أخذ عينات مياه البحر وكوكتيل

مرحباً، أنا إيلينا كوفا من مختبر ستيفن هالام في قسم الميكروبيولوجيا وعلم المناعة بجامعة كولومبيا البريطانية. سنعرض لكم اليوم إجراءً لجمع مياه البحر من أجل التحليل الفيزيائي والكيميائي والبيولوجي. نحن نستخدم هذا الإجراء في مختبرنا لدراسة البارامترات الأوقيانوغرافية للمياه البحرية.

لنبدأ الآن. أولاً، يتم تعيين عدد مرات الإنزال والأعماق في كل عملية إنزال، ثم تُحدد الأعماق المراد أخذ عينات منها، والحجم الإجمالي المراد جمعه لعملية الإنزال الحالية. تأكد من أن أجهزة أخذ عينات المياه من نوع go flow و kin في وضع الفتح، وأن جميع الصمامات والصنابير مغلقة.

قم بتثبيت جهاز CTD في قاعدة الخط وأنزله في الماء للوصول إلى أقصى عمق في المقطع الرأسي. ضع جهاز أخذ العينات على الخط مباشرة بعد جهاز CTD. تأكد من تثبيت الخط بشكل صحيح في حامل الجهاز وإحكام ربط البراغي.

قم بتثبيت مرسال مُثقل بكل جهاز باستثناء جهاز عمق أخذ العينات الأعمق قبل إنزاله في الماء. أنزل الخط والمسافة بين أول عمق محدد والعمق الذي يليه، ثم قم بتجهيز جهاز أخذ عينات آخر. لاحظ أنه بالنسبة للفترات العمقية التي يتم فيها جمع عينات مياه ذات حجم كبير، يتم تحميل زجاجتين بسعة 12 liter إجمالاً بشكل متتالي على مسافة 0.75 meters تقريباً بينهما.

بعد وضع جميع الأجهزة على الخط، اخفض الخط إلى أقصى عمق واسمح بمرور دقيقتين. أرسل جهاز إرسال إلى الأسفل لإطلاق كل جهاز وتحويله إلى وضع الإغلاق. انتظر بضع دقائق قبل استعادة الخط.

لضمان إغلاق جميع الأجهزة، قم بسحب الخط وتفريغ كل جهاز على السطح بمجرد خروجه من الماء. بالنسبة للأعماق التي تتطلب أحجام عينات كبيرة لتنقية البروتين أو DNA أو RNA، استخدم جهازي أخذ عينات بالتوالي. قم بجمع RNA فوراً من إحدى الزجاجات وقم بترشيحه على متن السفينة.

بعد أخذ عينات من المواد الكيميائية والمغذيات في الزجاجة الأخرى، قم بتصريف المياه المتبقية في العربة للوصول إلى حجم نهائي قدره 20 liter. بالنسبة للعينات ذات الحجم المنخفض، خصص لتراً واحداً من الماء للترشيح في زجاجات Nalgene معقمة. عادةً ما يتم جمع العينات ذات الحجم المنخفض من 16 فاصل عمق على هيئة 16 عينة بحجم لتر واحد لكل منها، بينما يتم جمع ست عينات بحجم 20 liter كعينات ذات حجم مرتفع.

عند جمع عينات الغاز، احرص دائماً على أخذ عينات من الأكسجين والغازات النزرة. أولاً، قم بتوصيل قطعة رفيعة من الأنابيب بصنبور جهاز أخذ عينات المياه. ضع الطرف الآخر من الأنبوب في زجاجات مصل الغوس.

اشطف زجاجة المصل ثلاث مرات، ولكن خذ عينة من الماء واملأها حتى تفيض بحيث لا توجد فقاعات هواء. أضف 50 µL من كلوريد الزئبق إلى زجاجة المصل. توخَّ الحذر لعدم إدخال فقاعات هواء إلى العينة.

أغلق زجاجة المصل بسدادة مطاطية C وثبتها بغطاء من الألومنيوم، ثم احفظها على الثلج لجمع العينات المخصصة لقياسات المغذيات، بما في ذلك النترات والفوسفات والسيليكات. أولاً، اشطف حقنة سعة 60 cc بمياه العينة. بعد ذلك، قم بتركيب مرشح acro disc بمسامية 0.2 micrometer على الخط.

ادفع حوالي 2 ml من الماء عبر المحقنة لتطهير المرشح. اشطف زجاجة بولي إيثيلين بحوالي 10 ml من الماء المُرشح ثلاث مرات.

رج الزجاجة عند الشطف، ثم أضف عينة المياه المفلترة إلى الزجاجات حتى تمتلئ بنحو ثلاثة أرباعها. تُحفظ العينة على الثلج. أفرغ أنابيب الجمع من المياه المقطرة لجمع عينات مخصصة لقياسات الأمونيا.

أولاً، اشطف أنابيب الجمع، ولكن باستخدام مياه العينة بالكامل. املأ مخباراً مدرجاً سعة 10 ml بمياه العينة، ثم اسحب 5 ml من مياه العينة من المخبار المدرج وأفرغ المتبقي منه. بعد ذلك، أعد الـ 5 ml إلى المخبار الفارغ.

بمجرد جمع العينات من جميع الأعماق، يُضاف 7.5 ml من كاشف الأمونيوم العامل إلى كل أنبوب. ولجمع عينات لعد الخلايا، يتم ملء أنبوب Falcon سعة 50 ML مُصنف مسبقاً ويحتوي على 5.4 ml من الفورمالدهيد بتركيز 37% حتى علامة 50 ml للوصول إلى تركيز نهائي قدره 4%. يجب توخي الحذر لعدم تجاوز سعة الأنبوب. تُحفظ العينة على الثلج عند جمع العينات.

لقياسات كبريتيد الهيدروجين. املأ أنبوب Falcon سعة 50 ML مُصنف مسبقاً ويحتوي على 3 ml من خلات الزنك بتركيز 20% حتى الأعلى. احرص على عدم تجاوز سعة الأنبوب.

يُحفظ العينة على الثلج لجمع الأحجام الصغيرة. ولتركيز الكتلة الحيوية، تُملأ زجاجات Nalgene سعة لتر واحد حتى الأعلى لجمع الأحجام الكبيرة المخصصة لتركيز الكتلة الحيوية.

املأ قارورات سعة 20 لتر حتى النهاية. وتؤدي النتيجة النهائية لأخذ عينات مياه البحر إلى الحصول على ما يقرب من 32 إلى 48 عينة. عينات الغاز، و32 عينة أمونيوم.

16 عينة من كبريتيد الهيدروجين. 16 عينة لتعداد الخلايا. ست عبوات سعة 20 لتر، و16 زجاجة سعة لتر واحد، وأربعة من أوعية sterex.

يتم الاحتفاظ بمرشحات ذات مسام بحجم 2.2 µm تحتوي على الكتلة الحيوية الميكروبية لاستخدامها لاحقاً. عزل RNA. لقد أوضحنا للتو كيفية جمع أنواع مختلفة من عينات المياه لإجراء التحليل الكيميائي الحيوي.

يتطلب هذا الأمر قدراً كبيراً من التحضير والتخطيط. لذا، خصص يومين قبل الرحلة لترتيب الأمور ويوماً واحداً بعدها للتنظيف، ولا تسمح لمياه البحر بملامسة مضخة peralt أو الدخول إلى صندوق zago المصنوع من الألمنيوم والمستخدم لنقل المعدات الميدانية. تعامل مع المعدات بعناية وستخدمك بشكل جيد لفترة طويلة قادمة.

هذا كل شيء. شكرًا للمشاهدة، وبالتوفيق في تجاربكم.