A عكسية ، غير الغازية طريقة لقياس مقاومة مجرى الهواء وأخذ عينات السوائل غسل القصبات في الفئران

قبل البدء في هذا الإجراء ، تم تخدير البخيل بحقن الطوم داخل الصفاق. ثم توضع على طاولة ويتم إدخال قسطرة قياس 20 عن طريق الفم في القصبة الهوائية. يتم وضع الفئران التنبيب على جهاز التنفس الصناعي ويبدأ خط الوريد في الوريد الذيلي.

ثم يتم إحاطة الفئران في SIGGRAPH للقوارض متصلة بمحولين للضغط. تتيح الإلكترونيات القياس المستمر لمقاومة الجهاز التنفسي أثناء تحدي الأسيتيل كولين. بعد فصل جهاز التنفس الصناعي والخط الوريدي ، يتم دفع قسطرة القصبة الهوائية إلى الرئة اليسرى ، والتي يتم غسلها بالمحلول الملحي والسحب من خلال القسطرة.

مرحبا ، أنا سيمون فار من قسم الطب في كلية بايلور للطب. سنعرض لك اليوم التنبيب الفموي للفئران بحيث يمكن جمع ميكانيكا مجرى الهواء وسائل القصبات الهوائية بشكل متكرر. نستخدم هذا الإجراء لدراسة مرض الحساسية التجريبي ، وهو نموذج تجريبي للربو ، ويمكن تكييف هذا الإجراء مع تطبيقات أخرى أيضا.

لذلك دعونا نبدأ. لبدء هذا الإجراء ، يتم تخدير الفأر بعمق عن طريق الحقن داخل الصفاق بمقدار 48 ملليغرام لكل كيلوغرام من الأكل. ثم يتم وضع الماوس في صندوق خفيف ناعم للحفاظ على هدوئه.

يمكن استخدام قفص فأر نظيف مغطى بستارة من القماش لهذا الغرض: بعد خمس إلى 10 دقائق ، تأكد من خلال قرصة إصبع القدم أن مخدر تماما ثم ضعه في وضع الراقد الجانب البطني لأعلى على طاولة صغيرة معدلة بزاوية 45 درجة. لتثبيت الموضوع في مكانه ، أدخل شريطا مطاطيا ENC يدور حول الطاولة خلف الصف العلوي من الأسنان.

يجب استخدام مصباح حراري للحفاظ على دفء الماوس بيدك اليمنى. استخدم الملقط للإمساك باللسان وتمديده ورفعه من الفم. ثم أدخل خافض اللسان المعدني برفق في يدك اليسرى.

سيسمح ذلك بمجرى الهواء دون عوائق وتصور الحبال الصوتية للتنبيب. بعد ذلك ، أدخل خيطا من الألياف البصرية بقطر 0.8 ملم متصلا بمصدر ضوء من خلال قسطرة انجيو وقم بتمديده 10 ملم إلى ما وراء الحافة. أثناء دراسة الخافض بيدك اليسرى ، استخدم يدك اليمنى لتوجيه الطرف المضيء لخيط الألياف الضوئية عبر تجويف الفم والبلعوم حتى يتم تصور الحبال الصوتية.

ثم تحت التصور المباشر وتوقيته عندما تكون الحبال مفتوحة إلى أقصى حد ، قم بتمرير الخيط عبر الحبال الصوتية المتحركة إلى القصبة الهوائية. الآن مرر قسطرة الأوعية الدموية فوق خيط الألياف البصرية إلى القصبة الهوائية حتى يقع طرف القسطرة داخل الجزء الأوسط من القصبة الهوائية. بالنسبة للفأر الذي يتراوح وزنه من 17 إلى 22 جراما ، فإن هذا يتوافق مع جزء قسطرة 10 ملم متبقي خارج الفم.

قم بإزالة خيط الألياف البصرية لتأكيد التنبيب الناجح. راقب التنفس العميق المنتظم الذي ينتهي على الفور بعد انسداد الموصل بالإبهام. اخفض طاولة تحجم التشعب حتى تصبح موازية لطاولة العمل وأدر الموضوع 180 درجة حتى يواجه منفذ جهاز التنفس

اقلب على جانبه قبل توصيله بجهاز التنفس الصناعي. قم بتأمين اتصال محكم الإغلاق وتنشيط جهاز التنفس الصناعي. يتم تأكيد التنبيب الناجح بشكل أكبر عندما ينظر إلى رحلة البطن الراسو على أنها تتماشى مع جهاز التنفس الصناعي لاحقا.

لتحضير الإبرة للخط الوريدي ، قم بإزالة إبرة قياس 10 ملم 27 من موصل الحقنة الخاص بها وثنيها 90 درجة عند نقطة المنتصف بحيث تواجه الشطبة في الزاوية. قم بتوصيل الطرف غير المشطوف بأنبوب PE 10 المؤدي إلى منفذ الحقن الوريدي. لمنع انصمام الهواء المميت المحتمل.

تطهير الأنبوب والإبرة ب 37 درجة مئوية 0.9٪ كلوريد الصوديوم عبر حقنة مليلتر واحد. يتكون منفذ الحقن من إبرة قياس 27 يتم دفعها من خلال ثقب محفور في غطاء أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل. يمتلئ الغطاء بالمحلول الملحي بحيث يتم غمر نهاية الإبرة باستمرار ، مما يقلل من احتمالية حبس الهواء في الإبرة وحقنه عن طريق الوريد.

قم بمحاذاة الإبرة عند أقصى الكود من الذيل. بالتوازي مع الوريد الجانبي وفوقه. مرر الإبرة قليلا تحت الجلد أثناء توجيهها.

الجمجمة على طول الأوردة والدفع تحت الجلد إلى الانحناء. لتأكيد التنسيب الوريدي الناجح ، اسحب مكبس المحقنة قليلا. يجب أن ترى تدفق الدم إلى الأنبوب الوريدي.

علاوة على ذلك ، يجب أن يكون هناك تدفق دون عوائق عبر الخط الوريدي عند حقن 50 إلى 100 ميكرولتر من المحلول الملحي في وريد الذيل. بعد إزالة المصباح الحراري من الإعداد ، قم بإحاطة الموضوع في الرسم البياني البلازمي وتثبيته محكم الإغلاق مع تطبيق أربعة مشابك. تعد إزالة المصباح الحراري أمرا مهما لمنع تسخين الهواء في غرفة الرسم البياني البلازموي وربما تغيير القياسات اللاحقة لمقاومة الجهاز التنفسي أو مقاومة الجهاز التنفسي RRS أو RRS يتم تحديدها عن طريق القياس الكمي المستمر للحاصل القسمي.

التغير في ضغط مجرى الهواء على تدفق الهواء أو دلتا P على V عند نقاط متساوية في حجم الرئة. يتم تحديد Delta P باستخدام محول ضغط متصل بقسطرة الأوعية الهوائية V.يتم حساب التفاضل في حجم طعم البلازما بمرور الوقت بواسطة وحدة preamp. بعد إنشاء خط أساس مستقر, RRS حقن خمس جرعات متتالية من زيادة تركيزات كلوريد أستيل كولين أو CH على مدى ثانية واحدة عن طريق الرابع.

يتم إعطاء كل جرعة لاحقة عند عودة RRS إلى خط الأساس حتى يتم تحقيق زيادة بنسبة 200٪ في مقاومة مجرى الهواء. قم بإزالة الوريد الوريدي من وريد الذيل وافصل الماوس عن جهاز التنفس الصناعي. الحفاظ على مجرى الهواء اللامع عن طريق الحفاظ على قنية القصبة الهوائية في مكانها ، تأكد من أن الفأر قد استأنف التنفس التلقائي.

إذا لم يكن الأمر كذلك ، فيمكن تشجيع التنفس عن طريق تدليك الصدر بلطف. بمجرد أن يستأنف الفأر التنفس التلقائي ، قم بنقله باستخدام قنية القصبة الهوائية في مكانه إلى غرفة مطهرة بالأكسجين بنسبة 100٪ والحفاظ عليها عند 37 درجة مئوية باستخدام المصباح الحراري. يجب أن تظل قنية القصبة الهوائية في مكانها حتى يستيقظ لمنع الموت المرتبط بالاختناق الناجم عن فرط إفراز اللعاب الناجم عن الأسيتيل كولين.

لا يمكن جمع غسل القصبات الهوائية أو سائل BAL إلا عندما يستعيد الفأر منعكس الكمامة بشكل كاف ، والذي يجب أن يحدث حوالي 20 دقيقة عند الاستبدال في غرفة الاسترداد. لتقييم منعكس الكمامة ، حرك قسطرة الأوعية الدموية برفق إلى الداخل والخارج يشير السعال الواضح أو النضال إلى أن منعكس الكمامة قد عاد لجمع سائل BAL. يتم إدخال سلك توجيه التنبيب المعدني مع انحناء مستمر يبلغ حوالي 30 درجة موجه إلى الفص الأيسر من الرئة في قسطرة الأوعية الدموية.

قم بدفع سلك G والقسطرة الوعائية معا إلى الفص الأيسر من الرئة بحيث يمتد محور القسطرة المستبعد إلى ما وراء الأسنان الأمامية بمقدار ملليمتر واحد فقط. تأكد من أن طرف السلك G لا يمر عبر الطرف المفتوح لقسطرة الأوعية الدموية. لتجنب تمزق القصبة الهوائية أو تمزقها مع الحفاظ على قسطرة انجيو في مكانها ، قم بغسل 300 ميكرولتر من PBS المعقم الرقم الهيدروجيني 7.4 في الرئة اليسرى عبر حقنة سعة ملليلتر واحد مباشرة بعد سحب مكبس المحقنة.

لخلق ضغط سلبي ، قم بإزالة قسطرة الأوعية الدموية ببطء أثناء تدليك الرئة بشكل مكثف. من المتوقع عودة BAL من 100 إلى 200 ميكرولتر. أعد فأر الغسيل على الفور إلى غرفة الأكسجين 37 درجة مئوية و 100٪.

ضع على جانبه الأيسر حتى يتعافى تماما ، حوالي 20 دقيقة ثم ضعه مرة أخرى في قفصه. نقدم هنا نتائج تمثيلية لقياسات مقاومة مجرى الهواء ، وفرط نشاط مجرى الهواء المعرف بقيم RRS التي تكون أعلى بكثير عند أي جرعة أستيل كولين مقارنة بالقيم الساذجة التي تم تطويرها بعد خمسة تحديات مسببة للحساسية في الجرعة الرابعة. ومع ذلك ، لوحظ فرط نشاط مجرى الهواء بشكل أكبر بعد التحدي السادس مع عدم وجود زيادة أخرى في الاستجابة.

في التحدي السابع ، تم إيقاف جرعات CH بعد أن تضاعفت قيم RRS ثلاث مرات من قيم خط الأساس ، مما أدى إلى زيادة أخرى في الجرعات ، وإلا أدى إلى تشنج قصبي قاتل. تحدت الفئران مرارا وتكرارا مع السيارة داخل الأنف لعدم تطوير فرط نشاط مجرى الهواء وفي جميع جرعات CH ، نظرا لقياسات RRS ، لا تختلف اختلافا كبيرا عن القيم الأساسية كما هو موضح في هذه التتبع التمثيلي RRS في الوقت الفعلي من فأر ساذج وستة x تحدي مسببات الحساسية يتلقى جرعات وريدية متتالية من CH قبل ظهور A HR قوي. كان شريط الخلية السائد في مجرى الهواء الناجم عن مسببات الحساسية هو العدلات المشابهة لاتجاه HR. ومع ذلك ، تعززت الحمضات تدريجيا مع تحدي مسببات الحساسية المتكرر وأصبح الحمضات نوع الخلية السائد عدديا في سائل BAL. بعد التحدي السادس يتزامن مع انخفاض ملحوظ في أعداد العدلات.

في السيطرة PBS تحدى الفئران. كما لم تختلف قياسات مقاومة مجرى الهواء بشكل كبير بمرور الوقت. كما لوحظ البلاعم المعزز في العدلات ولكن ليس تجنيد الحمضات في سائل BAL في هذه الفئران على غرار تلك التغييرات التي لوحظت في الفئران التي تتلقى عينات من سائل BAL المتكررة فقط.

لذلك أوضحنا لك للتو كيفية تنبيب الفئران عن طريق الفم بشكل عكسي والوصول إلى الخط الوريدي لجمع بيانات فسيولوجيا مجرى الهواء والسائل القصبي السنخي الكبير. قبل تنفيذ هذه التقنيات على الحية ، من الضروري ممارسة كل تقنية وإتقانها على حدة. على كريك.

التعامل الصارم واللطيف أمرا ضروريا ويجب إجراء تقنية معقمة صارمة في جميع الأوقات. هذا كل شيء. شكرا على المشاهدة ونتمنى لك السعادة في تجاربك.