$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تتطلب العديد من التجارب إعطاء مركب في عبر طريق فموي أو موضعي ، بحيث تحاكي الطريقة بشكل أفضل المدخول الطبيعي للمادة التجريبية.
للجرعات عن طريق الفم ، يمكن إذابة المركب في مياه الشرب أو دمجه في الغذاء الذي تستهلكه. طريقة أخرى أكثر دقة للجرعات عن طريق الفم هي التزقيم عن طريق الفم حيث يتم استخدام إبرة كبيرة لوضع المركب مباشرة في المعدة. من ناحية أخرى ، يمكن وضع عامل موضعي مباشرة على سطح الجلد ، ويهدف بشكل عام إلى التأثير فقط على المنطقة التي يتم تطبيقه عليها. كل من هذه الاستراتيجيات لها مزايا وقيود ، والتي سنناقشها في هذا الفيديو. بعد ذلك سوف نوضح كيفية أداء تقنيات إدارة المركب هذه في المختبر ، وبعض تطبيقاتها.
قبل الخوض في البروتوكولات ، دعنا نراجع اعتبارات هذه التقنيات وفوائدها وأوجه القصور فيها. الجرعات عن طريق الفم مع أقراص, كبسولات, أو السائل هي الطريقة الأكثر استخداما لإدارة المخدرات في البشر. ومع ذلك ، فإن الأقراص والكبسولة غير عملية للقوارض ، لذلك يتم تحقيق الجرعات الفموية الشائعة عن طريق إذابة المركب في مياه الشرب أو الطعام.
عند الجرعات عن طريق مياه الشرب ، غالبا ما يضاف السكروز إلى الماء لتعزيز الاستساغة. ومع ذلك ، يجب أن يكون متوازنا جيدا لتشجيع تناول الماء بشكل طبيعي وليس الإفراط في الشرب بسبب الطعم السكري. القاعدة الجيدة هي البدء بمحلول سكروز بنسبة 10٪ ، ثم ضبطه اعتمادا على المدخول هناك طريقة أخرى لجرعة عن طريق الفم وهي من خلال الطعام المتخصص. هناك علف متاح تجاريا يحتوي على مركبات شائعة الجرعات ، مثل فينبيندازول ، مدمجة فيه. يمكن لشركات علف القوارض أيضا إنشاء أنظمة غذائية تجريبية متخصصة لتلبية المتطلبات التجريبية.
تتمثل مزايا هذا النوع من الجرعات عن طريق الفم في أنه غير جراحي ، ويدير المركب باستمرار ، ويحاكي إدارة الأدوية البشرية عن طريق الفم. ومع ذلك ، فإنه يفتقر إلى الدقة لأن تناول المركب يعتمد على قبول الطعام أو الماء ، واستقرار المركب ، وعدد الموجودة في القفص. إذا لم تكن الجرعات الدقيقة حاسمة للتجربة ، فإن هذه الطريقة غير الغازية هي الأفضل لرفاهية.
للحصول على إعطاء أكثر دقة عن طريق الفم ، يمكن للمرء استخدام التزقيم عن طريق الفم ، والذي يودع المركب مباشرة في المعدة في وقت محدد وبحجم محدد. ومع ذلك ، فإن التدريب المناسب مطلوب لأداء هذه التقنية لأن أضرارا جسيمة يمكن أن تحدث للحيوان إذا لم يتم تقييدها بشكل صحيح.
عند الوصول إلى العوامل الموضعية ، وتشمل هذه الكريمات والمستحضرات والمراهم والبخاخات والمواد الهلامية. عادة ما يكون الغرض من العوامل الموضعية التأثير على المنطقة التي يتم تطبيقها عليها فقط. ومع ذلك ، يمكن أيضا امتصاصها في مجرى الدم ، والتي قد تكون مقصودة أو غير مقصودة. يعتمد هذا الامتصاص على: حالة الجلد ، ومساحة السطح المستخدمة ، وتركيز المادة ، ومدة التلامس ، وقابلية ذوبان الدهون للعامل.
الآن بعد أن ناقشنا خلفية طرق الإعطاء عن طريق الفم والموضعية ، دعنا نتعلم البروتوكولات بدءا من الإعطاء عن طريق الفم عن طريق العلف أو الماء.
لحسابات الجرعات ، تحتاج أولا إلى معرفة الجرعة المقصودة التي سيتم إعطاؤها. ثانيا ، عليك تحديد وزن الجسم. بدلا من وزن الفردية ، يمكنك استخدام متوسط وزن الفأر أو سلالة الفئران لحساباتك ، ما لم ينص على خلاف ذلك. ثالثا ، يجب أن تكون على دراية بعدد لكل قفص ، ورابعا ، تحتاج إلى معرفة متوسط استهلاك الماء أو الطعام اليومي لكل قفص.
تذكر أن الطعام المصنوع أو مياه الشرب مع المركب المذاب قد تحتاج إلى الاستبدال بشكل متكرر أكثر من الطعام أو الماء القياسي بسبب عدم استقرار المركب. قد تكون بعض المركبات حساسة للضوء أو قد تترسب بمرور الوقت.
الآن ، دعنا نتعلم كيفية إعطاء جرعات دقيقة عن طريق الفم عن طريق إجراء التزقيم الفموي في الفئران والجرذان.
الخطوة الأولى هي اختيار إبرة مناسبة لهذا الإجراء. هذه إما قابلة لإعادة الاستخدام مصنوعة من الفولاذ المقاوم للصدأ أو يمكن التخلص منها بعمود بلاستيكي مرن وطرف سيليكون. بالنسبة للفئران ، تعتبر إبر الجرعات المستقيمة أو المنحنية ذات المقياس 20-25 التي يبلغ طولها 1.5 بوصة مناسبة. بالنسبة للفئران ، حدد إبر جرعات مستقيمة أو منحنية بقياس 18-20 يبلغ طولها 2-3 بوصات. يعتمد مقياس الإبرة الصحيح واختيار المحقنة أيضا على الحجم واللزوجة. راجع فيديو الإدارة المركبة I لفهم تأثير هذه العوامل. لجرعات السوائل السميكة ، يفضل استخدام حقنة قفل Luer.
بعد إجراء الاختيار ، قم بتثبيت المحقنة على الإبرة بحيث يمكن قراءة التدرجات الموجودة على البرميل دون تدوير الإبرة. هذا مهم لأنه بمجرد وضع الإبرة في المريء ، يمكن أن يؤدي أي دوران إلى تمزق جدار المريء مما يؤدي إلى موت. بعد ذلك ، املأ المحقنة بالحجم الصحيح للمحلول المراد إعطاؤه.
يجب دائما تنفيذ هذه الطريقة على الواعية ذات ردود الفعل السليمة للبلع لمنع وضعها العرضي في القصبة الهوائية. يعد استخدام تقنية ضبط النفس المناسبة أمرا بالغ الأهمية لهذا الإجراء. بالنسبة للفأر ، أمسك الجلد في قاعدة الرأس وامسك القفص بإحكام. هذا يضمن أن الرأس لديه الحد الأدنى من الفرص للحركة من جانب إلى آخر. تأكد أيضا من تعليق الجسم في خط مستقيم من الرأس إلى الذيل ؛ أي التواء سيعيق وضع إبرة التزقيم في المريء. يجب أيضا تثبيت الخلف لمنع دوران الجسم.
لكبح جماح الفئران ، أمسكها على الكتفين باستخدام السبابة والأصابع الوسطى على كل جانب من جوانب الرقبة. سيمنع ذلك الجرذ من قلب رأسه من جانب إلى آخر. يحيط الإبهام والثالث والرابع بالصدر لمنع من التحرك للأمام أو للخلف.
بمجرد تقييد بشكل صحيح ، ضع الإبرة بحيث يكون المنحنى متجها لأسفل وبما يتماشى مع المنحنى الطبيعي للرقبة. ثم أدخل الإبرة في الفم من الجانب الأيمن أو الأيسر ، من خلال الانبساط وبين القواطع والأضراس بزاوية باتجاه الجزء الخلفي من البلعوم. الآن بعد أن تم وضع الإبرة في تجويف الفم ، استخدمها لإمالة الرأس للخلف حتى يتم توجيه الأنف لأعلى. في هذه المرحلة ، يجب أن تنزلق الإبرة بسهولة إلى المريء. بمجرد وضع الإبرة في المعدة ، قم بإيداع المركب برفق. ثم قم بإزالة الإبرة من ، وتأكد من عدم تدويره. من المهم عدم إجبار الإبرة لأسفل. إذا شعرت بأي مقاومة ، فقم بإزالته وحاول مرة أخرى. أثناء إجراء العملية ، إذا ظهرت على علامات الزرقة أو ضيق التنفس أو إذا كان هناك محلول يتدفق من فمه ، فيجب إزالة إبرة الجرعات على الفور وإطلاق في قفصه.
أخيرا ، دعنا نراجع إجراءات الإدارة الموضعية في المختبر. ابدأ بتخدير. يتم ذلك عادة باستخدام مستنشق سريع المفعول ، مما يسمح بتعافي بسرعة. لمزيد من التفاصيل حول إعطاء التخدير ، يرجى مشاهدة مقطع فيديو آخر في هذه المجموعة.
بعد ذلك ، باستخدام ماكينة قص الشعر ، قم بإزالة كل الفراء من منطقة التطبيق. لتجنب أي جروح ، ضع سطح المقص المسطح على الجلد واحلق في الاتجاه المعاكس لنمو الشعر. ثم نظف الجلد بالماء وجففه بقطعة شاش. الآن ، باستخدام قضيب قطني ، ضع المادة مباشرة على الجلد. للحصول على أفضل النتائج ، ضعي عدة طبقات رقيقة من المرهم أو الكريم ، بدلا من وضع طبقة سميكة لمرة واحدة. لمنع الابتلاع العرضي للمركب المطبق موضعيا بسبب الاستمالة ، ضع طوقا صغيرا أو درعا لمنع من الوصول إلى الجزء المصاب من الجسم. علاوة على ذلك ، لمنع المساحة من زملائه في الأقفاص ، يجب إيواء بشكل فردي.
الآن بعد أن أصبح لديك فهم لهذه الطرق البديلة للإدارة ، دعنا نرى كيف يتم استخدامها في البحوث الطبية الحيوية اليوم.
أحد التطبيقات المهمة للتزقيم الفموي هو الإعطاء الدقيق للمواد لدراسة تأثيرها المباشر على الجهاز الهضمي. هنا ، استخدم الباحثون هذه الطريقة لتوصيل خميرة بروبيوتيك محولة مباشرة إلى معدة. ثم قاموا بتشريح بقع باير ، وهي عقيدات ليمفاوية منظمة من الأمعاء الدقيقة ، لدراسة التزام الكائنات الحية الدقيقة التي تم تسليمها.
يمكن استخدام الطريق الفموي غير الجراحي لتقليد الطريقة الطبيعية للعدوى المنقولة بالغذاء. في هذه التجربة ، طور العالم نموذجا للانتقال الفموي لليستيريا الموحيدات في الفئران عن طريق تناول الطعام الملوث. بعد الإصابة ، حصد الباحثون أعضاء مختلفة مثل الأمعاء الدقيقة والقولون والطحال والكبد والمرارة ، لتحليل انتشار العدوى إلى هذه الأنسجة.
أخيرا ، يهتم بعض الباحثين بدراسة الآلية التي قد تؤدي بها الأشعة فوق البنفسجية إلى حروق الشمس. هنا ، استخدم العلماء طريقا موضعيا لتطبيق مادة دوائية تحفز إنتاج الميلانين في البشرة - عامل حماية من الأشعة فوق البنفسجية. بعد ذلك ، استخدموا بروتوكولا مشابها للدراسات البشرية لفحص التأثير الوقائي للعامل المطبق موضعيا ضد الحمامي التي تسببها الأشعة فوق البنفسجية.
لقد شاهدت للتو الدفعة الثانية من JoVE من طرق الإدارة المركبة التي تتعامل مع الجرعات عن طريق الفم والموضعية. يجب أن تفهم الآن كيف يمكن للمرء أن يجرع عن طريق الفم باستخدام العلف أو الماء ، وكيف يمكن للمرء أن يؤدي إدارة التزقيم عن طريق الفم الأكثر دقة. أخيرا ، يجب أن تعرف اعتبارات وطريقة الإدارة الموضعية وتطبيقات هذه التقنيات المختلفة. كما هو الحال دائما ، شكرا على المشاهدة!
