الإسعافية ECG التسجيل في الفئران

تتم الجراحة المرجعية عن طريق حلاقة الفأر، ووضعه تحت التخدير وتعقيم البطن والصدر في موقع العملية المخطط له، ثم يتم إجراء شق عمودي في منتصف البطن باستخدام المشرط للكشف عن البريتون. يتم إجراء شق عمودي آخر في منتصف البريتون لإدخال جهاز القياس عن بُعد. يتم إدخال جهاز TER في الجانب الأيمن من البطن تحت البريتون، مع ترك الأسلاك فقط مكشوفة.

بعد ذلك، يتم إغلاق الصفاق وزراعة أقطاب TER تحت الجلد، بحيث يُزرع القطب السالب أو الأبيض في الجزء العلوي الأيمن من الصدر، ويُزرع القطب الموجب أو الأحمر فوق الجزء العلوي الأيسر من البطن. وأخيراً، يتم إغلاق الجلد باستخدام الغرز الجراحية. مرحباً، أنا مارك مكاولي من مختبر زاندر ويران في قسم الطب بكلية بايلور للطب.

سأعرض لكم اليوم تقنية لزراعة أجهزة تسجيل تخطيط كهربائية القلب (ECG TERs) في الفئران. نحن نستخدم هذه التقنية لدراسة التغيرات في معدل ضربات القلب ونظم القلب في الفئران. لذا، فلنبدأ.

قبل إدخال جهاز تسجيل تخطيط كهربائية القلب عن بُعد (ECG TER) في الفأر، من المهم التأكد من أن الجهاز معقم ويعمل بشكل جيد. هذا مثال لجهاز قياس عن بُعد للحيوانات الصغيرة من شركة Data Sciences International، حيث يحتوي على سلك موجب أحمر وسلك سالب أبيض. يمتلك كل سلك غلافاً عازلاً، وطول 2 mm من السلك المكشوف، وطرفاً مغطى بغطاء بلاستيكي، مما يمنع تآكل السلك عبر الجلد.

عادةً ما يتم توفير أجهزة القياس عن بُعد الجديدة في حالة معقمة من قبل الشركة المصنعة، ولكن يمكن إعادة استخدام أجهزة TERs بشرط تنظيفها بالهواء باستخدام محلول zyme بتركيز 1% لمدة تزيد عن أربع ساعات. بالإضافة إلى ذلك، استخدم مطهر WA OFI O ليلة كاملة لتعقيم جهاز تخطيط القلب عن بُعد (ECG Telemeter). تأكد من غسل المطهر بالماء المعقم قبل الزرع في الفئران.

افحص أسلاك جهاز القياس عن بُعد للتأكد من سلامة كل من الأسلاك الموصلة والغلاف العازل. قم بتشغيل جهاز إرسال القياس عن بُعد باستخدام مغناطيس واختبر الإشارة باستخدام راديو يعمل بتردد AM عند القناة 5.30. يجب أن تكون الإشارة قوية وواضحة، وأن تختلف في شدتها وطبقتها بناءً على تحريك الأسلاك.

سجل رقم الموديل، والرقم التسلسلي لجهاز TER، وقيمة معايرة تخطيط كهربائية القلب (ECG). إذا كان ذلك مناسباً، غالباً ما يوصي المصنعون بضرورة تشغيل جهاز TER لمدة 24 ساعة قبل عملية الزرع. ارجع إلى دليل التعليمات الخاص بجهاز TER لديك.

لتحضير سلك TER، قم بقص السلك السالب أو الأبيض إلى طول 3.5 centimeters تقريباً، والسلك الموجب أو الأحمر إلى 2.5 centimeters. هذه هي الأطوال المثالية لزراعة السلك السالب في الصدر الأيمن والسلك الموجب في البطن الأيسر. بعد ذلك، قم بإزالة الغلاف العازل لكشف 7 millimeters من السلك.

قم بطلاء نهايات السلك المعدني بالغراء السريع، ثم ثبّت أغطية الرصاص على الأطراف المعدنية. ستعمل هذه الأغطية على تجنب تآكل الجلد الناتج عن وضع الرصاص. يجب ترك ما يقرب من 2 to 3 mm من السلك المعدني مكشوفاً للاستشعار الكهربائي لنظم القلب الطبيعي.

يعد استخدام التقنيات المعقمة أمراً بالغ الأهمية في الجراحة. لزراعة جهاز قياس المسافات عن بعد (telemeter)، ستحتاج إلى قفازات معقمة، وغطاء جراحي معقم، وستة خيوط جراحية من نوع O proline. يجب تعقيم جميع الأدوات الجراحية في جهاز تعقيم بالخرز الزجاجي مسخن إلى 250 درجة Celsius.

وتشمل هذه الأدوات زوجين من الملاقط، وزوجاً من المقصات ذات النهايات غير الحادة، ومشرطاً، وحامل إبر. تأكد من تعقيم وغسل مجموعة الأدوات الجراحية (TER) كما تم وصفه سابقاً. تُستخدم هذه الأدوات لتجهيز الفأر للجراحة.

أولاً، يتم تخدير الحيوان في صندوق الحث. بعد التأكد من تخدير الفأر بشكل كافٍ عن طريق قرص إصبع القدم، تُحلق منطقة البطن والصدر تماماً باستخدام مقصات كهربائية. يتم إعادة تخدير الفأر باستخدام isof fluorine ثم يُنقل الفأر إلى أنبوب تخدير ذو تدفق مستمر.

ضع الفأر في وضعية الاستلقاء بحيث يكون الرأس موجهاً بعيداً والذيل باتجاهك. قم بتثبيت قوائم الفأر على طاولة الجراحة المسخنة باستخدام شريط لاصق. استخدم وسادة تدفئة للحفاظ على درجة حرارة الحيوان المخدر ضمن نطاق ضيق يبلغ 37 ± 1 °C.

يمكن استخدام مسبار شرجي لمراقبة درجة الحرارة، ثم يتم مسح بطن الفأر بمسحة كحولية لإزالة الشعر المحلوق وتنظيف الحقل الجراحي. يتم وضع بيتادين (Betadine) باستخدام مسحات ثلاث مرات لتطهير البطن والصدر. ثم يتم وضع غطاء معقم على بطن الفأر لغرض زرع جهاز التوتر داخل الصفاق.

ابدأ باستخدام المشرط لإجراء شق عمودي في خط المنتصف بطول حوالي 2.5 سنتيمتر في الجلد، فوق منطقة البطن باستخدام مقصات تشريحية غير حادة. افصل الجلد بعناية عن الأنسجة الضامة الموجودة تحته. ثم قم بإجراء شق عمودي في خط المنتصف في منطقة المرفق الخطي، فوق البريتون بطول 1.5 سنتيمتر تقريبًا.

بالإضافة إلى ذلك، قم بعمل ثقب صغير في الصفاق، فوق الشق الصفاقي مباشرةً، ليكون بمثابة مخرج للأقطاب الكهربائية تحت الجلد. وأثناء إجراء الجراحة، حافظ على رطوبة الموقع الجراحي من خلال تقطير المحلول الملحى المعقم على موقع العملية من حين لآخر. ثم أدخل TER في التجويف الصفاقي الأيمن.

أدخل الملقط في الثقب، فوق TER، واسحب كلا السلكين إلى الأعلى عبر ثقب السلك بحيث يبرزان من الصفاق. استخدم غرز البرولين 6-0 المستمرة لإغلاق الشق العمودي في خط منتصف الصفاق بطول 1.5 سنتيمتر. لوضع أسلاك ECG في تكوين المسار الثاني.

سيتم وضع القطب السالب ذو الغلاف الأبيض الشفاف في منطقة الصدر اليمنى. أولاً، قم بعمل شق جلدي بطول 0.5 سنتيمتر في الجزء العلوي الأيمن من صدر الفأر. بعد ذلك، استخدم المقص غير الحاد لإنشاء نفق يؤدي إلى الشق البطني.

اسحب السلك السالب عبر النفق واستخدم غرزة prolene مقاس 6-0 لتثبيت السلك بالعضلة الصدرية. تأكد من وضع الغرزة فوق الجزء المكشوف من السلك بحيث تضمن تلامساً جيداً بين السلك المعدني المكشوف والعضلة التي تحته. استخدم غرزة ثانية في موضع قريب من الغرزة السابقة لتثبيت السلك بالعضلة.

أغلق شق الجلد باستخدام غرزتين من خيوط البرولين (proline). يتم وضع القطب الموجب في الجزء الأيسر من البطن أسفل الحجاب الحاجز الأيسر وأسفل القلب. ولا داعي لإجراء شق إضافي هنا لأن موقع زرع القطب قريب من الشق العمودي في خط المنتصف.

استخدم غرزة من البرولين بمقاس 6-0 لتثبيت السلك في عضلة البطن الكامنة، مع التأكد من وجود تلامس جيد مع النسيج. وأخيراً، أغلق عضلة البطن والجلد بالتتابع باستخدام غرز برولين بمقاس 6-0 على شكل طبقات. قدم للفأر الرعاية المناسبة لما بعد الجراحة كما هو موضح في نص البروتوكول الخاص بنا.

سنعرض الآن بعض النتائج النموذجية لشكل موجة تخطيط كهربية القلب (ECG) الطبيعية. يُظهر تخطيط كهربية القلب الطبيعي لفأر من النوع البري (wild type) بوضوح موجة P، والتي تمثل إزالة استقطاب الأذينين، تليها موجة QRS، التي تمثل إزالة استقطاب البطينين. لاحظ أن موجتي P وQRS متميزتان عن ضوضاء الخلفية الصغيرة، وأن كل موجة P تسبق كل موجة QRS بنسبة واحد إلى واحد.

لاحظ أيضاً أن المسافة بين كل موجة R، والتي تسمى فاصل R to R، وبين كل موجة P، والتي تسمى طول الدورة الجيبية، منتظمة، مما يشير إلى أن الفأر في نظم جيبي طبيعي. لقد أوضحنا لكم للتو كيفية زرع جهاز ECG TER في فأر لإجراء تسجيل تخطيط كهربائية القلب المتنقل. عند تنفيذ هذا الإجراء، من المهم تنظيف جهاز TER بشكل كافٍ قبل الإدخال، ووضع الأقطاب في المواضع المناسبة، وإغلاق البطن تماماً، وأخيراً إعطاء المسكنات المناسبة للفأر بعد الإجراء.

هذا كل شيء. شكراً للمشاهدة وبالتوفيق في تجاربكم.