونيتريل.
      2. برمج التدرج كما يلي: 0-20 دقيقة، 5٪-95٪ B؛ 20-21 دقيقة، 95٪ B. اضبط معدل التدفق على 0.3 مل/دقيقة وحقن 2 ميكرولتر من العينة.
    2. إجراء تحليل مطياف الكتلة باستخدام المعايير التالية: مصدر الأيونات: ESI؛ جهد رش الأيونات: +3.5 كيلوفولت (أيونات موجبة)/-2.5 كيلو فولت (أيونات سالبة); درجة حرارة الشعيرات الدموية: 320 درجة مئوية؛ درجة حرارة سخان المسبار: 350 درجة مئوية؛ غاز الغمد: 10 أرب؛ أقصى تيار رش: 100 ميكروأمبير؛ مستوى RF عدسة S: 50٪؛ طاقة التصادم: 35 فولت (أيونات موجبة) و40 فولت (أيونات سالبة)؛ مدى المسح: 100-1000 م/ز.
    3. معالجة البيانات المسبقة
      1. استنادا إلى FCCs المحددة من DBL وآلية الصيد (الشكل 1)، ارسم الاقتران المتوقع ل GSH/BBA باستخدام ChemBioDraw Ultra 14.0 (الشكل التكميلي 1).
      2. استيراد ملفات HRMS الخام (.raw) التي تم الحصول عليها إلى وحدة متصفح Qual في Xcalibur (الإصدار 4.1). أنشئ سير عمل تعريف في البرنامج لفحص الاقتران من GSH/BBA.
      3. قارن أطياف MS1 وMS 2 التجريبية مع البنى المتوقعة لمرافق GSH/BBA المشتق من FCCs (تم التنبؤ به باستخدام ChemBioDraw Ultra 14.0) بناء على آليات التقريب المعروفة (الشكل 1 والشكل 1 الإضافي). استخدم الحد الأدنى لأقصى شدة الكتلة 1 × 105 ودقة كتلة ± 10 جزء في المليون لجميع الأيونات المراقبة. تأكيد الاقترافات بناء على نمط نظائر البروم المميز (تقريبا 1:1) الذي لوحظ في كل من طيف MS1 و MS2، بما في ذلك الأيونات التشخيصية عند m/z 169 و171.
      4. تحديد الأوزان الجزيئية للعناصر الأصلية FCC عن طريق طرح كتلة وسم GSH/BBA من الأيونات الجزيئية المرصودة. استخدم 472/474 Da (C17H21O5N4BrS) للطرح.
      5. توصيف FCCs الأم في DBL بواسطة UHPLC–HRMS بناء على النتائج التي تم الحصول عليها أعلاه.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تحديد مراكز الاتصالات الفيدرالية في DBL
لتوصيف الملف الكيميائي ل DBL، تم استخدام مزيج من WTM القائم على ثلاثي رباعي الأقطاب وتحليل HRMS. سمح هذا النهج المزدوج بتحليل شامل لأزواج الأيونات المستخرجة، مما أدى إلى توليد كروماتوغرافيات أيونية مستخرجة (EICs، الشكل 3A) وكروماتوغرافيات الأيونات الكلية (TICs، الشكل 3B). تحت ظروف الكروماتوغرافية والكشف المحسنة، تم تحديد ما مجموعه 849 مركبا عبر 20 فئة كيميائية (

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ركزت التحقيقات السابقة حول سمية الكبد في DBL بشكل أساسي على الوسطيات الأيضية لمراكز التحكم الفيدرالية الفردية باستخدام استراتيجيات الالتقاط المستهدفة 9,22. على الرغم من أن هذه الأساليب توفر رؤى ميكانيكية قيمة، إلا أن فعاليتها في المصفوفات العشبية المعقدة غالبا ما تكون محدودة بسبب ضعف قابلية اكتشاف الوسطاء النشطة حيويا منخفضة الوفرة. في هذه الدراسة، طورنا سير عمل تحليلي مطور للتعرف المنهجي على FCCs السامة للكبد في DBL. الميزة الرئ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد دعم هذا العمل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 82360759)، ومؤسسة العلوم الطبيعية في مقاطعة قويتشو (رقم ZK [2024]406، ZK [2024] 397، محطة ما بعد الدكتوراه [2021]007، BSH [2024]005)، وجامعة قويتشو للطب الصيني التقليدي TD Hopes [2023]005.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
4-بروموبينزيلامينشركة جيودينغ للكيماويات (شنغهاي) للتكنولوجيا المحدودةX114214A
الأسيتونيتريلشركة سيغما-ألدريتش (شنغهاي) للتجارة المحدودة1000294000
الطرد المركزيشركة ووشي باي تاكي للتكنولوجيا الحيوية المحدودةCR3180
الكروماتوغرافيك  sample  الزجاجاتشركة تشجيانغ ALWSCI للتكنولوجيا المحدودةC0000008
ديوسبولبين Bشركة تشنغدو بوفاي دي للتكنولوجيا الحيوية المحدودة18022603
Dioscorea bulbifera L.-DBL-1؛ DBL-2؛ DBL-3تم توثيق المواد النباتية من قبل البروفيسور ويكي جيانغ (جامعة قويتشو للطب الصيني التقليدي، قويانغ، الصين)، مع إيداع عينات قسيمة في المختبر الرئيسي لعلم الأدوية الأساسي في مقاطعة قويتشو.
التوازن الإلكترونيمصنع شنغهاي أنتينغ للآلات الإلكترونيةFA1004B
حمض الفورميكشركة ثيرمو فيشر العلمية المحدودة195715
الجلوتاثيونشركة سيغما-ألدريتش (شنغهاي) للتجارة المحدودةSLBX5462
السرعة العالية  سحقشركة يونغكانغ بياو للمنتجات الهاردية المحدودةXC-2000Y
فئران كونمينغ ميكروسومات الكبد (ذكر)شركة داليان ميلون للتكنولوجيا الحيوية المحدودة.MB12496-1
كلوريد المغنيسيومبكين سولاربيو للعلوم والطاقة الشمسية شركة تكنولوجي المحدودةM8161
الميثانولشركة سيغما-ألدريتش (شنغهاي) للتجارة المحدودة646377
مرشح الميليبورشركة تيانجين جينتينغ للمعدات التجريبية المحدودةنايلون66
NADPH Na4بكين سولاربيو للعلوم والطاقة الشمسية شركة تكنولوجي المحدودة102X022
الفرنمختبر تيانجين للأدوات والمعدات شركة المعدات المحدودةGFL125
محلول ملحي مخزن بالفوسفاتبيوتايم بيوتكنولوجي   شركة المحدودةC0221B
Thermostatic  الماء   Bath  المذبذبشركة شنغهاي زيجيا للآلات المحدودةTHZ-82A
فريزر فائق الفائدةشركة ثيرمو فيشر العلمية المحدودةTDE60086FV-ULTS
منظف الموجات فوق الصوتيةشركة شنغهاي زيجيا للآلات المحدودةL10-250A
خلط الدوامةمصنع أدوات الطب في جيانغسو هايمنVM-D

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ma, Z., Shi, Z., Xiao, X., Wang, J. New insights into herb-induced liver injury. Antioxid Redox Signal. 38 (16-18), 1138-1149 (2023).
  2. Yang, Y., et al. A review of herb-induced liver injury in mainland China. Front Pharmacol. 13, 813073(2022).
  3. Shen, T., et al. Incidence and etiology of drug-induced liver injury in mainland China. Gastroenterology. 156 (8), 2230-2241 (2019).
  4. Zhou, Y., et al. Mechanism of drug-induced liver injury and hepatoprotective effects of natural drugs. Chin Med. 16 (1), 135(2021).
  5. Wang, Y., et al. Metabolic activation of toxic natural products from herbal and dietary supplements leading to toxicities. Front Pharmacol. 12, 758468(2021).
  6. Pan, J., et al. Difference in hepatotoxicity of furan-containing components in Cortex Dictamni correlates with the efficiency of their metabolic activation. Phytomedicine. 114, 154778(2023).
  7. Liao, Y., et al. DNA damage and up-regulation of PARP-1 induced by columbin in vitro and in vivo. Toxicol Lett. 379, 20-34 (2023).
  8. Tian, M., Peng, Y., Zheng, J. Metabolic activation and hepatotoxicity of furan-containing compounds. Drug Metab Dispos. 50, 2458-2471 (2022).
  9. Hu, Z., et al. Development of a mechanism-based biomarker for Dioscorea bulbifera L. exposure and hepatotoxicity in rats. Phytomedicine. 102, 154172(2022).
  10. Narzary, C., Sarkar, D., Das, P., Papi, D. Ethnobotany phytochemistry, and pharmacological activity of Dioscorea bulbifera: A comprehensive review. Chem Biodivers. 22 (1), e202401408(2025).
  11. Guan, X., et al. Bioactivity,toxicity and detoxification assessment of Dioscorea bulbifera L.: A comprehensive review. Phytochem Rev. 16 (3), 573-601 (2017).
  12. Jiang, Y., et al. Disruption of acetyl-CoA acyltransferase 2 resulting from exposure to diosbulbin B. Chem Res Toxicol. 38 (7), 1203-1214 (2025).
  13. Yang, Y., et al. Histones H2B/H3 selectively modified by acis-enedial metabolite resulting from metabolic action of diosbulbin B: Potential target proteins for antitumor agent design. J Med Chem. 68 (13), 13408-13420 (2025).
  14. Shao, L., et al. Pharmacokinetics and UPLC–MS/MS analysis of delsoline in mouse whole blood. J Anal Methods Chem. 2018, 9412708(2018).
  15. Shi, H., et al. RefMetaPlant: A reference metabolome database for plants across five major phyla. Nucleic Acids Res. 52 (D1), D1614-D1628 (2024).
  16. Tan, R., et al. Diosbulbin B: An important component responsible for hepatotoxicity and protein covalent binding induced by Dioscorea bulbifera L. Phytomedicine. 102, 154174(2022).
  17. Li, W., et al. Metabolic activation of furan moiety makes diosbulbin B hepatotoxic. Arch Toxicol. 90 (4), 863-872 (2016).
  18. Wang, K., Li, W., Chen, J., Peng, Y., Zheng, J. Detection of cysteine- and lysine-based protein adductions by reactive metabolites of 2,5-dimethylfuran. Anal Chim Acta. 896, 93-101 (2015).
  19. Zhang, Z., et al. Sensitive bromine-based screening of potential toxic furanoids in Dioscorea bulbifera L. J Chromatogr B. 1057, 1-14 (2017).
  20. National Pharmacopoeia Committee. National standard for processing of traditional Chinese medicines. , People’s Medical Publishing House. , Beijing. (1988).
  21. Wang, K., et al. Chemical identity of interaction of protein with reactive metabolite of diosbulbin B. in vitro and in vivo. Toxins. 9 (8), 249(2017).
  22. Wang, K., et al. Selective and sensitive platform for function-based screening of potentially harmful furans. Anal Chem. 86 (21), 10755-10762 (2014).
  23. Sawada, Y., et al. Widely targeted metabolomics based on large-scale MS/MS data for elucidating metabolite accumulation patterns in plants. Plant Cell Physiol. 50 (1), 37-47 (2009).
  24. Zhang, Q., et al. Formation of furan from linoleic acid thermal oxidation: (E,E)-2,4-decadienal as a critical intermediate product. J Agric Food Chem. 72 (8), 4384-4392 (2024).
  25. Fan, X. Furan formation from fatty acids as a result of storage, gamma irradiation, UV-C and heat treatments. Food Chem. 175, 439-444 (2015).
  26. Zhang, S., et al. 8-Epidiosbulbin E acetate triggers apoptosis via metabolic activation-mediated crosstalk between mitochondria and endoplasmic reticulum. Ecotoxicol Environ Saf. 302, 118614(2025).
  27. Li, W., et al. A metabolic activation-based chemoproteomic platform to profile adducted proteins derived from furan-containing compounds. ACS Chem Biol. 17 (4), 873-882 (2022).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

P450
الفيديو قريباً

مقالات ذات صلة