طورت هذه الدراسة وأكدت مبدئيا نموذج فئران لتأخر شفاء الجروح في ظروف نقص الأكسجين منخفض الضغط على ارتفاع عال.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة بحثية
* These authors contributed equally
طورت هذه الدراسة وأكدت مبدئيا نموذج فئران لتأخر شفاء الجروح في ظروف نقص الأكسجين منخفض الضغط على ارتفاع عال.
قد تسبب حالات الضغط المنخفض على ارتفاعات عالية نقص الأكسجين لفترة طويلة في الجروح وضعف الشفاء، ومع ذلك تبقى النماذج الموحدة نادرة. في هذه الدراسة، طورنا نموذجا لتأخير الشفاء من الجرح وقمت بالتحقق مبدئيا من خلال محاكاة نقص الأكسجين في الارتفاعات العالية باستخدام نظام ضغط منخفض مضبوط. تم إيواء الفئران على ارتفاعات محاكاة تتراوح بين 3000 متر (ضغط الهواء: 70.1 كيلوباسكال، ضغط الأكسجين الجزئي: 14.7 كيلو باسكال) إلى 8000 متر (ضغط الهواء: 35.6 كيلوباسكال، ضغط الأكسجين الجزئي: 7.5 كيلوباسكال) لتحديد عتبات السلامة، مع تقييم الإجهاد التأكسدي ونقص الأكسجين الجلدي. أظهرت النتائج زيادة في خطر الوفاة عند ارتفاع محاكى على ارتفاع 6000 متر، مع ملاحظة تحمل تحت 5000 متر. ارتبطت الارتفاعات المرتفعة بتفاقم الإجهاد التأكسدي وزيادة نقص الأكسجين في الجلد؛ أظهرت تأخيرات تعتمد على الارتفاع في شفاء الجرح، وانخفاض في التروية، وقمع إعادة تشكيل الكولاجين، وتفاقم الاستجابات الالتهابية. على الرغم من زيادة العوامل التجددية للأوعية الدموية، انخفضت كثافة الأوعية الدقيقة الدقيقة. بشكل عام، طورت هذه الدراسة وأكدت أوليا نموذجا للفئران مناسبا لدراسة الآليات والتدخلات في الجروح المزمنة الناتجة عن نقص الأكسجين في ارتفاعات عالية.
إصلاح جروح الجلد يمثل تحديا سريريا واسع النطاق وكبير. من الصدمات الحادة إلى أنواع مختلفة من الجروح غير الملتئمة، تفرض هذه الحالات عبئا مستمرا على أنظمة الرعاية الصحية وجودة حياة المرضى 1,2,3,4,5,6. شفاء الجروح ليس حدثا واحدا بل هو عملية متعددة المراحل متداخلة ومنسقة للغاية: الخلايا الالتهابية، خلايا البظير، الخلايا الكيراتينوية، والجهاز الوعائي الدقيق تعيد بناء الحواجز وتعيد تشكيل الأنسجة تحت تنظيم المفصل للمصفوفة خارج الخلية وشبكات الإشارات المتنوعة 7,8,9,10 . نظرا للطبيعة الاستهلاكية للطاقة للإصلاح وحساسيته الشديدة للبيئة الداخلية، يمكن أن تؤدي التغيرات في الأيض الجهازي والحالات الفسيولوجية — مثل زيادة الإجهاد التأكسدي، وخلل في تنظيم المناعة، وضعف تدفق الدم الدقيق — إلى تعطيل سلسلة الإصلاح الطبيعية في عدة نقاط، مما يؤدي إلى التهاب مطول، وتجديد غير كاف، وإعادة تشكيل غير طبيعية 9,11,12,13,14، 15.
يعد إمداد الأكسجين عاملا رئيسيا يحد من عمليات إصلاح الجرح، حيث يشارك في عملية استقلاب الطاقة وهجرة وتكاثر الخلايا، كما يضبط تكوين الأوعية الدموية والاستجابات الالتهابية من خلال مسارات إشارات نقص الأكسجين 16,17,18. نقص الأكسجين المؤقت في مرحلة الجرح المبكرة يثبت العامل المحفز لنقص الأكسجين ويبدأ برامج إصلاح تكيفية. ومع ذلك، عندما يصبح نقص الأكسجين مفرطا أو مستمرا، رغم أن إشارات تكوين الأوعية الدموية قد تكون مزيعة بشكل تعويضي، إلا أنها قد تفشل في ترجمتها إلى إعادة بناء الأوعية الدقيقة الفعالة. وفي الوقت نفسه، يصبح تبديل الأنماط البلعمية وانحدار الالتهاب أكثر عرضة لاختلال التوازن، مما يشكل دورة مفرغة من "نقص الأكسجين-الالتهاب-إعادة تدوير" 19,20,21,22. وهذا مهم بشكل خاص في البيئات المرتفعة: انخفاض الضغط الجوي يقلل من ضغط الأكسجين الجزئي المستحهم، مما يؤدي إلى نقص الأكسجين المستمر الذي يزيد من خطر ضعف شفاء الجروح والمضاعفات المرتبطة بالعدوى 23,24,25,26.
التعرض للارتفاعات العالية يثير استجابة واضحة لنقص الأكسجين في البشر. يمكن أن تؤدي البيئات المرتفعة إلى نقص أكسجة نسيجية مستمر، ونقص التروية، واستجابات التهابية في مواقع الجروح28. قد تعيق هذه التغيرات الفسيولوجية المرضية عملية الشفاء من خلال تعزيز أنواع الأكسجين التفاعلية المفرطة، وتنشيط البروتيازات، وتحفيز الشيخوخة الخلوية، وفي الوقت نفسه تعطيل وظيفة الخلايا الجذعية الميزنشيمية29,30. الدراسات التي تقيم تأثيرات التعرض للارتفاعات العالية على شفاء جروح الجلد البشرية لا تزال محدودة. لذلك، يمكن لاستخدام نماذج حيوانية منخفضة الضغط لنقص الأكسجين أن يساعد في التحقق من تأثير العوامل المرتبطة بالارتفاع على إصلاح الجرح.
أبلغت نماذج حيوانية سابقة على ارتفاعات ثابتة عن تأخر في شفاء الجروح؛ ومع ذلك، لا تزال التأثيرات المعتمدة على الارتفاع، وعتبة الأمان للتعرض المطول لحالات الضغط المنخفض، والأدلة المباشرة على نقص الأكسجين الجلدي المحلي غير واضحة26. علاوة على ذلك، هناك نقص في التقييم المنهجي لضعف الشفاء، مما حد من الأبحاث حول الآليات الأساسية وتحديد أهداف التدخل المحتمل31. في هذه الدراسة، طورنا وأكدنا بشكل أولي نموذج جرح جلدي يعتمد على نظام تحكم منخفض الضغط لمحاكاة نقص الأكسجين منخفض الضغط على ارتفاعات عالية تحت ظروف مضبوطة. باستخدام استراتيجية التعرض المحاكى للارتفاع بدرجة متدرجة، حددنا أولا هوامش الأمان للتعرض المستمر للضغط المنخفض وقمنا بتقييم التأثيرات البيولوجية لنقص الأكسجين الناتج عن الضغط المنخفض من خلال مؤشرات جهازية. والأهم من ذلك، أكدنا أيضا في الجسم الحي أن البيئة منخفضة الضغط تسبب بالفعل تقييدا محليا لإمداد الأكسجين في الجلد. لاحقا، أظهرنا أن نقص الأكسجين المستمر تحت ضغط الدم يؤخر إغلاق الجرح بطريقة تعتمد على الارتفاع، مصحوبا بتغيرات نسيجية واضطرابات رئيسية في المسارات. بشكل عام، طورت هذه الدراسة وأكدت أوليا منصة نموذجية حيوانية للجروح المزمنة المرتبطة بنقص الأكسجين في المرتفعات، مما مكن من توضيح الآليات وتقييمها المنهجي للاستراتيجيات العلاجية اللاحقة32.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت مراجعة جميع الإجراءات التجريبية المتعلقة بالحيوانات والموافقة عليها من قبل لجان الأخلاقيات في جامعة العلوم الإلكترونية والتكنولوجيا في الصين (رقم 106142025091534170) وجامعة الطب العسكري (رقم ) AMUWEC20265509). يظهر سير العمل الرسومي لتصميم التجارب والتحليل في هذه الدراسة في الشكل 1. بالإضافة إلى ذلك، تم إدراج الكواشف والمعدات المستخدمة في هذه الدراسة في جدول المواد.
الحيوانات التجريبية والبيان الأخلاقي
استخدمت هذه الدراسة ذكور فئران سبراج-داولي (SD)، تم شراؤها من شركة تشنغدو داشو لابراتير للحيوانات، الصين. جميع الحيوانات خضعت لفترة تأقلم مدتها 7 أيام تحت ظروف قياسية قبل التجارب.
معايير الإدراج والاستبعاد
كانت معايير إدراج الحيوانات كما يلي: ذكور فئران SD، من عمر 6 إلى 8 أسابيع، وزن الجسم 200–250 جرام، يظهرون بصحة جيدة ويظهرون سلوكا طبيعيا، وخالون من آفات أو التهابات جلدية.
كانت معايير استبعاد الحيوانات كما يلي: جروح تظهر عدوى واضحة بعد نمذجة الجروح؛ جروح مع شفاء أو جروح غير تقليدية؛ الوفاة أثناء التجربة أو الوفاة العرضية بسبب التخدير.
كانت معايير استبعاد نقاط البيانات كما يلي: صور جروح مع قشور واسعة، انسداد شعر، أو إضاءة غير متساوية؛ صور تصوير التباين بالليزر (LSCI) التي تظهر تشوهات حركية؛ مقاطع الأنسجة التي تظهر تجاعيد واضحة أو تجزئة أو مناطق مستهدفة مفقودة؛ عينات مصل تظهر تحلل دموي واضح؛ صور التألق المناعي (IF) أو الكيمياء المناعية (IHC) مع التعرض المفرط أو تحديد موقع غير صحيح للأجسام المضادة
التعامل مع الاستثناءات:
بالنسبة لجميع الحيوانات المستبعدة أو نقاط البيانات، تم إعادة الحصول على بيانات صحيحة من خلال تجارب تكميلية لضمان أن حجم العينة النهائي الصحيح لكل مجموعة هو N ≥ 3 لجميع تحليلات النقاط النهائية.
نظام التحكم في الضغط المنخفض وبيئة نقص الأكسجين المحاكاة على ارتفاعات عالية
تم إنشاء بيئة نقص الأكسجين المحاكاة على ارتفاعات عالية باستخدام نظام تحكم منخفض الضغط. يسمح هذا النظام بتنظيم ضغط هواء المقصورة بدقة لإعادة إنتاج ضغط جوي يتوافق مع ارتفاعات مختلفة، مما يقلل الضغط الجزئي للأكسجين المحيط ويحفز التعرض لنقص الأكسجين المتحكم فيه (الشكل 2A).
تم تعديل ضغط المقصورة لمحاكاة ارتفاعات 3000 م، 4000 م، 5000 م، 6000 م، 7000 م، و8000 م، مع تقديم معاملات مفصلة في الجدول 1. طوال التجربة، تم إسكان فئران SD في مجموعات حسب تخصيصها التجريبي. خلال تشغيل المقصورة، تم مراقبة الضغط الداخلي ودرجة الحرارة والرطوبة باستمرار لضمان بقاء جميع الظروف البيئية مماثلة لتلك الموجودة في مبيت المختبر القياسي، باستثناء الضغط. حافظت بيئة السكن على درجة حرارة تتراوح بين 22–24 درجة مئوية، ورطوبة نسبية بين 50٪–60٪، ودورة ضوء/ظلام لمدة 12 ساعة، ووفرت وصولا مجانيا إلى الطعام القياسي ومياه الشرب.
تقييم السلامة للتعرض للضغط المنخفض وتحليل البقاء
لتقييم هوامش الأمان للتعرض المستمر للضغط المنخفض، تم ترقيم الفئران بشكل فردي وتوزيعه عشوائيا إلى مجموعات تجريبية باستخدام تسلسل أرقام عشوائية مولد بالحاسوب (دالة RAND في إكسل). تم إجراء التخصيص بواسطة باحث لم يشارك في رعاية الحيوانات اللاحقة أو جمع البيانات أو تقييم النتائج. استنادا إلى دراسات مرجعية على الحيوانات التي شملت التعرض لتدرجات ارتفاعات عالية، تم تحديد حجم العينة لكل مجموعة عند12,33. تم تقسيم الفئران إلى مجموعة تحكم طبيعية (500 متر فوق مستوى سطح البحر) ومجموعات ارتفاع محاكاة على ارتفاعات 3000 م، 4000 م، 5000 م، 6000 م، 7000 م، و8000 متر. تم إسكان الفئران في كل مجموعة بشكل مستمر في بيئتها الخاصة لمدة 30 يوما. كل يومين، يتم إعادة نظام التحكم في الضغط المنخفض لفترة وجيزة إلى مستوى سطح البحر لمدة 30 دقيقة للسماح بتنظيف الأقفاص وتوفير الطعام والماء. أثناء تخفيف الضغط وإعادة الضغط، يحافظ على معدل تغير الضغط عند حوالي 300 م/دقيقة لتقليل خطر الإصابة الضجيجية. خلال هذه الفترة، تم ملاحظة وتسجيل الحالة العامة لجميع الفئران وأي أحداث وفيات يوميا. تم رسم منحنيات البقاء باستخدام طريقة كابلان-ماير، وأجريت اختبارات التصنيف اللوغاريتمي لمقارنة فروق البقاء بين المجموعات.
اكتشاف مؤشرات الإجهاد التأكسدي في المصل
في اليوم الحادي والعشرين من التعرض لانخفاض الضغط، تم جمع عينات دم وريدي من الفئران تحت التخدير. بعد الوقوف في درجة حرارة الغرفة، تم فصل المصل عن طريق الطرد المركزي (1000 × جرام لمدة 15 دقيقة عند 4 درجات مئوية) وتخزينه عند -80 درجة مئوية للاستخدام لاحقا. تم قياس مستويات إنزيم اللاكتات الهيدروجيناز (LDH)، والمالونديالديهايد (MDA)، وإنزيم الأكسجين الفائق (SOD) في المصل باستخدام مجموعات الفحص المقابلة.
تقييم حالات نقص الأكسجين في أنسجة الجلد
تم استخدام مجموعة كشف نقص الأكسجين لتقييم نقص الأكسجين في أنسجة الجلد. باختصار، في اليومين الرابع والسابع من التعرض لضغط منخفض، تم حقن الفئران داخل الصفاق ببيموزايد (60 ملغ/كغ)؛ تم القتل الرحيم للفئران بعد ساعة من الحقن، وتم جمع نسيج جلدي من الظهر للتحليل. إجراءات القتل الرحيم التفصيلية هي كما يلي: وفقا لإرشادات الجمعية الأمريكية للطب البيطري بشأن القتل الرحيم، تم وضع الحيوان في غرفة تحفيز وتخدير باستخدام الأكسجين الذي يحتوي على 4–5٪ من الإيزوفلوران. بمجرد فقدان الحيوان للوعي، يتم تقليل تركيز الأيزوفلوران إلى 2–3٪ ويحافظ عليه لمدة لا تقل عن 10 دقائق. قبل إجراء خلع عنق الرحم كإجراء تأكيدي، يجب التأكد من أن نبض القلب والتنفس قد توقفا. تم حفظ عينات الأنسجة بالتجميد في النيتروجين السائل وتخزينها عند -80 درجة مئوية للاستخدام لاحقا. تم تجهيز الأقسام باستخدام ميكروتوم كريوستات. تم إجراء تلوين متقطع الصيام لتحديد المناطق التي تعاني من نقص الأكسجين داخل الأنسجة.
تم التقاط جميع صور الفلورة باستخدام ماسح شرائح آلي. إعدادات معلمات الفلورة كانت كما يلي: DAPI (طول موجة الإثارة 365 نانومتر ± 10 نانومتر، طول موجة الانبعاث 440 نانومتر ± 40 نانومتر)، Cy3 (طول موجة الإثارة 542–566 نانومتر، طول موجة الانبعاث 579–611 نانومتر)، وCy5 (طول موجة الإثارة 628 نانومتر، طول موجة الانبعاث 692 نانومتر). تم تحليل إشارات نقص الأكسجين بشكل كمي باستخدام برنامج ImageJ.
نموذج جرح جلدي كامل السماكة في الفئران
لتقييم التغيرات في شفاء جروح الجلد تحت ظروف ضغط منخفض مستمر، تم أولا تجميع الفئران وتكييفها مع بيئاتها قبل نمذجة الجروح. تم ترقيم الفئران بشكل فردي وتعيينها عشوائيا إما لمجموعة التحكم الطبيعية أو مجموعات التعرض منخفض الضغط لمحاكاة ارتفاعات 3000 متر و4000 متر و5000 متر باستخدام تسلسل أرقام عشوائي مولد بالحاسوب (دالة RAND في إكسل). تم إجراء العشوائية بواسطة باحث لم يكن مشاركا في عملية إنشاء الجرح اللاحقة، أو الرعاية بعد العملية، أو تقييم النتيجة. المعايير التفصيلية لكل مجموعة هي كما يلي: كانت مجموعة التحكم النورموكسية تقع على ارتفاع 500 متر فوق مستوى سطح البحر (الضغط الجوي: 101 كيلوباسكال، ضغط الأكسجين الجزئي: 21 كيلو باسكال)؛ مجموعة 3000 متر (70.1 كيلو باسكال، 14.7 كيلو باسكال); مجموعة 4000 متر (61.6 كيلو باسكال، 13.1 كيلو باسكال); ومجموعة 5000 متر (54 كيلو باسكال، 11.3 كيلو باسكال).
بعد فترة التكيف التي استمرت 7 أيام، تم تخدير فئران SD والحفاظ عليها تحت التخدير عن طريق استنشاق 2٪ من إيزوفلوران. في الوقت نفسه، يتم إعطاء حقنة تسرب موضعية تحتوي على ليدوكائين بنسبة 5٪ تحتوي على الإبينفرين (نسبة التخفيف: 1:100,000) في موقع الجراحة المحدد لتوفير تسكين الألم والاستوماتاز حول العملية. باستخدام ثقب خزعة (مع شفرة دائرية قطرها 10 مم في القاعدة)، قم بإنشاء شق جلدي. اضغط على قبضة الخزعة على جلد الفأر الظهري، ثم قم بتدويرها بلطف بحيث تقطع الشفرة الدائرية الجلد تدريجيا حتى تصل إلى اللفافة تحت الجلد السطحية. عند إزالة ثقب الخزعة، يتكون شق جلدي دائري منتظم قطره حوالي 10 مم.
بعد تكوين الجروح، تم إعادة الفئران في كل مجموعة إلى بيئاتها الأصلية والحفاظ عليها حتى نقطة التجربة النهائية، مما ضمن استمرار عملية الشفاء بالكامل ضمن ظروف الأكسجين المحددة مسبقا.
التقييم الكلي لعملية شفاء الجروح
تم التقاط صور للجرح في الأيام 0 و2 و4 و6 و8 و10 و12 و14 بعد الجرح تحت إضاءة موحدة ومسافة تصوير ثابتة. تم قياس مساحة الجرح باستخدام الصورة J. باختصار، تم استيراد صور الجروح التي تم الحصول عليها في كل نقطة زمنية إلى الصورة J، وتم معايرتها وفقا لشريط المقياس، وتم تحديد هوامش الجرح يدويا لتحديد منطقة الجرح34. تم حساب التئام الجرح كما يلي: التئام الجرح (٪) = (منطقة الجرح الأولية − المنطقة الحالية)/مساحة الجرح الأولية × 100٪.
تقييم الدورة الدموية الدقيقة للجرح
في اليوم السابع من شفاء الجرح، تم تقييم تدفق الدم الدقيق في منطقة الجرح باستخدام نظام LSCI. قبل الفحص، تم تخدير الفئران عن طريق الاستنشاق باستخدام 2٪ من إيزوفلوران وتثبيتها على طاولة عمليات مضبوطة في درجة الحرارة للحفاظ على درجة حرارة الجسم. كانت منطقة الجرح الظهري مكشوفة بالكامل، وكان مسبار الليزر الحساس موضوعا عموديا على بعد حوالي 20 سم فوق الجرح. تم ضبط قدرة المجس على 110 ميلي واط، وتردد أخذ العينات إلى 30 هرتز، ووقت التعريض إلى 3 ثوان. في الظروف المظلمة، احصل على صورة تدفقات الدم بلون زائف لمنطقة الجرح. استخدم برنامج LSCI لتحديد منطقة الجرح يدويا في صورة تدفق الدم الشبه ملونة؛ ثم يقوم البرنامج بحساب قيمة تدفق الدم تلقائيا لتلك المنطقة خلال فترة 3 ثانية (بوحدات عشوائية [A.U.]). وأخيرا، تصدير قيم التروية إلى برنامج مناسب للرسم الوظيفي.
تحليل التلوين النسيجي وإعادة تشكيل الكولاجين
تم قتل الحيوانات في أوقات محددة، وتم جمع الجروح السليمة وأنسجة الجلد المحيطة، وتثبيتها، وتجفيفها، وزرع البارافين، وتقسيمها. الهيماتوكسيلين والإيوزين (HE): يستخدم لتقييم عرض الجرح، ومدى إعادة الظهارة، وسماكة الجلد المتجددة؛ صبغة ماسون الثلاثية اللون: تستخدم لتقييم ترسيب ألياف الكولاجين وحساب نسبة حجم الكولاجين؛ تلوين سيريوس الأحمر: يستخدم لتمييز الكولاجين من النوع الأول (Col I) والكولاجين من النوع الثالث (Col III) تحت المجهر الضوئي المستقطب وحساب نسبة Col I إلى Col III.
التلوين الكيميائي المناعي
خضعت أقسام البارافين لإزالة الشمع، وإعادة الترطيب، وسحب المستضدات قبل التلوين ب IHC أو الصيام. تم حضان الأجسام المضادة الأولية خلال الليل عند درجة حرارة 4 درجات مئوية، تلاها إضافة أجسام مضادة ثانوية مقابلة. يتم توفير معلومات محددة عن الأجسام المضادة والتخفيف المقابل في جدول المواد. تم تطوير مقاطع IHC باستخدام DAB، بينما استخدمت مقاطع IF أجساما مضادة ثانوية فلورية مع صبغة مضادة DAPI للنوى 35,36. تم التقاط جميع الصور تحت ظروف متطابقة وتم قياسها باستخدام برنامج ImageJ.
التحليل الإحصائي
تعرض جميع البيانات كمتوسط ± انحراف معياري. تم إجراء تحليلات إحصائية باستخدام برنامج GraphPad Prism. للمقارنات بين مجموعات متعددة في نقطة زمنية واحدة، تم تطبيق تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA)، وعندما تم اكتشاف فرق عام ذو دلالة، استخدم اختبار المقارنة المتعددة لتوكي في التحليلات بين المجموعات اللاحقة. بالنسبة لبيانات شفاء الجروح التي تم تقييمها عبر عدة نقاط زمنية، تم إجراء تحليل النوفاع المبكر ثنائي الاتجاه مع مجموعة العلاج والوقت كعوامل مستقلة لتقييم التأثيرات الرئيسية وكذلك تفاعلهما. كما أجريت تحليلات ما بعد الحدث باستخدام اختبار المقارنة المتعددة لتوكي. لتقييم القوة الإحصائية بشكل أعمق، تم إجراء تحليل طاقة لاحق في برنامج G*Power بناء على نقطة النهاية الأساسية (شفاء الجرح في اليوم 14).
استخدم تحليل البقاء طريقة كابلان-ماير لرسم منحنيات البقاء، مع استخدام اختبارات الترتيب اللوغاريتمي لمقارنة فروق البقاء بين المجموعات. في المقارنات الزوجية بين مجموعات متعددة، تم تطبيق تصحيح بونفيروني للتحكم في خطر أخطاء النوع الأول من عدة مقارنات. كانت جميع الاختبارات الإحصائية ذات ذين الذيلين، حيث اعتبر P < 0.05 ذات دلالة إحصائية.
جميع تقييمات النتائج، بما في ذلك قياسات منطقة الجرح، والتحليلات الكمية النسيجة والكيميائية المناعية، وتحليلات LSCI، أجريت بواسطة باحث واحد كان أعمى عن تعيينات مجموعات الدراسة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
التحقق من هوامش الأمان لنقص الأكسجة المستمر الناتج عن الضغط المنخفض
أظهر تحليل البقاء في كابلان–ماير تحولا تدريجيا نحو الأسفل في منحنيات البقاء مع زيادة الارتفاع المحاكى، حيث لوحظت أحداث الوفيات لأول مرة في مجموعة 6000 متر (الشكل 2B). أظهرت المقارنات الزوجية مع تصحيح بونفيروني عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية في معدلات البقاء بين المجموعة الضابطة ومجموعات 6000 متر إلى 8000 متر. بحلول اليوم 30، كانت معدلات البقاء النهائية لمجموعة الضابطة، م...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تؤثر الظروف على الارتفاعات العالية في عملية شفاء الجرح من خلال تحفيز نقص الأكسجة في الأنسجة، وانخفاض تدفق الدم، والاستجابات الالتهابية، مما يعزز الإنتاج المفرط لأنواع الأكسجين التفاعلية، وتنشيط البروتياز، وشيخوخة الخلايا، وخلل في الخلايا الجذعية الميزنشيمية 27,28,29,30. نظرا للقيود الحالية في أبحاث الإنسان على تأثيرات الارتفاعات العالية، فإن تطوير نماذج حيوانية...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يعلن المؤلفون عدم وجود مصالح متنافسة.
تم تمويل هذا البحث من قبل صناديق البحوث الأساسية للجامعات المركزية، UESTC (ZYGX2025YGLH006)؛ مشروع أبحاث العلوم الصحية في مقاطعة سيتشوان (2025-205)؛ مؤسسة العلوم الطبيعية في شيغاتسي، التبت، الصين (RKZ2024ZR-003).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| ماسح شرائح آلي | أوليمبوس | VS200 | مسح قسم الأنسجة |
| ألبومين مصل البقر (BSA) | سيرفيسبيو | GC305010 | كاشف حجب لمادة IHC/IF |
| الأجسام المضادة CD206 | بروتين تك | 18704-1-AP | اكتشاف بلاعم M2 (التخفيف 1:200) |
| الأجسام المضادة CD31 | أبكام | ab182981 | اكتشاف كثافة الأوعية الدقيقة (التخفيف 1:800) |
| الجسم المضاد CD86 | هوابيو | ER1906-01 | اكتشاف بلاعم M1 (التخفيف 1:200) |
| الأجسام المضادة CK19 | هوابيو | ET1601-6 | تقييم إعادة الظهارة (التخفيف 1:200) |
| مجموعة ركيزة DAB | ZSGB-BIO | ZLI-9018 | الركيزة الكروموجينية لتلوين IHC |
| ماعز مضاد للأرانب IgG متصل ب FITC | سيرفيسبيو | GB22303 | الأجسام المضادة الثانوية الفلورية لمتثال الصيام المتقطع (التخفيف 1:100) |
| G*Power | جامعة دويسبورغ-إيسن، ألمانيا | www.gpower.hhu.de | حساب القوة الإحصائية |
| برنامج GraphPad Prism | برنامج جراف باد | https://www.graphpad.com/ | التحليل الإحصائي وتوليد الرسوم البيانية |
| محلول تلوين الهيماتوكسيلين | J& كي ساينتيفك | LM10N13 | H& التلوين الإلكتروني |
| HIF-1α الأجسام المضادة | البيوس | BS-0737R | اكتشاف الإشارات المرتبطة بنقص الأكسجين (التخفيف 1:100) |
| ماعز مضاد للأرانب IgG مع HRP | سيرفيسبيو | GB23303 | الأجسام المضادة الثانوية ل IHC (التخفيف 1:100) |
| نظام التحكم في الضغط المنخفض | شركة شنغهاي يويان إنسترومنتس المحدودة. | LP-1500 | يستخدم لمحاكاة نقص الأكسجين منخفض الضغط على ارتفاعات عالية متدرج |
| مجموعة هيبوكسيبروب-1 | شركة هيبوكسي بروب | HP1-100 | يستخدم للكشف عن نقص الأكسجين داخل الجسم الحي |
| مجموعة تضخيم إشارة التيراميد IF555 | سيرفيسبيو | G1233 | يستخدم لتعزيز تضخيم إشارة الفلورة |
| الأجسام المضادة IL-10 | هوابيو | HA722032 | اكتشاف السيتوكين المضاد للالتهابات (التخفيف 1:100) |
| IL-1 & بيتا؛ الأجسام المضادة | هوابيو | HA723965 | اكتشاف السيتوكين المضاد للالتهاب (التخفيف 1:100) |
| برنامج ImageJ | المعاهد الوطنية للصحة (NIH)، الولايات المتحدة الأمريكية | https://imagej.net/ij/download.html | قياس الصور |
| إيزوفلوران | شركة RWD لايف ساينس، المحدودة. | R510-22-16 | |
| الجسم المضاد Ki-67 | هوابيو | HA721115 | اكتشاف تكاثر خلايا الكيراتينويات (التخفيف 1:400) |
| نظام تصوير تدفق الدم بالليزر سبكيل | شركة RWD لايف ساينس، المحدودة. | RFLSI ZW | تقييم تروية الدم |
| مجموعة اختبار LDH | معهد نانجينغ جيانتشنغ للهندسة الحيوية | A005-1-2 | قياس LDH في المصل |
| ماسون مجموعة التلوين ثلاثية الألوان | سيرفيسبيو | G1006-100ML | تحليل ترسيب الكولاجين |
| مجموعة اختبار MDA | معهد نانجينغ جيانتشنغ للهندسة الحيوية | A003-1-1 | تقييم أكسدة الدهون |
| مجموعة تلوين سيريوس الحمراء | سيرفيسبيو | G1078-100ML | تمايز الكولاجين I/III |
| مجموعة اختبار SOD | معهد نانجينغ جيانتشنغ للهندسة الحيوية | A001-1-1 | قياس نشاط SOD في المصل |
| TNF-&; الأجسام المضادة | هوابيو | ER65189 | اكتشاف السيتوكين المضاد للالتهابات (التخفيف 1:200) |
| الأجسام المضادة VEGF-A | هوابيو | ET1604-28 | اكتشاف الإشارات المرتبطة بتكوين الأوعية الدموية (التخفيف 1:200) |