مقالة مراجعة

Caenorhabditis elegans: نموذج In vivo متعدد الاستخدامات لفك رموز مسارات إشارات تسرطن الخلايا المحفوظة

DOI:

10.3791/72682

⸱

أغسطس 14, 2026

 , 
1Institute of Pediatrics, Children's Hospital of Fudan University, 2Department of Rheumatology, The Second Affiliated Hospital of Jiaxing University

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تُقيّم هذه المراجعة Caenorhabditis elegans كـ نموذج مكمل in vivo لأبحاث مسارات السرطان، مع التركيز على إشارات RTK-RAS-ERK وNotch وWnt المحفوظة، والطفرات التمثيلية، والقراءات الكمية، والأدوات الجينية، وفحص مضادات السرطان، والتطبيقات القائمة على الاستشعار الكيميائي.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Caenorhabditis elegans (C. elegans) هو نموذج حيواني متعدد الخلايا شفاف، وفعال من حيث التكلفة، وقابل للتطويع جينياً، وهو يمثل جسراً يربط بين مقاييس زراعة الخلايا التقليدية والأنظمة الثديية في أبحاث آليات السرطان. تغطي هذه المراجعة التي تركز على المسارات دراسات ممثلة لمسارات التأشير المحفوظة RAS/MAPK و Notch و Wnt، وهي منظمة حول حفظ المسارات، والسلالات الطافرة، والأنماط الظاهرية الكمية، والأدوات الجينية، والتطبيقات في دراسات الآليات، وفحص المركبات، والمقاييس القائمة على الاستشعار الكيميائي. نصف أولاً حفظ مكونات المسارات والأنماط الظاهرية ذات الصلة بالأورام، بما في ذلك الإفراط في تكاثر الخط الجرثومي والنمط الظاهري متعدد الفتحات (Muv). ثم نقوم بفهرسة طفرات ممثلة، مثل سلالات glp-1 و let-60 ذات اكتساب الوظيفة، ونماذج gld-1 و lip-1 ذات فقدان الوظيفة، والتي تتيح تحليل صيانة الخلايا الجذعية، والتكاثر المنتبذ، واختلال تنظيم التأشير. بالإضافة إلى ذلك، نناقش الأدوات المتاحة لبناء النماذج، بما في ذلك تداخل الرنا (RNA interference)، والنقل الجيني، و MosTIC، و TALENs، و CRISPR/Cas9، مع تسليط الضوء على نقاط قوتها وقيودها في دراسات وظائف الجينات المرتبطة بالسرطان. وأخيراً، نلخص التطبيقات المنشورة لـ C. elegans في فحص الأدوية المضادة للسرطان، واكتشاف المسارات، والاستشعار الكيميائي المرتبط بالأورام. من خلال دمج الحفظ الجيني مع التنميط الظاهري in vivo القابل للتوسع، يوفر C. elegans منصة تكميلية لتوليد الفرضيات، والتحقق من صحة المسارات، والاكتشاف العلاجي في المراحل المبكرة، بينما يجب إدراك قصوره في المناعة التكيفية وتعقيد الأعضاء عند نقل النتائج إلى بيولوجيا السرطان البشرية.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لا يزال السرطان سببًا رئيسيًا للمرض والوفيات على مستوى العالم. وقد قدّر تقرير GLOBOCAN 2022 وجود ما يقرب من 20 مليون حالة إصابة جديدة بالسرطان و9.7 مليون حالة وفاة بسببه في جميع أنحاء العالم، بما في ذلك سرطانات الجلد غير الميلانومية1. ونظرًا للتوقعات بزيادة معدلات الإصابة بالسرطان مع النمو السكاني والشيخوخة2، تظل الأنظمة التجريبية القادرة على تحليل الآليات المحفوظة ودعم التحديد الفعال للأهداف ذات الأولوية أمرًا ضروريًا.

غالباً ما يتم استقصاء آليات السرطان في الخلايا المستزرعة ثم اختبارها لاحقاً في نماذج الفقاريات. ومع ذلك، فإن المزرعة الخلوية لا تعيد إنتاج فيزيولوجيا الكائن الحي بأكمله، بينما تتسم دراسات الفقاريات بالتكلفة العالية والإنتاجية المنخفضة نسبياً. لذا، يمكن لنموذج تكميلي يجمع بين القابلية للتطويع الجيني، والسياق متعدد الخلايا، وسرعة تنفيذ التجارب أن يسد الفجوة في تساؤلات مختارة بين المقاييس in vitro والتحقق من النتائج في الثدييات.

Caenorhabditis elegans (C. elegans) تملأ هذا المكان البيئي المتمم. ففي درجة حرارة 20 °C، تتطور من جنين إلى بالغ خصب في غضون 3 أيام تقريبًا، ويبلغ متوسط عمرها المختبري المعتاد من 2–3 أسابيع، وتنتج حوالي 300 سليل ذاتي3. وقد حدد OrthoList 2 نظائر C. elegans لـ 10,678 من أصل 20,310 من الجينات البشرية المشفرة للبروتين (52.6%)4، بينما كشف تحليل بروتيني مقارن سابق عن وجود متماثلات بشرية لما يقرب من 83% من بروتينات C. elegans5. بالإضافة إلى ذلك، فإن ما يقرب من 72% من الجينات البشرية المنسقة المسببة للسرطان تمتلك نظيرًا واحدًا على الأقل في C. elegans6. وتشمل العمليات المحفوظة الموت الخلوي المبرمج، والتحكم في الدورة الخلوية، والتمثيل الغذائي، والاستجابات للإجهاد، ومسارات إشارات RTK–RAS–ERK وNotch وWnt وTGF-β والأنسولين/IGF3,4,6. ومع ذلك، فإن وجود النظائر لا يعني التكافؤ الوظيفي الكامل، إذ تفتقر الديدان إلى أعضاء الفقاريات، والمناعة التكيفية، وتكون الأوعية الدموية، والجهاز الدوري6.

تركز هذه المراجعة على مسارات إشارات RTK (مستقبل تيروزين كيناز)–RAS–ERK، وNotch، وWnt، لأن هذه المسارات محفوظة تطورياً، وغالباً ما يحدث فيها خلل تنظيمي في السرطان البشري، وترتبط بظواهر نمطية في C. elegans يمكن تسجيلها بسهولة. ونقوم هنا بالتمييز بين أورام الخط الجرثومي الحقيقية وبين فرط التنسج النمائي أو أنماط تحديد مصير الخلايا في غير موضعها، ونلخص السلالات التمثيلية والقراءات الكمية، ونراجع الأدوات الجينية لبناء النماذج، ونناقش الدراسات التي أوضحت فيها تجارب الديدان آليات مكافحة السرطان أو مكنت من تحديد أولويات المركبات.

مراجعة ومنظور

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

حفظ مسارات التأشير المسرطنة في C. elegans
يندفع السرطان من خلال مجموعة من التغيرات الجينية والوراثية فوق الجينية التي تعطل التكاثر، والتمايز، والبقاء، وصيانة الجينوم، والتمثيل الغذائي، والتفاعلات مع البيئة الدقيقة. لا يمكن لـ C. elegans إعادة إنتاج كل سمة من سمات الخباثة البشرية، ولكن يمكنها عزل وظائف المسارات المحفوظة في سياق حيوان كامل. بناءً على ذلك، فإن النماذج الأكثر إفادة هي التي تربط بين آفة جزيئية محددة ونمط ظاهري قابل للقياس مع تشبيه واضح للسرطان البشري.

مسار تأشير RTK-RAS-ERK
يعزز تنشيط مستقبل تيروزين كيناز (RTK) عملية ديمرة المستقبلات أو إعادة ترتيبها، والفسفرة الذاتية المتبادلة لبقايا التيروزين السيتوبلازمية7. وتعمل مواقع ربط الفسفو-تيروزين على جذب البروتينات المهايئة وعوامل تبادل نيوكليوتيدات الغوانين، والتي تحول RAS من الحالة المرتبطة بـ GDP إلى الحالة المرتبطة بـ GTP7,8. ويقوم RAS-GTP بجذب كينازات RAF إلى الغشاء البلازمي، حيث يبدأ تنشيط RAF شلال الكيناز RAF–MEK–ERK8,9. ويقوم ERK المنشط بفسفرة ركائز سيتوبلازمية ونووية تنظم عمليات التكاثر، والتمايز، والبقاء، ومصير الخلية10. وبناءً على ذلك، يمكن لطفرات RAS المسرطنة أو نشاط RTK الشاذ أن يحافظ على مخرجات هذا المسار بشكل مستقل عن التحكم الطبيعي خارج الخلية8,11.

تشفّر C. elegans عدة مستقبلات تيروزين كيناز (RTKs)، بما في ذلك LET-23/EGFR وEGL-15/FGFR12. وأثناء تحريض الفرج، يقوم LIN-3/EGF بتنشيط LET-23 وشلال الإشارات المحفوظ SEM-5/GRB2–SOS-1–LET-60/RAS–LIN-45/RAF–MEK-2–MPK-1/ERK12,13,14. ويحدد التنظيم المعتمد على ERK لكل من LIN-1 وLIN-31 مصائر الخلايا السليفة للفرج12,15. ويؤدي انخفاض نشاط المسار إلى ظهور نمط ظاهري عديم الفرج، بينما يؤدي التنشيط المفرط — مثل أليلات let-60 ذات الوظيفة المكتسبة — إلى ظهور النمط الظاهري متعدد الفرج (Muv)15,16. كما ينظم المسار ذاته تطور القناة الإخراجية، والارتباطات الرحمية الفرجية، والعديد من العمليات الذكرية والجنينية12,17,18,19. وتتحكم إشارات EGL-15/FGFR في هجرة أرومات العضلات الجنسية، وصيانة العضلات، وتوجيه المحاور العصبية، والتوازن المائي20,21,22,23. ونظرًا لأن مخرجات المسار تعتمد على النسيج والمرحلة، فإن النماذج ذات الصلة بالسرطان والمعطية للمعلومات يتم تحديدها من خلال آفة جزيئية محددة، وسياق نسجي ذي صلة، وقراءة كمية12.

تأشير Notch
يُعد Notch مسار تأشير يعتمد على التلامس، حيث يقوم ربيطة Delta/Serrate/LAG-2 (DSL) المرتبطة بالغشاء في خلية ما بتنشيط مستقبل Notch في خلية مجاورة24,25. وخلال مرحلة نضج المستقبل، يحدث انشطار S1 في المسار الإفرازي24. ثم يؤدي ارتباط الربيطة إلى كشف موقع S2 لبروتياز عائلة ADAM، يليه انشطار S3 بواسطة γ-secretase24,25. ويدخل نطاق Notch intracellular domain المتحرر إلى النواة ويشكل معقداً نسخياً مع بروتينات CSL-family المرتبطة بالـ DNA والمنشطات المساعدة من عائلة Mastermind24. وفي C. elegans، تكون العوامل النووية المقابلة هي LAG-1 و SEL-825.

تمتلك C. elegans مستقبلين من نوع Notch، وهما LIN-12 و GLP-125. في الخط الجرثومي للبالغين، توفر خلايا الطرف القاصي (DTCs) ربيطات DSL، وبشكل أساسي LAG-2 و APX-1، لمستقبل GLP-1 الموجود على الخلايا الجذعية/السلفية للخط الجرثومي (GSCs) المجاورة26,27. ويحافظ النشاط العالي لـ GLP-1 على التكاثر الميتوزي؛ وبينما تبتعد الخلايا عن خلايا DTC، يسمح انخفاض تأشير Notch لمسارات GLD بتعزيز الدخول في الانقسام الاختزالي28,29. ويمكن لأليلات glp-1 ذات اكتساب الوظيفة أن تحافظ على انقسام ميتوزي منتبذ وتنتج أوراماً في الخط الجرثومي25,30. بينما يتحكم LIN-12 في العديد من قرارات مصير الخلايا الجسدية، بما في ذلك قرار الخلية الراسية/الرحم البطني؛ ويؤدي نشاط LIN-12 التأسيسي في الخلايا السلفية للفرج إلى ظهور نمط ظاهري متعدد الفرج (Muv)، كما يمكن لـ GLP-1 المنشط أن يحدد مصائر فرجية بشكل منتبذ25,31,32.

يمكن أن تنشأ أورام السلالة الجرثومية القريبة أيضاً من خلال آلية "البيئة الكامنة" غير المستقلة عن الخلية33. في طفرات pro-1 أو طفرات اكتساب الوظيفة glp-1(ar202)، يؤدي تأخر الدخول في الانقسام الاختزالي إلى سماح الخلايا الجرثومية القريبة غير المتمايزة بمواجهة ربيطات DSL، بما في ذلك APX-1 وARG-1، من خلايا غمد الغدد التناسلية الناضجة33. بعد ذلك، يؤدي استمرار تنشيط GLP-1/Notch إلى الحفاظ على الانقسام المتساوي واستمرار الورم33. وفي المقابل، يؤدي فقدان gld-1 إلى حدوث أورام في السلالة الجرثومية بسبب فشل التمايز الاختزالي، ولا ينبغي تصنيف ذلك على أنه تنشيط مباشر لمسار Notch34.

إشارات Wnt
تنظم إشارات Wnt مصير الخلية، وقطبيتها، وهجرتها، وتكاثرها من خلال فروع متعددة تعتمد على السياق35,36. في مسار β-catenin التقليدي، يؤدي ارتباط Wnt بمستقبلات Frizzled و LRP5/6 إلى تثبيط معقد التدمير AXIN–APC–GSK3–CK1، مما يسمح بتراكم β-catenin والتعاون مع عوامل TCF/LEF في النواة35,36. ويعد خلل تنظيم هذا المسار أمراً محورياً في العديد من السرطانات البشرية، ولا سيما سرطان القولون والمستقيم36.

تستخدم C. elegans كلاً من مسار BAR-1/β-catenin التقليدي ومسار Wnt/β-catenin المتباين للتناظر37,38. وتساهم الإشارات المعتمدة على BAR-1 في قرارات مصير الخلايا بعد المرحلة الجنينية، بما في ذلك تطور الفرج37,38. وفي مسار التناظر، يعمل WRM-1/β-catenin وLIT-1/NLK على تقليل مستويات POP-1/TCF النووية في إحدى الخلايا الوليدة، بينما يعمل SYS-1/β-catenin كمحفز نسخ مشترك؛ وتؤدي المستويات غير المتساوية من POP-1 وSYS-1 إلى توليد مصائر متميزة للخلايا الوليدة37,38,39. وتختلف هذه الخصائص النوعية للديدان عن مسار Wnt التقليدي في الثدييات، ويجب تفسيرها على أنها بنيات إشارية متميزة37,38.

تتحكم إشارات Wnt غير التقليدية في قطبية الخلايا وهجرتها من خلال مسارات تعتمد على Frizzled ومسارات شبيهة بمستقبلات تيروزين كيناز35,40. وفي C. elegans، تعمل ربيطات ومستقبلات Wnt على توجيه هجرات الخلايا العصبية والخلايا الميزودرمية وتوجيه الانقسامات غير المتماثلة37,41. وتعتبر هذه القراءات ذات صلة ببيولوجيا السرطان لأن تغير القطبية والقدرة على الحركة هما من المتطلبات الأساسية للغزو، على الرغم من أن الدودة لا تمثل الانتشار النقيلي بحد ذاته36,37.

تشمل الأنماط الظاهرية التمثيلية لمسار Wnt عيوباً في تطور الفرج في الحيوانات التي تعاني من فقدان وظيفة bar-142، وعيوباً في القطبية الجنينية في طفرات mom-2 أو mom-537,43، وعيوباً في هجرة الخلايا أو توجيه المحاور العصبية في طفرات mig-1 أو prkl-137,41. وتعد هذه السلالات نماذج نمو تطورية خاصة بالمسار وليست مكافئات مباشرة للأورام الخبيثة36,37.

اختيار الأنماط الظاهرية والمؤشرات المقاسة ذات الصلة بالسرطان
ينبغي استخدام مصطلح "ورم" بحذر في C. elegans النماذج المتعلقة بالسرطان6. C. elegans تحتوي أورام الخلايا الجرثومية على خلايا جرثومية تتكاثر في غير موضعها وتعاني من خلل في التمايز، وبناءً على ذلك، فإنها توفر أقرب نموذج مماثل في الديدان للنمو الورمي المفرط.30,34,44وفي المقابل، يعكس النمط الظاهري متعدد الفتحات (Muv) تحفيزاً منتبذاً لمصير خلايا الفتحة ونمواً نسيجياً؛ وهو مؤشر حساس لنشاط مسار RAS/MAPK أو Notch، ولكنه ليس ورماً خبيثاً.15,16,25في الخط الجرثومي القاصي، يعمل إشارات Notch المشتقة من الخلايا الطرفية القاصية (DTC) على الحفاظ على مجمع الخلايا السلفية الانقسامية.28,44اكتساب الوظيفة الببتيد الشبيه بالجلوكاجون-1 أليلات أو عيوب في جينات التمايز الانقسامي المنصف مثل gld-1 يمكن توسيع الخلايا الجرثومية الانقسامية30,34,44في الخلايا السليفة للفرجي، let-60يمكن أن يؤدي اكتساب الوظيفة في RAS أو انخفاض نشاط المنظمات السلبية مثل LIP-1 إلى إنتاج أو تعزيز الأنماط الظاهرية لـ Muv15,16,45وتلخص هذه الفئات المظهرية بشكل تخطيطي في الشكل 1. الشكل 1أ يوضح السياق التشريحي الطبيعي والقراءات المرجعية المستخدمة في C. elegans المقايسات المتعلقة بالسرطان. الشكل 1د يربط مسار إشارات RAS/MAPK المعتمد على LIN-3/LET-23 بقرارات مصير الخلايا السلفية للفرج، بينما الشكل 1هـ يوضح هذا الشكل إشارات GLP-1/Notch في نيش الخلايا الجذعية الخطية الجرثومية القاصية وآليات الورم في النيش الكامن. الشكل 1F يفصل بشكل أكبر بين فرع Wnt التقليدي المعتمد على BAR-1 وبين مسار عدم تماثل Wnt/β-catenin، مما يؤكد أن القراءات المتعلقة بـ Wnt في *C. elegans* يجب تفسير هذه النتائج على أنها أنماط ظاهرية نمائية أو حساسة للمسارات، بدلاً من كونها نماذج مباشرة للأورام الخبيثة. وتشمل النقاط النهائية الكمية الموصى بها نسبة حيوانات Muv، وعدد نتوءات الفرج ectopic، وطول المنطقة الانقسامية، والخلايا الجرثومية الموجبة لـ phospho-histone H3، ومساحة الغدة التناسلية، والخصوبة، وتمركز المراسل (reporter localization)، وعلاقات الجرعة والاستجابة.15,28,30,44,45. الجدول 1 يلخص السلالات الممثلة، وآفاتها الجزيئية، وأنماطها الظاهرية، والمقاييس الكمية، والتطبيقات المتعلقة بالسرطان.

الأدوات الجينية والتجريبية
يمكن إنشاء نماذج C. elegans عن طريق الطفرات الكلاسيكية، أو نقل الجينات، أو تداخل الحمض النووي الريبي (RNAi)، أو تحرير الجينوم الموجه46,47,48. ويؤدي الحقن المجهري للمناسل إلى إنشاء مصفوفات خارج كروموسومية بكفاءة46، بينما يمكن أن يؤدي التشعيع، والقصف بالجسيمات الدقيقة، وأنظمة إدخال النسخة الواحدة إلى توليد سلالات معدلة وراثياً مدمجة أو ذات عدد نسخ منخفض، مما يقلل من عيوب عدد النسخ والفسيفسائية47,48. كما تتيح إنزيمات ريكومبينيز المحددة للموقع، والإدخال أحادي النسخة بوساطة Mos1، ونوكلياز أصابع الزنك، وTALENs، وخاصة CRISPR/Cas9، إجراء عمليات حذف مستهدفة، وطفرات نقطية، ووسم داخلي، وإنشاء أليلات شرطية، ومتغيرات بشرية48,49. ويجب اختيار الطريقة بناءً على ما إذا كانت الدراسة تتطلب تثبيطاً عابراً، أو فقداً مستقراً، أو اكتساباً للوظيفة، أو نوعية نسيجية، أو تعبيراً داخلياً، أو استبدالاً بمتغير سرطاني بشري48,49.

يمكن إيصال تداخل الحمض النووي الريبي (RNAi) عن طريق الحقن الغددي، أو النقع، أو تغذية البكتيريا التي تعبر عن الحمض النووي الريبي مزدوج الشريط50. وتتميز هذه الطريقة بأنها سريعة وقابلة للتوسع، ولكن كفاءة التثبيط تختلف باختلاف الأنسجة والجينات، كما ينتج عن تداخل الحمض النووي الريبي (RNAi) نمط ظاهري مشابه (phenocopy) بدلاً من أليل محدد قابل للتوريث50. وبالنسبة للدراسات المركبة، يجب أن يتضمن التحقق من صحة النموذج عملية الإنقاذ الجيني أو التفاعل الجيني (epistasis)، واستخدام أليلات مستقلة، وقراءات متعامدة للتمييز بين التأثيرات الخاصة بالمسار وبين السُمية، أو التأخر النمائي، أو انخفاض تناول الغذاء6,44.

يُلخص سير العمل العملي لتطبيق هذه النماذج في الشكل 2. في هذا الإطار، يتم أولاً ربط السؤال المتعلق بالسرطان بمسار إشارات محفوظ وآفة جزيئية محددة، يليه اختيار سلالة C. elegans المناسبة أو نموذج هندسي، ونمط ظاهري كمي، وضوابط التحقق. يساعد هذا التصميم المتسلسل في تمييز التعديل الخاص بالمسار عن السمية العامة أو التأخر في النمو، ويوفر أساساً منطقياً للتطبيقات اللاحقة في دراسات الآلية، أو ترتيب المركبات حسب الأولوية، أو المقايسات القائمة على الاستشعار الكيميائي.

التطبيقات السابقة
توضح الدراسات المنشورة كيف يمكن لنماذج C. elegans المحددة بناءً على المسارات أن تدعم تحديد أولويات المركبات في المراحل المبكرة. في منصة EGFR المحددة لطفرات معينة، قام Bae وزملاؤه بالتعبير عن مستقبلات LET-23 خيمرية تحتوي على نطاق تيروزين كيناز EGFR البشري في خلايا الفرج، بما في ذلك النوع البري، والمتغيرات L858R و T790M/L858R. أنتجت الخيمرات المنشطة L858R و T790M/L858R نمطاً ظاهرياً متعدد الفرج (Muv)، مما جعل النسبة المئوية للحيوانات ذات نمط Muv تعمل كنقطة نهاية كمية للفحص. قام Gefitinib و erlotinib بتثبيط النمط الظاهري Muv المرتبط بـ L858R ولكن ليس النمط الظاهري المرتبط بـ T790M/L858R. وفي فحص تجريبي شمل 8,960 جزيئاً صغيراً، تم تحديد AG1478 و U0126 كمثبطات لإشارات EGFR أو MEK على التوالي51. كما قام Medina وزملاؤه بتقييم مرشحي إعادة استخدام الأدوية itraconazole و disulfiram و etodolac و ouabain في سلالات طافرة محددة المسار تمثل اضطرابات Wnt و Notch و RAS–ERK. استُخدم إنقاذ العقم أو عدم الخصوبة أو أنماط Muv الظاهرية كنقطة نهاية نمطية لتحديد أولويات المركبات52. وفي وقت أقرب، اختبر Makhoul وزملاؤه مركب EAPB02303 في حيوانات MT2124 let-60(n1046gf) و MT4698 let-60(n1700gf). وقاموا بقياس كل من نسبة الحيوانات التي تظهر نمط Muv الظاهري وعدد الفرج المنتبذة لكل حيوان، ولاحظوا تثبيطاً نمطياً يتفق مع انخفاض نشاط مسار LET-60/RAS–MAPK. كما دعمت تجاربهم التكميلية حول طول العمر وتمركز DAF-16 وجود تأثير على إشارات insulin/IGF-1–PI3K–AKT53. ومع ذلك، يجب تفسير الإنقاذ النمطي في نماذج الديدان هذه كدليل على تعديل المسار وتحديد أولويات المركبات في المراحل المبكرة، وليس كدليل مباشر على الفعالية المضادة للسرطان في الأورام الثديية.

تميز نماذج أورام الخلايا الجرثومية بين مسارات مختلفة آلياً تؤدي إلى التكاثر المستمر. حيث تحافظ أليلات glp-1 ذات الوظيفة المكتسبة على عملية الانقسام الفتيلي في الخط الجرثومي المعتمدة على GLP-1/Notch، بينما تكشف طفرات pro-1 عن آلية حيز كامنة غير ذاتية الخلية، تدعم فيها ربيطات DSL الموجودة في خلايا الغمد القريبة الحفاظ غير الطبيعي على الانقسام الفتيلي. وفي المقابل، يؤدي فقدان وظيفة gld-1 إلى تكوين أورام في الخلايا الجرثومية بشكل أساسي من خلال خلل في التمايز الاختزالي بدلاً من التنشيط المباشر لمسار Notch. وبناءً على ذلك، توفر هذه النماذج أنظمة متكاملة لدراسة الحفاظ على الخلايا الجذعية، وفشل التمايز، وبدء تكون الأورام المعتمد على البيئة الدقيقة30,33,34.

وتشمل التطبيقات الأخرى المتعلقة بالسرطان عمليات فحص الفتك الاصطناعي لـ LIN-35/Rb، ومقاييس موت الخلايا المبرمج المعتمد على CEP-1/p53، ودراسات إشارات AMPK وPI3K6,44. وينبغي النظر في التطبيقات القائمة على الاستشعار الكيميائي بشكل منفصل عن نمذجة الأورام وفحص الأدوية. ففي هذه الدراسات، يتم تعريض C. elegans لمستقلبات طيارة أو بولية مرتبطة بالسرطان، وتُقاس الاستجابات السلوكية كإشارات تشخيصية محتملة. ولا تقوم هذه المقاييس بنمذجة نمو الورم أو نشاط الأدوية المضادة للسرطان، وتتطلب تحقُّقاً تحليلياً وسريرياً قبل تحويلها إلى تطبيقات تشخيصية54,55.

وجهات نظر
تكمن القيمة القصوى لـ C. elegans عندما يتوقف السؤال البيولوجي على آليات ذاتية خلوية أو جهازية محفوظة يمكن ربطها بنمط ظاهري كمي. غير أن محدوديتها — بما في ذلك غياب المناعة التكيفية، والأوعية الدموية، والأنسجة الطلائية النوعية للأعضاء، والانتقال الورمي الطبيعي — تحول دون النمذجة المباشرة للعديد من التفاعلات بين الورم والسدى والجهاز المناعي. وتشمل الفرص المستقبلية التحرير الداخلي للمتغيرات المشتقة من المرضى، والاضطراب النوعي للأنسجة، والتصوير عالي المحتوى، والتنميط الظاهري الآلي، وتكامل علم الوراثة في الديدان مع علم الجينوم للسرطان البشري. وينبغي التعامل مع النتائج كأدلة مولدة للآليات أو الأهداف، والتحقق من صحتها في خلايا ثديية أو نماذج فقارية قبل استخلاص استنتاجات انتقالية.

الاستنتاجات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

C. elegans هو نظام in vivo تكميلي وقابل للتعديل وراثياً لتحليل مسارات الإشارات المحفوظة المرتبطة بالسرطان وتحديد أولويات الأهداف أو المركبات المرشحة. وتكمن أكثر تطبيقاته فائدة في الربط الصريح بين التغيرات السرطانية البشرية والنظير الدودي المحفوظ، وسياق الأنسجة، والأنماط الظاهرية الكمية، مثل فرط تكاثر الخط الجرثومي، أو تكوين الفتحات الفرجية المتعددة، أو نشاط المراسل، أو الاستجابة الدوائية. ويجب أن يفرق التفسير بين الأورام الجرثومية الحقيقية ومخرجات مسار النمو، كما ينبغي أن يكون مدعوماً بأليلات مستقلة، أو إنقاذ وراثي أو تأثير فوقي، وعناصر تحكم للسمية والتأخر في النمو. وعلى الرغم من أن الدودة لا يمكنها نمذجة المناعة التكيفية، أو الأوعية الدموية، أو البنية الخاصة بالأعضاء، أو النقائل السرطانية، إلا أنها تظل قيمة لتوليد الفرضيات السريع والتحقق الأولي من المسارات. إن العمل المستقبلي الذي يجمع بين التحرير الداخلي للمتغيرات المشتقة من المرضى، والاضطراب الخاص بالأنسجة، وتحديد الأنماط الظاهرية آلياً، والتحقق عبر الأنواع سيعزز من عملية النقل إلى بيولوجيا السرطان في الثدييات.

figure-results-1
الشكل 1. قراءات إشارات مرتبطة بالسرطان ومحفوظة في C. elegans. (A) التشريح في النوع البري والقراءات الطبيعية. (B) فرط نمو شبيه بالأورام في الخط الجرثومي مع توسع في قراءات المنطقة الانقسامية. (C) النمط الظاهري متعدد الفرج (Muv) كقراءة كمية للمسار. (D) إشارات LIN-3/LET-23 RAS/MAPK في الخلايا السليفة للفرج. (E) إشارات GLP-1/Notch في مكان الخلايا الجذعية للخط الجرثومي وآليات أورام المكان الكامن. (F) تنقسم فروع Wnt في C. elegans إلى الفرع التقليدي المعتمد على BAR-1 ومسار عدم تماثل Wnt/β-catenin. تعتبر الأنماط الظاهرية المرتبطة بـ Muv وWnt قراءات نمائية أو حساسة للمسار وليست نماذج مباشرة للأورام الخبيثة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

figure-results-2
الشكل 2. إطار عمل عملي يربط نماذج C. elegans بالآليات والتطبيقات المتعلقة بالسرطان. يربط سير العمل بين اختيار المسار، وتحديد الآفة الجزيئية، واختيار قراءات النموذج، والتحقق الكمي، والتطبيق المرتبط بالسرطان. وتشمل الاستخدامات التمثيلية مقايسات تثبيط Muv لـ RAS/MAPK، ودراسات آليات أورام الخلايا الجرثومية، وضوابط المسار والسمية، والتطبيقات القائمة على الاستشعار الكيميائي غير الورمي. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

السلالةالنمط الجينيالآفة الجزيئية / فرع المسارالنمط الظاهري / القراءةالنقطة النهائية الكمية الموصى بهاالاستخدام النموذجي / تنبيه
CB1026lin-1(e1026) IV.الناتج النسخي لـ RAS/MAPK؛ كابح LIN-1 ETS الموجود في المصب من MPK-1/ERKمتعدد الفرج (Muv)% من حيوانات Muv؛ البروزات الفرجية ectopic/حيوانناتج RAS/MAPK الفرجوي؛ قراءة لمسار نمائي، وليس ورماً خبيثاً
CB1275lin-1(e1275) IV.الناتج النسخي لـ RAS/MAPKMuv% Muv؛ البروزات/حيوانأليل بديل لـ lin-1 لتأكيد ناتج المسار
MT3516lin-1(e1275) cha-1(p1152) IV.ناتج RAS/MAPK في خلفية جينية معقدةMuv% Muv؛ التوقيت النمائي؛ الخصوبةيستخدم بحذر ما لم تكن خلفية cha-1 ذات صلة بالمقايسة
MT301lin-31(n301) II.الناتج النسخي المعتمد على RAS/MAPK؛ عامل forkhead LIN-31Muv% Muv؛ تموضع مؤشر مصير خلايا VPCقراءة مصير الخلايا الفرجوية في المصب من LET-60/MPK-1
MT1001lin-1(e1777) IV.الناتج النسخي لـ RAS/MAPKMuv% Muv؛ البروزات/حيوانتم التصحيح من ناتج مرتبط بـ Wnt إلى ناتج مرتبط بـ RAS/MAPK
MT2124let-60(n1046gf) IV.كسب وظيفة LET-60/RAS؛ إشارات RAS/MAPK مفرطة النشاطMuv% Muv؛ البروزات/حيوان؛ تثبيط الاستجابة للجرعةفحص المركبات المضادة للسرطان لـ RAS/MAPK ومقايسات تثبيط المسار
MT4698let-60(n1700gf) IV.كسب وظيفة LET-60/RAS؛ إشارات RAS/MAPK مفرطة النشاطMuv% Muv؛ البروزات/حيوان؛ تثبيط الاستجابة للجرعةسلالة فحص المركبات لـ RAS/MAPK؛ تستخدم مع MT2124 في دراسات تثبيط المسار EAPB02303
MT309lin-15B&lin-15A(n309) X.متعدد الفرج الاصطناعي؛ تنظيم سلبي لتحريض الفرج/خلفية تسمح بـ RASMuv% Muv؛ النفاذية؛ البروزات/حيوانخلفية Muv معدلة أو حساسة؛ ليست نموذج ورم مباشر
ZM10942lin-15B&lin-15A(n765) X; hpIs774; hpEx4292.خلفية Muv اصطناعية مع سياق مراسل/جين منقولMuv / قراءة المراسل% Muv؛ تموضع/كثافة المراسلتستخدم عندما تكون قراءة المراسل ضرورية؛ يصف الجين المنقول/المراسل في النص
JK590glp-1(q35)/eT1 III; him-5(e1490)/eT1 V.بتر الطرف الكربوكسيلي لمستقبل GLP-1/Notch؛ Muv شبه سائد مع نمط ظاهري GlpMuv عقيم / Glp% Muv؛ العقم؛ تعداد النسلقراءة نمائية للفرج/الخط الجرثومي معتمدة على Notch؛ لا تدرج ضمن نماذج أورام الخط الجرثومي البعيدة
GC833glp-1(ar202) III.كسب وظيفة GLP-1/Notchورم في الخط الجرثوميطول المنطقة الانقسامية؛ خلايا +pH3؛ مساحة الغدد التناسلية؛ الخصوبةانقسام مستمر معتمد على Notch في نموذج ورم الخط الجرثومي
BS3164unc-32(e189) glp-1(ar202) III.كسب وظيفة GLP-1/Notch مع مؤشر/خلفية unc-32ورم في الخط الجرثوميطول المنطقة الانقسامية؛ خلايا +pH3؛ مساحة الغدد التناسلية؛ الخصوبةخلفية بديلة لـ glp-1(ar202)؛ يذكر المؤشر/الخلفية في الطرق
GC565pro-1(na48)/mIn1 [dpy-10(e128) mIs14] II.نموذج المتكأ الكامن؛ الدخول المتأخر في الانقسام الاختزالي يسمح بالتعرض لربيطة DSL القريبة وتنشيط GLP-1/Notchورم في الخط الجرثومي القريبخلايا انقسامية قريبة؛ خلايا +pH3؛ مساحة الغدد التناسلية؛ الخصوبةبدء ورم غير مستقل عن الخلية؛ يميز عن كسب وظيفة glp-1 المباشر
IT540gap-3(kp1) I; puf-8(zh17) unc-4(e120)/mnC1 [dpy-10(e128) unc-52(e444)] II.خلفية مختلطة مرتبطة بـ RAS/MAPK وارتباط RNA/التمايزMuv وورم في الخط الجرثومي% Muv؛ طول المنطقة الانقسامية؛ خلايا +pH3؛ الخصوبةتستخدم فقط مع مسوغ آلي واضح لأن الأنماط الظاهرية تنشأ من مسارات مختلطة
XA774gld-1(q485)/gna-2(qa705) unc-55(e1170) I.فشل في التمايز الاختزالي/GLD؛ ليس تنشيطاً مباشراً لـ Notchورم في الخط الجرثوميطول المنطقة الانقسامية؛ خلايا +pH3؛ مساحة الغدد التناسلية؛ الخصوبةنموذج فشل التمايز الاختزالي؛ لا تصنف على أنها Notch
JK3025gld-1(q485) I/hT2 [bli-4(e937) let-?(q782) qIs48] (I;III).فشل في التمايز الاختزالي/GLDورم في الخط الجرثوميطول المنطقة الانقسامية؛ خلايا +pH3؛ الخصوبةنموذج ورم gld-1 متوازن؛ يميز عن أورام glp-1/Notch
JK1466gld-1(q485)/dpy-5(e61) unc-13(e51) I.فشل في التمايز الاختزالي/GLDورم في الخط الجرثوميطول المنطقة الانقسامية؛ خلايا +pH3؛ الخصوبةخلفية بديلة لـ gld-1؛ تميز عن الأورام المدفوعة بـ Notch
JK4299gld-2(q497) gld-1(q361) I/hT2 [bli-4(e937) let-?(q782) qIs48] (I;III).مسار الدخول في الانقسام الاختزالي/التمايز GLD-1/GLD-2ورم في الخط الجرثوميطول المنطقة الانقسامية؛ خلايا +pH3؛ الخصوبةنموذج ورم لمسار GLD؛ ليس تنشيطاً مباشراً لـ Notch
JK4832gld-1(q485) gld-2(q497) lst-1(ok814) sygl-1(tm5040) I/hT2 [bli-4(e937) let-?(q782) qIs48] (I;III).مسار GLD بالإضافة إلى خلفية منظم الخلايا الجذعيةورم في الخط الجرثوميطول المنطقة الانقسامية؛ خلايا +pH3؛ الخصوبة؛ تعبير المؤشرنموذج مصير GLD/الخلايا الجذعية معقد آلياً؛ تذكر الفرضية الدقيقة
JK2879gld-2(q497) gld-1(q485)/hT2 [bli-4(e937) let-?(q782) qIs48] (I;III).مسار التمايز GLD-1/GLD-2ورم في الخط الجرثوميطول المنطقة الانقسامية؛ خلايا +pH3؛ الخصوبةنموذج ورم بديل متوازن لمسار GLD
BS3156unc-13(e51) gld-1(q485)/hT2 [dpy-18(h662)] I; +/hT2 [bli-4(e937)] III.فشل في التمايز الاختزالي/GLD مع طفرات في المؤشر/الخلفيةورم في الخط الجرثوميطول المنطقة الانقسامية؛ خلايا +pH3؛ الخصوبةيستخدم مع ذكر خلفية النمط الجيني بوضوح
JK5760lst-1(ok814) sygl-1(q828) gld-2(q497) gld-1(q361) I/hT2 [bli-4(e937) let-?(q782) qIs48] (I;III).مسار GLD بالإضافة إلى خلفية هدف Notch/منظم الخلايا الجذعيةورم في الخط الجرثوميطول المنطقة الانقسامية؛ خلايا +pH3؛ الخصوبة؛ تعبير مؤشر الخلايا الجذعيةنموذج معقد للتمايز/الخلايا الجذعية في الخط الجرثومي؛ لا تدرجه تحت تصنيف “Notch”

الجدول 1: سلالات طافرة ممثلة من C. elegans وقراءات المسارات الموصى بها والمرتبطة بالسرطان. تستند تسميات السلالات والأنماط الجينية إلى سجلات CGC/WormBase؛ وتعتمد تعليقات المسارات والأنماط الظاهرية على المراجع15,16,25,30,33,34,44,45,51,52,53. يلخص هذا الجدول السلالات الممثلة التي توضح قراءات محددة للمسارات شائعة الاستخدام في دراسات C. elegans المرتبطة بالسرطان.

الاختصارات: CGC، مركز وراثة Caenorhabditis؛ DSL، ربيطة عائلة Delta/Serrate/LAG-2؛ EGFR، مستقبل عامل نمو البشرة؛ ERK، كيناز منظم الإشارة خارج الخلية؛ gf، اكتساب الوظيفة؛ GLD، خلل في تطور الخط الجرثومي؛ Glp، نمط ظاهري معيب في تكاثر الخط الجرثومي؛ lf، فقدان الوظيفة؛ MAPK، كيناز البروتين المنشط بالميتوجين؛ MEK، كيناز MAPK/ERK؛ Muv، متعدد الفرج؛ +pH3، إيجابي للفوسفوهيستون H3؛ RAS، ساركوما الجرذ؛ RNAi، تداخل الحمض الريبي النووي؛ VPC، خلية سلفية فرجية؛ Wnt، البروتين الجناحي/المتكامل. ETS، محول E26 النوعي.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعلن المؤلفون عن عدم وجود تضارب في المصالح.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نتوجه بالشكر إلى مركز Caenorhabditis Genetics Center، الممول من مكتب برامج البنية التحتية للأبحاث التابع لـ NIH (P40 OD010440)، لتوفيره معلومات وموارد السلالات. تم دعم هذا العمل من قبل مؤسسة العلوم التابعة لمكتب الصحة بمقاطعة Zhejiang (رقم 2025KY1608).

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Bray F, et al. Global cancer statistics 2022: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. CA Cancer J Clin. 2024;74(3):229-263.
  2. Soerjomataram I, Bray F. Planning for tomorrow: global cancer incidence and the role of prevention 2020-2070. Nat Rev Clin Oncol. 2021;18(10):663-672.
  3. Corsi AK, Wightman B, Chalfie M. A transparent window into biology: a primer on Caenorhabditis elegans. Genetics. 2015;200(2):387-407.
  4. Kim W, Underwood RS, Greenwald I, Shaye DD. OrthoList 2: a new comparative genomic analysis of human and Caenorhabditis elegans genes. Genetics. 2018;210(2):445-461.
  5. Lai CH, Chou CY, Ch'ang LY, Liu CS, Lin WC. Identification of novel human genes evolutionarily conserved in Caenorhabditis elegans by comparative proteomics. Genome Res. 2000;10(5):703-713.
  6. Cerón J. Caenorhabditis elegans for research on cancer hallmarks. Dis Model Mech. 2023;16(6):dmm050079.
  7. Lemmon MA, Schlessinger J. Cell signaling by receptor tyrosine kinases. Cell. 2010;141(7):1117-1134.
  8. Karnoub AE, Weinberg RA. Ras oncogenes: split personalities. Nat Rev Mol Cell Biol. 2008;9(7):517-531.
  9. Udell CM, Rajakulendran T, Sicheri F, Therrien M. Mechanistic principles of RAF kinase signaling. Cell Mol Life Sci. 2011;68(4):553-565.
  10. Yoon S, Seger R. The extracellular signal-regulated kinase: multiple substrates regulate diverse cellular functions. Growth Factors. 2006;24(1):21-44.
  11. Malumbres M, Barbacid M. RAS oncogenes: the first 30 years. Nat Rev Cancer. 2003;3(6):459-465.
  12. Sundaram MV. Canonical RTK-Ras-ERK signaling and related alternative pathways. WormBook. 2013:1-38.
  13. Hill RJ, Sternberg PW. The gene lin-3 encodes an inductive signal for vulval development in C. elegans. Nature. 1992;358(6386):470-476.
  14. Aroian RV, Koga M, Mendel JE, Ohshima Y, Sternberg PW. The let-23 gene necessary for Caenorhabditis elegans vulval induction encodes a tyrosine kinase of the EGF receptor subfamily. Nature. 1990;348(6303):693-699.
  15. Shin H, Reiner DJ. The signaling network controlling C. elegans vulval cell fate patterning. J Dev Biol. 2018;6(4):30.
  16. Han M, Aroian RV, Sternberg PW. The let-60 locus controls the switch between vulval and nonvulval cell fates in Caenorhabditis elegans. Genetics. 1990;126(4):899-913.
  17. Abdus-Saboor I, et al. Notch and Ras promote sequential steps of excretory tube development in C. elegans. Development. 2011;138(16):3545-3555.
  18. Chang C, Newman AP, Sternberg PW. Reciprocal EGF signaling back to the uterus from the induced C. elegans vulva coordinates morphogenesis of epithelia. Curr Biol. 1999;9(5):237-246.
  19. Chamberlin HM, Sternberg PW. The lin-3/let-23 pathway mediates inductive signaling during male spicule development in Caenorhabditis elegans. Development. 1994;120(10):2713-2721.
  20. DeVore DL, Horvitz HR, Stern MJ. An FGF receptor signaling pathway is required for the normal cell migrations of the sex myoblasts in C. elegans hermaphrodites. Cell. 1995;83(4):611-620.
  21. Szewczyk NJ, Jacobson LA. Activated EGL-15 FGF receptor promotes protein degradation in muscles of Caenorhabditis elegans. EMBO J. 2003;22(19):5058-5067.
  22. Bülow HE, Boulin T, Hobert O. Differential functions of the C. elegans FGF receptor in axon outgrowth and maintenance of axon position. Neuron. 2004;42(3):367-374.
  23. Huang P, Stern MJ. FGF signaling functions in the hypodermis to regulate fluid balance in C. elegans. Development. 2004;131(11):2595-2604.
  24. Kopan R, Ilagan MXG. The canonical Notch signaling pathway: unfolding the activation mechanism. Cell. 2009;137(2):216-233.
  25. Greenwald I, Kovall R. Notch signaling: genetics and structure. WormBook. 2013:1-28.
  26. Kimble J, Seidel H. C. elegans germline stem cells and their niche. StemBook. 2013.
  27. Chen J, et al. GLP-1 Notch-LAG-1 CSL control of the germline stem cell fate is mediated by transcriptional targets lst-1 and sygl-1. PLoS Genet. 2020;16(3):e1008650.
  28. Kimble J, Crittenden SL. Germline proliferation and its control. WormBook. 2005:1-14.
  29. Austin J, Kimble J. glp-1 is required in the germ line for regulation of the decision between mitosis and meiosis in C. elegans. Cell. 1987;51(4):589-599.
  30. Berry LW, Westlund B, Schedl T. Germ-line tumor formation caused by activation of glp-1, a Caenorhabditis elegans member of the Notch family of receptors. Development. 1997;124(4):925-936.
  31. Seydoux G, Greenwald I. Cell autonomy of lin-12 function in a cell fate decision in C. elegans. Cell. 1989;57(7):1237-1245.
  32. Mango SE, Maine EM, Kimble J. Carboxy-terminal truncation activates glp-1 protein to specify vulval fates in Caenorhabditis elegans. Nature. 1991;352(6338):811-815.
  33. McGovern M, Voutev R, Maciejowski J, Corsi AK, Hubbard EJA. A latent niche mechanism for tumor initiation. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009;106(28):11617-11622.
  34. Francis R, Barton MK, Kimble J, Schedl T. gld-1, a tumor suppressor gene required for oocyte development in Caenorhabditis elegans. Genetics. 1995;139(2):579-606.
  35. Angers S, Moon RT. Proximal events in Wnt signal transduction. Nat Rev Mol Cell Biol. 2009;10(7):468-477.
  36. Clevers H, Nusse R. Wnt/β-catenin signaling and disease. Cell. 2012;149(6):1192-1205.
  37. Sawa H, Korswagen HC. Wnt signaling in C. elegans. WormBook. 2013:1-30.
  38. Jackson BM, Eisenmann DM. β-catenin-dependent Wnt signaling in C. elegans. Cold Spring Harb Perspect Biol. 2012;4(8):a007948.
  39. Liu J, Phillips BT, Amaya MF, Kimble J, Xu W. The C. elegans SYS-1 protein is a bona fide beta-catenin. Dev Cell. 2008;14(5):751-761.
  40. Green JL, Kuntz SG, Sternberg PW. Ror receptor tyrosine kinases: orphans no more. Trends Cell Biol. 2008;18(11):536-544.
  41. Ackley BD. Wnt-signaling and planar cell polarity genes regulate axon guidance along the anteroposterior axis in C. elegans. Dev Neurobiol. 2014;74(8):781-796.
  42. Eisenmann DM, Maloof JN, Simske JS, Kenyon C, Kim SK. The beta-catenin homolog BAR-1 and LET-60 Ras coordinately regulate the Hox gene lin-39 during Caenorhabditis elegans vulval development. Development. 1998;125(18):3667-3680.
  43. Park FD, Tenlen JR, Priess JR. C. elegans MOM-5/frizzled functions in MOM-2/Wnt-independent cell polarity and is localized asymmetrically prior to cell division. Curr Biol. 2004;14(24):2252-2258.
  44. Jones M, Norman M, Tiet AM, Lee J, Lee MH. C. elegans germline as three distinct tumor models. Biology (Basel). 2024;13(6):425.
  45. Berset T, Hoier EF, Battu G, Canevascini S, Hajnal A. Notch inhibition of RAS signaling through MAP kinase phosphatase LIP-1 during C. elegans vulval development. Science. 2001;291(5506):1055-1058.
  46. Mello CC, Kramer JM, Stinchcomb D, Ambros V. Efficient gene transfer in C. elegans: extrachromosomal maintenance and integration of transforming sequences. EMBO J. 1991;10(12):3959-3970.
  47. Praitis V, Casey E, Collar D, Austin J. Creation of low-copy integrated transgenic lines in Caenorhabditis elegans. Genetics. 2001;157(3):1217-1226.
  48. Chen X, Feng X, Guang S. Targeted genome engineering in Caenorhabditis elegans. Cell Biosci. 2016;6:60.
  49. Dickinson DJ, Goldstein B. CRISPR-based methods for Caenorhabditis elegans genome engineering. Genetics. 2016;202(3):885-901.
  50. Ahringer J. Reverse genetics. WormBook. 2006:1-43.
  51. Bae YK, et al. An in vivo C. elegans model system for screening EGFR-inhibiting anticancer drugs. PLoS One. 2012;7(9):e42441.
  52. Medina PM, Ponce JM, Cruz CA. Revealing the anticancer potential of candidate drugs in vivo using Caenorhabditis elegans mutant strains. Transl Oncol. 2021;14(1):100940.
  53. Makhoul P, et al. Uncovering the molecular pathways implicated in the anticancer activity of the imidazoquinoxaline derivative EAPB02303 using a Caenorhabditis elegans model. Int J Mol Sci. 2024;25(14):7785.
  54. Hirotsu T, et al. A highly accurate inclusive cancer screening test using Caenorhabditis elegans scent detection. PLoS One. 2015;10(3):e0118699.
  55. Lanza E, et al. C. elegans-based chemosensation strategy for the early detection of cancer metabolites in urine samples. Sci Rep. 2021;11:17133.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Cancer ResearchCaenorhabditis eleganscancer modelcancer signalgermline tumorMulti vulval

مقالات ذات صلة