Name: التوليف ومعايرة Nanoprobes الفسفورية للتصوير الأوكسجين في النظم البيولوجية (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-03-03T17:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 38 s
Description: تعلم تصميم مجسات فسفورية لقياس الأكسجين باستخدام بورفيرينات البلاتين والبالاديوم المحاطة ببوليمرات التفرع. تُستخدم هذه المجسات في التصوير البيولوجي لدراسة العمليات الأيضية الحية بدقة عالية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

مع التقدير والإمتنان الدعم من المنح وEB007279 HL081273 من المعاهد الوطنية للصحة في الولايات المتحدة.

<ol><li>Vanderkooi, J. M., Maniara, G., Green, T. J., Wilson, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+optical+method+for+measurement+of+dioxygen+concentration+based+on+quenching+of+phosphorescence%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">An optical method for measurement of dioxygen concentration based on quenching of phosphorescence.</a> J. Biol. Chem. 262, 5476-5482 (1987).</li>
<li>Rumsey, W. L., Vanderkooi, J. M., Wilson, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+of+phosphorescence%3A+A+novel+method+for+measuring+the+distribution+of+oxygen+in+perfused+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Imaging of phosphorescence: A novel method for measuring the distribution of oxygen in perfused tissue.</a> Science. 241, 1649-1651 (1988).</li>
<li>Lebedev, A. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dendritic+phosphorescent+probes+for+oxygen+Imaging+in+biological+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Acs+Applied+Materials+and+Interfaces%22%5BJournal%5D)">Dendritic phosphorescent probes for oxygen Imaging in biological systems.</a> Acs Applied Materials and Interfaces. 1, 1292-1304 (2009).</li>
<li>Finikova, O. S., Cheprakov, A. V., Beletskaya, I. P., Carroll, P. J., Vinogradov, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+versatile+synthesis+of+substituted+tetrabenzoporphyrins%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Organic+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Novel versatile synthesis of substituted tetrabenzoporphyrins.</a> Journal of Organic Chemistry. 69, 522-535 (2004).</li>
<li>Lindsey, J. S., Schreiman, I. C., Hsu, H. C., Kearney, P. C., Marguerettaz, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rothemund+and+Adler-Longo+Reactions+revisited%3A+Synthesis+of+tetraphenylporphyrins+under+equilibrium+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Organic+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Rothemund and Adler-Longo Reactions revisited: Synthesis of tetraphenylporphyrins under equilibrium conditions.</a> Journal of Organic Chemistry. 52, 827-836 (1987).</li>
<li>Lebedev, A. Y., Troxler, T., Vinogradov, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+of+metalloporphyrin-based+dendritic+nanoprobes+for+two-photon+microscopy+of+oxygen%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Porphyrins+and+Phthalocyanines%22%5BJournal%5D)">Design of metalloporphyrin-based dendritic nanoprobes for two-photon microscopy of oxygen.</a> J. Porphyrins and Phthalocyanines. 12, 1261-1269 (2008).</li>
</ol>

<table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0"&gt;<tr<td<strong&gt; الاختصار</strong<strong</strong</td&gt;<td<strong&gt; الاسم الكامل</strong<strong</strong</td&gt;</tr&gt;<tr<td&gt; NMP</td&gt;<td&gt; N - methylpyrrolidinone</td&gt;</tr&gt;<tr<td&gt; TFA</td&gt;<td&gt; حمض trifluoroacetic</td&gt;</tr&gt;<tr<td&gt; DIPEA</td&gt;<td&gt; diisopropylethylamine</td&gt;</tr&gt;<tr<td&gt; HBTU</td&gt;<td&gt; 2 -- (1H - benzotriazol - 1 - YL) -1،1،3،3 - tetramethyluronium hexafluorophosphate</td&gt;</tr&gt;<tr<td&gt; DMSO</td&gt;<td&gt; dimethylsulfoxide</td&gt;</tr&gt;<tr<td&gt; CDMT</td&gt;<td&gt; CDMT = 1 - كلورو - 3 ،5 - dimethoxytriazine</td&gt;</tr&gt;<tr<td&gt; NMM</td&gt;<td&gt; NMM = N - methylmorfoline</td&gt;</tr&gt;</table

التوليف ومعايرة nanoprobes الفسفورية للتصوير الأوكسجين في النظم البيولوجية

Synthesis and Calibration of Phosphorescent Nanoprobes for Oxygen Imaging in Biological Systems

قياس الأوكسجين التي تروي تفسفر [1 ، 2] يتكون من الخطوات التالية : 1) يتم تسليم التحقيق في تهم المتوسطة (مثل الدم أو السائل الخلالي) ؛ 2) هو الكائن مضاءة بنور الطول الموجي المناسب من أجل إثارة التحقيق في حالة الثلاثي والخمسين ؛ 3) يتم جمع تفسفر المنبعثة ، ويتم تحليل مسارها الوقت لتعطي عمر تفسفر ، والتي يتم تحويلها إلى تركيز الأوكسجين (أو الضغط الجزئي ، ص.<sub&gt; 2</sub&gt;). يجب أن التحقيق لا تتفاعل مع البيئة البيولوجية ، وفي بعض الحالات أن تكون 4) تفرز من المتوسط ​​لدى اكتمال القياس. كل من هذه الخطوات يفرض شروطا على تصميم الجزيئي للتحقيقات الفسفورية ، التي تشكل العنصر الوحيد الغازية في بروتوكول القياس. هنا نستعرض تصميم nanosensors الفسفورية شجيري لقياس الأوكسجين في النظم البيولوجية. تحقيقات تتألف من حزب العمال أو البالاديوم البورفيرين المستندة polyarylglycine (AG) dendrimers ، تعديل محيطيا مع البولي ايثيلين جلايكول (PEG ل) البقايا. عن الإثارة اثنين الفوتون فعالة ، قد يتم تعديلها من مصطلحات dendrimers مع اثنين من الفوتون chromophores الهوائي ، الذي التقاط طاقة الإثارة وتوجيهها إلى النوى الثلاثي للتحقيقات عبر ضمجزيئي عامل ضمن الجزيئ الحنق (فورستر نقل الطاقة الرنين). نحن تصف الخصائص الرئيسية photophysical من التحقيقات وتقديم بروتوكولات المعايرة مفصلة.

نقدم مبادئ قياس الأوكسجين التي تروي تفسفر والتصميم استعراض البورفيرين المستندة nanosensors شجيري للتصوير الأوكسجين في النظم البيولوجية.

التوليف ومعايرة Nanoprobes الفسفورية للتصوير الأوكسجين في النظم البيولوجية

تتكون عملية قياس الأكسجين عن طريق إخماد الفسفرة [1, 2] من الخطوات التالية: 1) يتم إدخال المسبار في الوسط المراد دراسته (على سبيل المثال: الدم...

نقدم في هذا البحث تصميم مجسات فسفورية للأكسجين تعتمد على مشتقات البورفيرين من البلاتين والبالاديوم. تتكون هذه المجسات من نوى بورفيرين معدنية تغلفها دندروينات وطبقة محيطية محبة للماء من البولي إيثيلين جليكول؛ وسنوضح في هذه الورقة طريقة بناء هذه المجسات ومعايرتها. مرحبًا، اسمي لويس سينكس.أعمل مع البروفيسور Sergei OV هنا في قسم الكيمياء الحيوية والفيزياء الحيوية في جامعة بنسلفانيا. أنا Emmanuel Losis، وأيضاً من Vina. وأنا Sergei V. تعتمد قياسات الأكسجين البيولوجي عن طريق الفوسفور والإخماد على استخدام الفوسفور والمجسات الخارجية، والتي يتم إدخالها مباشرة في الوسط المراد دراسته.تعد مجسات الدم أو السائل الخلالي المكونات الغازية الوحيدة في مخطط القياس التي تتطلب اهتمامًا خاصًا بتصميمها. سنعرض لكم اليوم إجراءً لتخليق ومعايرة مجسات نانوية فسفورية شجيرية لقياس الأكسجين في الأنظمة البيولوجية. نحن نستخدم هذا الإجراء لتخليق وتوصيف مجسات لقياسات الأكسجين أحادية وثنائية الطي.لنبدأ الآن. قبل أن نشرع في بناء المجسات، دعونا نستعرض أولاً النظرية الأساسية الكامنة وراء الفسفورية للمجسات. تنشأ الفسفورية من الحالة الثلاثية طويلة العمر.يجب تصميم جزيء المسبار بحيث يعطي مردوداً كمياً عالياً للحالة الثلاثية، ويصدر فسفورية بدلاً من الفلورية. يتم استثارة المسابر بواسطة فوتون واحد، أو عبر آلية الفوتونين في حالة المسابر الخاصة المعززة بالفوتونين. عادةً ما يوفر الاستثارة بفوتون واحد دقة مكانية أقل، ولكنه يتطلب أجهزة أبسط ويمكن استخدامه في قياسات النقطة الواحدة باستخدام مقاييس الفسفورية ذات الألياف الضوئية القائمة على تقنية LED.أثناء وجود المسبار في الحالة الثلاثية، يمكن أن يتعرض لتصادمات مع جزيئات الأكسجين، مما قد يؤدي إلى إبطال نشاط الحالة الثلاثية، وهي عملية تسمى "الإخماد" (quenching). وبناءً على ذلك، يتقلص عمر الفسفرة في وجود الأكسجين. ونتيجة لهذا الإخماد، يتم توصيف اعتماد عمر الحالة الثلاثية على كمية الأكسجين في البيئة المحيطة بواسطة معادلة ستيرن-فولمر (stern volmer equation).في التجارب الحيوية (in vivo)، يتم إيصال المسبار إلى الدم أو السائل الخلالي للحيوان، ثم يتم إضاءة سطح النسيج بضوء ذي طول موجي مناسب لنقل المسبار إلى حالته الثلاثية المثارة. ولقياس عمر الفسفور، يتم رصد الفوتونات الفسفورية المنبعثة زمنياً. على سبيل المثال، بعد نبضة الإثارة، قد يتم جمع 3,609 فوتونات في الخمس ميكروثانية الأولى، و 1,421 فوتوناً في الخمس ميكروثانية التالية، وهكذا دواليك حتى يتوقف جمع الفوتونات.تعطي الأرقام الموجودة في الصناديق المرسومة مقابل الوقت اضمحلال الفسفرة، والذي يتم تحليله لاستنتاج عمر الفسفرة. وفي التصوير، يتم تطبيق هذا الإجراء على كل بكسل في الصورة، مما ينتج عنه خرائط لعمر الفسفرة. وتتميز قياسات الأعمار بأنها غير حساسة لعدم تجانس توزيع المسبار في جميع أنحاء الجسم، وهو أمر شائع في العينات البيولوجية.دعونا نرى الآن كيفية تحضير المسبارات. ابدأ إجراء الاصطناع بإضافة ألدهيد عطري إلى محلول بتركيز 0.01 مولار من رباعي هيدرو أيزو إندول. قلّب خليط التفاعل لمدة 10 دقائق في الظلام في درجة حرارة الغرفة.بعد ذلك، أضف boron, tri fluoride dathyl, ate، واستمر في التقليب لمدة ساعتين إضافيتين. ثم أضف dichloride cyan, benzo quinone أو DDQ، مما يؤدي إلى تغير اللون من الأحمر الباهت إلى الأخضر الداكن؛ واترك الخليط طوال الليل مع التقليب المستمر. وفي اليوم التالي، يتم غسل المحلول وتجفيفه، ثم تركيزه تحت تفريغ هوائي.يؤدي بلورة الراسب إلى الحصول على المنتج المستهدف في شكل مسحوق أخضر. وعادة ما تكون الإنتاجية في حدود 50%. بعد ذلك، يتم معاملة البورفيرين في صورته كقاعدة حرة باستخدام خلات البالاديوم. وتتم مراقبة عملية التحويل بواسطة مطيافية الأشعة فوق البنفسجية المرئية (UV vista spectroscopy).تكتمل عملية التحويل بعد اختفاء حزمة الامتصاص لـ Dion بين 468 و 472 نانومتر. يتم عزل البورفيرين عن طريق الكروماتوغرافيا العمودية على هلام السيليكا. لتحضير palladium tetra benzo porphyrin، يتم أكسدة palladium tetra cyclo porphyrin.أثناء التسخين المرتد، يتغير اللون من الأحمر الداكن إلى الأخضر العميق؛ بخر المذيب، ثم خفف الراسب باستخدام ثنائي كلورو ميثان مع الغسل، ثم جفف وركز الطور العضوي تحت تفريغ هوائي. بعد إجراء الكروماتوغرافيا على هلام السيليكا، اعزل رباعي بنزو بورفيرين البالاديوم على شكل مسحوق أخضر مزرق. بعد ذلك، قم بتحلل مجموعات الإستر الطرفية لرباعي بنزو بورفيرين البالاديوم مائيًا.عالج أولاً إستر رباعي بنزو بورفيرين بقاعدة في رباعي هيدرو فوران. ثم استمر في عملية التحلل المائي باستخدام قاعدة مائية، ورسّب البورفيرين بإضافة حمض الهيدروكلوريك وجففه تحت تفريغ هوائي. بهذا تكتمل عملية تخليق البورفيرين.لنلقِ نظرة الآن على كيفية تخليق الـ entrons. قبل تجميع المسابير، يجب تخليق الـ entrons مسبقاً، وهي التي تمثل فروع الـ Denmark. نحن نستخدم aero gly، وsame DERs، والتي يمكن تحضيرها بسهولة من مواد بداية غير مكلفة باستخدام طرق خالية من الكروماتوغرافيا.يتم بعد ذلك ربط الثيرونات (Therons) التي تحتوي على مجموعات أمينية في نقاطها المركزية بمجموعات الكاريل الموجودة على الفاي (phy)، والتي شرحنا للتو كيفية تحضيرها. ثم يتم تميؤ مجموعات الإستر الموجودة على محيط الـ DME بشكل مشابه لمجموعات الكربوكسيل الموجودة على محيط البورفيرين. في هذه المرحلة، وبدءاً من حمض البورفيرين DME البوليكربوكسيلي، يمكن تخليق مسبار واحد أو مسبارين من مسبارات الفوتونين لتخليق مسبارات الفوتونين.أولاً، قم بربط بضع شظايا من هوائيات الفوتونين بشكل تباعدي بمجموعات كربوكسيل متعددة على محيط الديمر. انتقل الآن إلى تعديل بقايا حمض الكربوكسيليك المتبقية في الديمر. ابدأ بإضافة فائض بمقدار 1.25 ضعف من HBTU إلى محلول عالي التركيز من ريمر البورفيرين، وقم بتقليب خليط التفاعل في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق.الآن، أضف di isopropyl ethylamine و methoxy polyethylene glyco lamine. قم بتقليب خليط التفاعل لمدة يومين في درجة حرارة الغرفة، ثم أضف ethyl ether. افصل الراسب عن طريق الطرد المركزي، وأعد ترسيبه من tetrahedran عدة مرات بإضافة dathyl ether.أخيراً، قم بتنقية المسبار عن طريق كروماتوغرافيا استبعاد الحجم على حبيبات البولي ستيرين باستخدام التيتراهيدران كمذيب. دعونا ننتقل الآن إلى توصيف المسبار ومعايرته. يتم الحصول على أطياف الامتصاص والانبعاث للمسبار باستخدام محاليل المسبار بتركيز 1 µM تحت الظروف المحيطة باستخدام مقياس طيف ضوئي قياسي ومقياس فلورية في الحالة المستقرة.للحصول بعد ذلك على مخطط معايرة ستيرن-أولمر (Stern-Ulmer)، والذي يسمح لنا بربط عمر المسبار بتركيز الأكسجين، ضع محلول المسبار في وعاء أسطواني خاص. يتم وضع الوعاء داخل غرفة يتم التحكم في درجة حرارتها، وبداخل قفص غير نفاذ للضوء يحتوي على منافذ لألياف بصرية للإثارة والانبعاث. أغلق الوعاء بسدادة تحتوي على قطب أكسجين من نوع كلارك (Clark) عالي الحساسية.يحتوي السدادة أيضاً على منفذين للإبر للدخول والخروج من Argonne. اضبط درجة الحرارة على 36 إلى 37 °C واترك المحلول تحت التقليب حتى يصل إلى حالة التوازن. قم بتوصيل ليف الإثارة بمنفذ الإثارة في جهاز phospho perimeter رقمي يتم التحكم فيه بواسطة جهاز كمبيوتر.إن مصدر الضوء والمحيط الضوئي (phos perimeter) عبارة عن صمام ثنائي باعث للضوء (LED) عالي القدرة، ويتم التحكم في مخرجاته بواسطة لوحة تحويل رقمي إلى تماثلي بتردد 333 kilohertz. يتصل ليف الانبعاث بمنفذ بصري آخر في المحيط الضوئي، والذي يتصل بدوره بصمام ثنائي ضوئي انهياري (avalanche photo diode) حساس للأشعة تحت الحمراء. يتم تضخيم مخرجات الصمام الثنائي وتغذيتها في قناة ad الخاصة بلوحة التحكم نفسها، مما يسمح بالمزامنة بين قناتي الإثارة والانبعاث.يولد برنامج التحكم المكتوب محلياً نبضات استثارة بأي طول مطلوب، يليها جمع بيانات اضمحلال الفسفورية. يتم تضخيم مخرجات قطب الأكسجين وتوجيهها إلى لوحة رقمية تناظرية أخرى على جهاز الكمبيوتر ذاته. هذه اللوحة ذات تردد منخفض، بحد أقصى 1 kilohertz، وتُستخدم لتسجيل تيار القطب في نقاط زمنية محددة، عادةً بمعدل 10 مرات في الثانية.بمجرد تعادل درجة حرارة المحلول، يتم تشغيل برنامجي محيط الفوسفور والقطب الكهربائي في آن واحد. ولإجراء القياسات كل 10 ثوانٍ، يتم تسجيل مخرجاتهما بشكل متزامن في ملفين منفصلين. بعد ذلك، يتم توصيل Argonne بمنفذ الإدخال الموجود في سدادة vet.بينما يتدفق غاز Argonne فوق سطح المحلول المقلب، فإنه يحل تدريجياً محل الأكسجين. ويؤدي ذلك إلى انخفاض في تيار القطب الكهربائي وزيادة في عمر الفوسفور، والذي يتم قياسه بواسطة phos perimeter. وعادة ما يتم إزاحة الأكسجين من المحلول تماماً.بعد مرور نحو ساعتين من عملية المعايرة، يتم استيراد بيانات القطب الكهربائي وأعمار الفسفور إلى برنامج تحليل قياسي، والذي ينشئ مخططاً بيانياً يمثل مقلوب عمر الفسفور مقابل الضغط الجزئي للأكسجين. يتم ملاءمة هذا المخطط بخط مستقيم باستخدام طريقة المربعات الصغرى لاستخراج ثابت إخماد الأكسجين من خلال ميل هذا الخط. ويتم الحصول على عمر الفسفرة إما من نفس عملية الملاءمة أو مباشرة من القياس عند مستوى صفر من الأكسجين.يمكن تكرار عملية المعايرة باستخدام محلول المسبار في وجود الألبومين، وهو بروتين موجود في بلازما الدم، وذلك لمحاكاة الظروف الموجودة في دم الحيوان في الجسم الحي (in vivo). ويجب أن تكون مخططات Stern-Volmer الناتجة متطابقة إذا كان ER يحمي المسبار، وكانت مجموعات peg تعزل المسبار عن الاتصال بالألبومين.يُقترح هنا اتباع خطوات مختارة في تخليق الأكسجين، ثم معالجة المجسات ومعايرتها. وعند إجراء المعايرة، من المهم التأكد من أن الظروف تكون أقرب ما يمكن إلى ظروف النظام البيولوجي محل الدراسة.من المهم التأكد من أن جزيء المسبار لا يتأثر بالجزيئات الحيوية، مثل الألبومين. هذا كل شيء. شكراً للمشاهدة وبالتوفيق في تجربتكم.

synthesis-calibration-phosphorescent-nanoprobes-for-oxygen-imaging

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

نقدم إجراء التجارب لقياس الضغط الجزئي للأوكسجين (PO2) في الأوعية الدموية الدماغية استنادا الأوكسجين التي تعتمد على التبريد من تفسفر. وقد حددت إعداد الحيوان وإجراءات التصوير لكلا ميدانية واسعة من التصوير CCD القائم على ضوء PO2 في الفئران و2 - الفوتون التصوير القائم على الإثارة PO2 في الفئران.

الأكسجة الدماغية قياس الأوكسجين في الدم واستنادا إلى الرواية التي تعتمد على التفسفر

يصف هذا البروتوكول وسيلة لتصوير ثلاثي الأبعاد ميكرون النطاق للتركيز الأوكسجين في البيئة المباشرة من الخلايا الحية التي تدور الإلكترونات المجهري الرنين.

سبين الإلكترون التصوير بالرنين الصغرى ، من الأنواع الحية لرسم خرائط الأوكسجين

وتستخدم جزيئات الفلورسنت المنتجة في المختبر للتركيز ايون ايون التصوير والتدفقات في النظم البيولوجية مثل خلايا السائل خلال الإشارات وخلالي خلال التوازن الفيزيولوجي.

الفلورسنت النانوية لقياس تركيز ايون في النظم البيولوجية

NADPH أوكسيديز هو المصدر الرئيسي للأنواع الاكسجين التفاعلية (ROS) في البالعات. نظرا لطبيعة زائلة من ROS، فإنه من الصعب قياس ومراقبة مستويات ROS في الحيوانات الحية. يوصف أسلوب القياس الكمي للمينيملي المسلسل من ROS في الفئران الحية.

التصوير تلألؤ بيولوجي من نشاط إنزيم NADPH في مختلف النماذج الحيوانية

تقدم هذه المخطوطة بروتوكولات لتطبيق مجسات أكسيد النيتريك المشفرة وراثيا (NO •) الجديدة (geNOps) لمراقبة تقلبات NO • الخلية المفردة في الوقت الفعلي باستخدام الفحص المجهري الفلوري. تم تصور تكوين NO • الناجم عن Ca2 + على مستوى الخلايا البطانية الفردية من خلال الجمع بين geNOps مع مستشعر Ca2 + الكيميائي.

تطبيق مشفرة وراثيا نيون اكسيد النيتريك (NO •) تحقيقات، وgeNOps، التصوير في الوقت الحقيقي من NO • إشارات في زنازين انفرادية

نقدم هنا، طريقة لتوصيف الطيفية للجزيئات العضوية عن طريق التحليل الطيفي فوتولومينيسسينسي الوقت وتصميما على المقياس الزمني النانوسيكند إلى ميلي ثانية واحدة في ظروف خالية من الأكسجين. ويرد أيضا أساليب إزالة الأكسجين من العينات بكفاءة، وهكذا، تحد من تبريد التﻷلؤ.

حل وقت الحصاد "التوصيف الثلاثي فوتوفيسيكال المركبات العضوية" في خالية من الأكسجين "البيئة باستخدام" الوثيقة iCCD الكاميرا

ونحن نقدم وصفا لاستخدام الرواية ، والتردد-المجال التلالؤ كاميرا مدي الحياة لرسم الخرائط 2D O2 التوزيعات مع رقائق الاستشعار البصرية. يتم وصف نظام الكاميرا وإجراءات تحليل الصور إلى جانب اعداد ومعايره وتطبيق رقائق الاستشعار لتصور البيئة الدقيقة O2 في جذور النباتات المائية.

التلالؤ التصوير مدي الحياة من O2 مع تردد-نظام الكاميرا المستندة إلى المجال

يصف البروتوكول توليد كروي عالي الإنتاجية للطباعة الحيوية باستخدام التحليل متعدد المعلمات للأكسجين وموت الخلايا على مجهر فلوري قياسي. يمكن تطبيق هذا النهج للتحكم في صلاحية الكرويات وإجراء التوحيد القياسي ، وهو أمر مهم في نمذجة الأنسجة 3D ، والبيئة الدقيقة للورم ، والتصنيع الحيوي الناجح (الدقيق) للأنسجة.

التصنيع الحيوي بمساعدة الأكسجين بمساعدة الأكسجين بأسعار معقولة للكرويات متعددة الخلايا

تصف هذه الورقة استخدام جهاز تصوير بصري جديد وسريع لتصوير عمر التلألؤ الضوئي العياني للعينات الباعثة للاضمحلال الطويل. يتم وصف إجراءات التكامل والحصول على الصور والتحليل ، جنبا إلى جنب مع إعداد وتوصيف مواد الاستشعار للتصوير وتطبيق التصوير في دراسة العينات البيولوجية.

تصوير ماكرو مضان مدى الحياة للتطبيقات الطبية الحيوية

نقدم بروتوكولا لتصور الأنشطة الأيضية مباشرة في الخلايا التي تنظمها الأحماض الأمينية باستخدام المجهر المجهري لتشتت رامان المحفز(DO-SRS) ، والذي يتكامل مع المجهر الفلوري ثنائي الفوتون (2PEF).

التصوير الكيميائي المتعامد الحيوي لعملية التمثيل الغذائي للخلايا التي تنظمها الأحماض الأمينية العطرية

يقدم هذا البروتوكول طريقة لتصنيع شريحة موائع دقيقة مزدوجة الطبقة وتحليل النمو الميكروبي تحت تذبذبات الأكسجين السريعة. تم التحقق من صحة أداء الجهاز من خلال استشعار الأكسجين في قنوات السوائل والزراعة الميكروبية.

إنشاء تذبذبات سريعة للأكسجين في تحليل نمو الخلية الميكروبية المفردة باستخدام جهاز مزدوج الطبقة Microfluidic

تعلم تصميم مجسات فسفورية لقياس الأكسجين باستخدام بورفيرينات البلاتين والبالاديوم المحاطة ببوليمرات التفرع. تُستخدم هذه المجسات في التصوير البيولوجي لدراسة العمليات الأيضية الحية بدقة عالية.

التوليف ومعايرة Nanoprobes الفسفورية للتصوير الأوكسجين في النظم البيولوجية

استكشف المزيد من الفيديوهات