Name: قياس يكمل 50 ٪ الدم الانحلالي (CH 50) نشاط المصل (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-03-29T18:05:00.000+00:00
Duration: 8 min 26 s
Description: تعلم قياس نشاط المتمم CH50 في المصل باستخدام خلايا الدم الحمراء الحساسة للأغنام. تُستخدم هذه الطريقة لتقييم وظيفة الجهاز المناعي وتحديد نقص المتمم في العينات السريرية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ويود الكاتب أن أشكر الآنسة لورا ماثيوز لأداء هذه التقنية ، والسيد بول الراعي لصناعة السينما. وقد تم تمويل هذا المشروع من قبل جامعة جنوب أستراليا ، مختبر برنامج الطب.

إعداد المالحة Veronal 5X التخزين المؤقت (VBS) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لإعداد المالحة Veronal التخزين المؤقت (VBS) ، وثلاثة حلول فصل ابد أن نكون مستعدين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 1 إعداد حل عن طريق إذابة 21.25gm من كلوريد الصوديوم و0.94gm باربيتون من الصوديوم في 350ml من الماء المقطر. التركيزات النهائية لكلوريد الصوديوم والصوديوم وباربيتون 1.02M و13mM على التوالي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 2 إعداد حل عن طريق إذابة 1.44gm من باربيتون في 125ml من الماء المقطر الساخن. التركيز النهائي هو باربيتون 62.5mM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 3 إعداد حل عن طريق إذابة 20.33gm من MgCl 2 و 4.41gm من CaCl 2 في 100ML من الماء المقطر. التركيز النهائي للMgCl 2 و 2 CaCl هو 2.18M و440mM على التوالي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مزيج حلول 1 و 2 وتبرد لدرجة حرارة الغرفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة في الجمع بين الحل والمبردة ، إضافة 1.25ml الحل (3) وضبط درجة الحموضة إلى 7،3-7،5 باستخدام حمض الهيدروكلوريك 1M. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضبط الحجم النهائي ل500ml بالماء المقطر لإعداد محلول المخزون 5X. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لإعداد حل 1X العمل ، ويخفف من 1:05 الأسهم مع الماء المقطر. </li></ol> التحسس من خلايا الدم الحمراء مع الأغنام haemolysin <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد haemolysin بواسطة تمييع أولا مع أنه 01:50 VBS </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ل4ml من SRBC إضافة 6ml من VBS واخلطه برفق بواسطة انقلاب </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الطرد المركزي في العاشر 5minutes 600G </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجاهل طاف وغسل الخلايا مرات أخرى 2 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد غسل النهائي ، الطرد المركزي في الخلايا 5minutes X 900g إلى حزمة الخلايا </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تجاهل معلق وطاف resuspend الخلايا في VBS كافية لإعداد 10 ٪ 0.5ml أي حل من الخلايا معبأة في 5 مل من العازلة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطرة قطرة إضافة حجم مساو من haemolysin (الأرنب مكافحة الأغنام خلايا الدم الحمراء الضد) إلى الخلايا في حين يحوم باستمرار </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في احتضان 30 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة في حمام ماء </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المزيج بلطف خلايا كل 15minutes </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويمكن تخزين SRBC المحسس بين عشية وضحاها في 4 درجات مئوية </li></ol> CH 50 مقايسة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التسمية سلسلة من الأنابيب مع مكررة في 1:08 ، 1:16 ، 1:32 ، 1:64 و 1:128. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد سلسلة من التخفيفات two المسلسل أضعاف عن نطاق السيطرة واختبار المصل في VBS في كل مكررة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تبدأ في 1:04 (100ML المصل + 300ml VBS) ونقل 200ml من العينة في الأنبوب المسمى المقبل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مزيج دقيق بين التخفيفات و200ml نقل إلى التخفيف المقبل مع طرف ماصة جديدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر حتى يتم إجراء كافة التخفيفات الخمسة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجاهل 200ml من التخفيف 1:128 النهائي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 200ml من SRBC توعية علقت على جميع الأنابيب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التسمية أنبوبين منفصلة كما فارغة وإضافة لتوعية SRBC 200ml 200ml VBS +. وهذه الأنابيب قياس تحلل عفوية من SRBC في VBS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسمية أخرى أنابيب منفصلين كما تحلل توتال وإضافة 200ml من الماء + SRBC 200ml توعية المقطر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المزيج بلطف جميع الأنابيب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> احتضان عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة في الاختلاط بالحمام المائي بعد 15 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الطرد المركزي العينات في 1500 ز لمدة 5 دقائق لكرات الدم الحمراء والرواسب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل 100ML من طاف من كل أنبوب إلى بئر في 96 لوحة مسطحة القاع أيضا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 100ML من الماء المقطر إلى كل بئر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قراءة الامتصاصية للعينات في معمل 540nm باستخدام لوحة. </li></ol> الحسابات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب الامتصاصية يعني لكل عينة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> طرح الامتصاصية BLANK (تحلل العفوية) من جميع العينات </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب تحلل ٪ لكل التخفيف باستخدام الصيغة التالية : <img src="/files/ftp_upload/1923/1923eq1.jpg" alt="المعادلة" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="معادلة"></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مؤامرة تحلل نسبة (المحور العمودي) مقابل تخفيف المصل على المحور الأفقي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب المطلوبة لتخفيف haemolysis 50 ٪ لمراقبة واختبار المصل (الشكل 2). </li></ol> ممثل النتائج : شريط فيديو يتضمن مثالا على نتائج ممثلة. في الواقع ، هو أيضا تشغيل المصل التحكم في الوقت نفسه اختبار المصل ويتم التعامل بنفس الطريقة. أدناه (الجدول 1) بيانات عينة من عينة مصل تم اختبارها. يتلاعب البيانات وفقا للمعادلة التي قدمت في 5.3. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> عينة </td><td> OD 540 </td><td> متوسط </td><td></td><td></td></tr><tr><td> فارغة </td><td> 0.042 ، 0.044 </td><td> 0،043 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> مجموع تحلل </td><td> 0.183 ، 0.183 </td><td> 0،183 </td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="5"></td></tr><tr><td><st><td> OD 540 </td><td> متوسط </td><td> يعني ، فارغ </td><td> تحلل ٪ </td></st></td></tr><tr><td> 01:08 </td><td> 0.200 ، 0.219 </td><td> 0،210 </td><td> 0،168 </td><td> 116 </td></tr><tr><td> 01:16 </td><td> 0.179 ، 0.173 </td><td> 0،176 </td><td> 0،134 </td><td> 93 </td></tr><tr><td> 01:32 </td><td> 0.134 ، 0.110 </td><td> 0،122 </td><td> 0.08 </td><td> 55 </td></tr><tr><td> 1:64 </td><td> 0.053 ، 0.066 </td><td> 0،059 </td><td> 0،017 </td><td> 12 </td></tr><tr><td> 1:128 </td><td> 0.044 ، 0.045 </td><td> 0،045 </td><td> 0،003 </td><td> 2 </td></tr></tbody></table><img src="/files/ftp_upload/1923/1923fig1.jpg" alt="الشكل 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="الشكل 1"> الشكل 1. تفعيل مسار استكمال الكلاسيكية. يتم تنشيط المسار الكلاسيكي بواسطة ربط M - المناعي (الغلوبولين المناعي) أو الغلوبولين المناعي G - (مفتش الحكومة) على سطح الخلية المستهدفة. جزء من القطعة Fc آب بربط C1q ، يتم تنشيط C1r وهذا بدوره ينشط جزيء آخر من C1r التي تنشط معا اثنين من جزيئات C1s. C1s يشق C4 الذي يعرض الآن في موقع ملزمة لC2 الذي هو أيضا المشقوق. الربط من C4b C2a ويؤدي إلى تشكيل مجمع يشار إلى كونفيرتاز C3. هذا المجمع يشق الآن C3 تشكيل C3a وC3b ، وبعضها مع الجمع بين كونفيرتاز C3 تشكيل كونفيرتاز C5. هذا المجمع الأعمال الآن على C5 ، مع C5b الناتجة ملزمة لC6 الشروع في تشكيل غشاء الهجوم المعقدة (MAC). C5b6 يعمل على C7 ، والتي تعمل بدورها على النهاية ، وعلى C8 C9 مما أسفر عن تشكيل لجنة الهدنة العسكرية النهائي. (Goldsby وآخرون ، 2003). <img src="/files/ftp_upload/1923/1923fig2.jpg" alt="الشكل 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="الشكل 2"> الشكل 2. رسم نموذج البيانات واحتساب CH50 لمراقبة واختبار عينة مصل (A) ، يتم رسم النسبة المئوية المحسوبة (٪) تحلل من السيطرة على السواء (•) واختبار () عينات مصل ضد عامل التخفيف. (ب) لحساب تحلل 50 ٪ ، ويتم رسم خط في المئة من قيمة 50 ٪ حتى يتقاطع مع خطوط الرسم البياني ثم يتم رسم خط عمودي وصولا الى التخفيف. في هذا المثال ، هناك حاجة إلى إضعاف 35 ضعفا من السيطرة وتخفيف 21.6 ضعفا لاختبار المصل لتحقيق تحلل 50 ٪. هذه البيانات تشير إلى أن هناك أقل تكمل موجودة في اختبار المصل مقارنة التحكم كما أنها تتطلب أقل تخفيف قبل التوصل تحلل 50 ٪. العينة التحكم يظهر أيضا تحلل&gt; 100 ٪ في تخفيف 01:08. وهذا هو الأرجح بسبب تحلل ناقصة من SRBC من الماء المقطر وتحلل أكثر كفاءة من خلال عناصر مكملة.

<ol><li>Goldsby, R. A., Kindt, T. J., Osborne, B. A., Kuby, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGoldsby%2C+RA+%22Immunology%22">Immunology</a>. , W.H. Freeman. (2003).</li>
</ol>

50 CH مقايسة يخضع لتدخلات كثيرة. بعض SRBC هي أكثر هشاشة من غيرها ، مما أدى إلى haemolysis العفوية التي لا علاقة لتكملة النشاط. تقارب من الأضداد الأرنب يختلف من الكثير والكثير لمن مصنع واحد لآخر ، وهذا يؤثر على كمية من الأجسام المضادة التي تربط لSRBC. أيضا ، فإن عملية توعية SRBC مع نتائج الضد في الخلايا التي تحتوي على كميات مختلفة من الطلاء على الضد SRBC. جمع العينات والتخزين تعتبر مصدرا هاما محتملا للخطأ. مكونات مكملة مثل C1q ، C3 ، C4 و C5 وعطوب للغاية ، بحيث التعامل ا...

<table><tbody><tr><td>خلايا دم حمراء للأغنام</td><td>CSL</td><td>2490201</td><td>تُستخدم بتركيز نهائي 1%</td></tr><tr><td>مصل</td><td></td><td></td><td>مصل بشري</td></tr><tr><td>مصل مضاد لتحلل خلايا الدم الحمراء للأغنام من الأرنب، غير مقترن</td><td>AbD Serotec</td><td>C12HSB</td><td></td></tr><tr><td>لوحة ذات 96 بئراً بقاع مسطح</td><td>Sarstedt Ltd</td><td>83.1839</td><td></td></tr><tr><td>محلول ملحي منظم بالفيرونال</td><td></td><td></td><td>يُستخدم بتركيز نهائي 1x</td></tr><tr><td>حمام مائي</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>قارئ الألواح</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>غرفة/حضّانة بدرجة حرارة 37&amp;#x00B0;C</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

قياس يكمل 50 ٪ الدم الانحلالي (ch 50) نشاط المصل

Measuring the 50% Haemolytic Complement (CH50) Activity of Serum

نظام تكمل مجموعة من البروتينات التي تؤدي الى تنشيط عندما تحلل الخلايا المستهدفة ويسهل من خلال البلعمة opsonisation. ويمكن قياس مكونات تكمل الفردية ولكن هذا لا يوفر أي معلومات عن نشاط المسار. وCH<sub&gt; 50</sub&gt; هو فحص الكشف عن تفعيل الممر تكمل الكلاسيكية (الشكل رقم 1) وأنه حساس في الحد ، وغياب و / أو الخمول أي مكون من الطريق. وCH<sub&gt; 50</sub&gt; اختبارات القدرة الفنية لمكونات مصل لاستكمال المسار الكلاسيكي لليز خلايا الدم الحمراء الأغنام (SRBC) قبل المغلفة مع الغنم الحمراء المضادة للأرنب الدم الأضداد الخلية (haemolysin). عندما يتم تحضين الضد المغلفة SRBC مع اختبار المصل ، يتم تنشيط المسار الكلاسيكي لتكمل والنتائج haemolysis. إذا كان مكونا مكملا غائب ، CH<sub&gt; 50</sub&gt; سوف يكون مستوى الصفر ، وإذا انخفضت هي واحدة أو أكثر من مكونات المسار الكلاسيكية ، CH<sub&gt; 50</subوسيتم انخفضت&gt;. يتم إضافة وحدة تخزين ثابتة من SRBC توعيتهم على النحو الأمثل لتخفيف كل مصل. بعد الحضانة ، يتم طرد الخليط وكميا درجة haemolysis عن طريق قياس الامتصاصية من الهيموغلوبين يطلق في طاف في 540nm. يتم تحديد مقدار النشاط تكملة طريق فحص قدرة تخفيفات مختلفة من اختبار المصل على الضد ليز SRBC المغلفة. هذا الفيديو يبين الخطوات التجريبية تشارك في تحليل مستوى النشاط استكمالا للمسار استكمال الكلاسيكية.

يتم تنشيط المسار الكلاسيكي بواسطة الأجسام المضادة ويتوج في انحلال الخلايا المستهدفة. وCH<sub&gt; 50</sub&gt; مقايسة يوفر قدرا من النشاط مكملا لعينة مصل. هذا الفيديو يوضح الخطوات التي ينطوي عليها تحديد CH<sub&gt; 50</sub&gt; عينة مصل ، والحسابات وتفسير النتائج.

قياس يكمل 50 ٪ الدم الانحلالي (CH 50) نشاط المصل

يعتبر النظام المتمم مجموعة من البروتينات التي تؤدي عند تنشيطها إلى تحلل الخلية المستهدفة وتسهيل عملية البلعمة من خلال الطلاوة. تساهم البروتينات الفردية...

قياس نشاط المتممة الحالة للدم بنسبة 50% (CH 50) في المصل. ستحتاج إلى ماصة قادرة على سحب 200 µL وأخرى قادرة على سحب 1000 µL، ومصل اختبار تم تخزينه على الثلج، وكريات دم حمراء من أغنام محسسة، ومحلول ملحي منظم فواروني، وماء مقطر، وأنابيب للمصل المختبر، وأنابيب للقياس المرجعي والتحلل الكامل، وجهاز مزج دوامي (vortex mixer)، وصفيحة ذات 96 بئراً ذات قاع مسطح. قم بتسمية الأنابيب بشكل فردي بكلمة "الضابطة" والتخفيف النهائي؛ وفي هذه الحالة، نبدأ بتخفيف بنسبة 1 إلى 8.استمر في إجراء التخفيف المضاعف للحصول على تخفيفات بنسبة 1 إلى 16، و1 إلى 32، و1 إلى 64، و1 إلى 128، مع تسمية الأنابيب المتبقية بـ "blank" و"total lysis". وبمجرد الانتهاء من تسمية جميع الأنابيب، يمكنك الآن البدء في تخفيف المصل المراد اختباره. ابدأ بنقل 300 µL من محلول R buffer saline إلى أنبوب جديد.قم الآن بنقل 100 µL من المصل إلى 300 µL من المحلول الملحي المنظم R. سيعطيك هذا تخفيفاً أولياً بنسبة واحد إلى أربعة. تأكد من خلط عينة المصل جيداً.قم الآن بنقل 200 µL من المحلول الملحي المنظم (PBS) إلى الأنابيب التي تم تمييزها مسبقاً. كذلك، أضف 200 µL من المحلول الملحي المنظم إلى أنبوبي التحكم الفارغين ضمن أنابيب التحلل الكلية. أضف 200 µL من الماء المقطر، وليس المحلول الملحي المنظم.انقل الآن 200 µL من المصل المخفف بنسبة 1 إلى 4 إلى الأنبوب المسمى 1 إلى 8. لقد قمنا سابقاً بنقل 200 µL من المحلول الملحي المنظم الفوسفاتي إلى سلسلة الأنابيب من 1 إلى 8 وحتى 1 إلى 128. سيؤدي هذا الآن إلى الحصول على تخفيف بنسبة 1 إلى 8.امزج العينة جيداً، ثم انقل 200 µL إلى الأنبوب المسمى "واحد" في الخطوة 16. استمر في هذه العملية حتى يتم تخفيف السلسلة الكاملة من الأنابيب. تخلص من 200 µL من الأنبوب ذو التخفيف 1:28 بحيث يكون الحجم النهائي 200 µL.قد تترسب خلايا الدم الحمراء للأغنام المحسسة بمرور الوقت. سيتطلب ذلك إعادة تعليقها عن طريق قلب الأنبوب برفق عدة مرات. وبمجرد إعادة التعليق جيداً، يتم نقل 200 µL من خلايا الدم الحمراء للأغنام المحسسة إلى كل أنبوب من الأنابيب المُحضرة.تأكد من خلط المصل جيداً مع خلايا الدم الحمراء. إن إضافة خلايا الدم الحمراء للأغنام المُحسسة إلى الأنبوب الفارغ ستسمح لك بتحديد التحلل التلقائي، بينما تسمح إضافة الدم إلى أنبوب التحلل الكلي بتحديد قيمة 100%؛ باستخدام جهاز مزج دوامي (vortex mixer) مضبوط على درجة منخفضة، اخلط كل أنبوب برفق. الآن، ضع الأنابيب في حمام مائي عند درجة حرارة 37 degrees Celsius واتركها لتحضن لمدة 30 دقيقة.بعد 15 minutes من التحضين، قم برج الأنابيب برفق باستخدام جهاز vortex مرة أخرى، ثم حضنها لمدة 15 minutes إضافية. بعد التحضين، انقل الأنابيب إلى جهاز طرد مركزي مضبوط على أربع degrees Celsius، وقم بالطرد المركزي عند 1500 G لمدة five minutes. بعد الطرد المركزي، أخرج الأنابيب بعناية وضعها في حامل مناسب. ستلاحظ هنا وجود راسب من خلايا الدم الحمراء بينما يظهر الـ SNA باللون الأحمر.نظراً لإطلاق انتقال الهيموجلوبين، يتم إضافة 100 µL من الماء المقطر في العدد المطلوب من آبار صفيحة ذات قاع مسطح تحتوي على 96 بئراً. مع الحرص على تجنب نقل الراسب، يتم نقل 100 µL من السائل الطافي إلى بئر مناسب في صفيحة الـ 96 بئراً. وبمجرد تحميل جميع العينات في الصفيحة، يتم قياس الامتصاص باستخدام مقياس الطيف الضوئي للأطباق المضبط عند 540 nm.لدينا هنا بيانات الامتصاص الخام للتكرارين، A1 و B1. يرجى الرجوع إلى التخفيف بنسبة 1:8.بعد ذلك، لدينا البيانات الخاصة بالتخفيفات 1 في 16، و1 في 32، و1 في 64، و1 في 128. وتمثل العينات A6 وB6 العينة الضابطة (البلانك)، بينما تمثل A7 وB7 التحلل الكلي.بمجرد جمع البيانات، يجب حساب متوسط الامتصاص لكل عينة مكررة. بعد ذلك، يتم طرح امتصاص العينة الضابطة (Blank)، والذي يمثل التحلل التلقائي، من جميع العينات. وبمجرد جمع كافة البيانات، يمكنك الآن حساب النسبة المئوية للتحلل لكل تخفيف باستخدام الصيغة التالية.بمجرد حساب جميع البيانات، قم برسم النسبة المئوية للتحلل على المحور الرأسي مقابل تخفيف المصل على المحور الأفقي. ويمكن بعد ذلك استخدام الرسم البياني الناتج لحساب تخفيف المصل المطلوب لإحداث تحلل بنسبة 50% من خلايا الدم المحسسة. يوضح هذا الرسم البياني النسبة المئوية للتحلل مقابل مضاعفات تخفيف المصل.يمكن بعد ذلك رسم خط من نقطة تحلل 50% حتى يتقاطع مع المنحنى. وعند نقطة التقاطع مع المنحنى، يتم رسم خط رأسي نزولاً إلى المحور الأفقي. تمثل هذه القيمة معامل التخفيف الذي يجب تخفيف المصل إليه لضمان تحلل بنسبة 50%؛ وعند مقارنة عينتين من المصل لتحديد ما إذا كان هناك فرق في CH 50، يمكن استخدام التخفيف الذي يحقق تحللاً بنسبة 50% كمقياس.

measuring-the-50-haemolytic-complement-ch50-activity-of-serum

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

علم المناعة والعدوى

لدراسة فعالية وظيفة الخلايا المناعية للسكان هو مطلوب في كثير من الأحيان لتنقية بهم. نضوب تكمل هي تقنية سريعة وغير مكلفة لعزل السكان الخلايا المناعية مع درجة نقاوة عالية.

نضوب بالسكان خلية معينة من قبل استنفاد تكملة

Haemagglutination هو شكل من أشكال تراص حيث ربط الأجسام المضادة خلايا الدم الحمراء. خلايا الدم الحمراء على حد سواء متوفرة بسهولة ويمكن ملاحظتها بسهولة النتائج باستخدام العين المجردة. هذا الفيديو يوضح الخطوات المتبعة في فحص haemagglutination ، وتفسير النتائج وتحديد عيار.

تحديد التفاعل وعيار من المصل باستخدام الفحص Haemagglutination

هذه الدراسة توضح فحص صفيحة ميكروسكوبية الرواية التي تقيس النشاط FV تخثر تجلط الليفين خلال تشكيل في البلازما البشرية التي لم يبلغ عنها سابقا. أسلوب يستخدم قارئ صفيحة ميكروسكوبية الحركية باستمرار لقياس التغير في الامتصاصية في 405nm خلال تشكيل جلطة الليفين في البلازما البشرية.

قياس نشاط V عامل في البلازما البشرية باستخدام الفحص التخثر صفيحة ميكروسكوبية

يوضح هذا الفيديو تقنية لتقييم نشاط مبيد للجراثيم بوساطة تكميلية للأجسام المضادة الموجودة في المصل. يجمع هذا النهج بين المصل المعزول والبكتيريا المسببة للأمراض والبروتينات التكميلية الخارجية. عند الحضانة ، تزرع البكتيريا على صفيحة أجار ، ويتم قياس المستعمرات المنتجة لقياس عيار مبيد للجراثيم في الدم.

مقايسة مبيد للجراثيم في الدم للنشاط المبيد للجراثيم بوساطة الأجسام المضادة بوساطة تكميلية

يوضح الفيديو مقايسة تثبيط التخثر الدموي للكشف عن الأجسام المضادة في الدم ضد مستضدات معينة. يتم تحقيق تأكيد تثبيط التخثر الدموي في بئر الاختبار والتراخيص الدموي في بئر التحكم من خلال أنماط بصرية مميزة. يلعب هذا الاختبار دورا مهما في تقييم الاستجابة المناعية وفعالية اللقاح ودراسة الالتهابات الفيروسية في علم الفيروسات والمناعة.

مقايسة تثبيط التخثر الدموي للكشف عن الأجسام المضادة في الدم ضد مستضد مستهدف

يوضح هذا الفيديو فحوصات التحييد الدقيق لقياس تحييد الأجسام المضادة باستخدام خلايا الكلى Madin-Darby التي تفرط في التعبير عن حمض السياليك المرتبط بα2،6 في المصل البشري. غالبا ما يستخدم هذا الاختبار في علم الأمصال البشرية للأنفلونزا...

اختبار تحييد دقيق لقياس عيار الأجسام المضادة المعادلة في المصل البشري

نحن هنا وصف اثنين من المقايسات لقياس تفعيل مكملا الناجم عن أجسام مضادة ضد خلايا الدم الحمراء. وميزة كبيرة على المقايسات الحالي الكمي وطبيعة السهل تفسير ل.

طرق للكشف الكمي للجسم التي يسببها تكملة التنشيط على خلايا الدم الحمراء.

يؤدي التعرض للدم لقنوات الدم البوليمرية إلى بدء تفاعل الجسم الغريب المتورط في المضاعفات السريرية. هنا ، يتم وصف جهاز Chandler Loop ، وهو أداة تجريبية تحاكي نضح الدم من خلال هذه القنوات. ينتج عن ملحق CD47 المؤتلف انخفاض الأدلة على تفاعل الجسم الغريب على هذه القنوات.

استخدام لل فيفو السابقين جهاز تشاندلر حلقة لتقييم توافق مع الحياة من التعديل أنابيب الدم البوليمرية

المعروضة هنا هي طريقة بسيطة لقياس نشاط الكيتيناز في السوائل البيولوجية مثل غسل القصبات الهوائية أو المصل.

قياس نشاط الكيتيناز في العينات البيولوجية

يصف هذا البروتوكول تقييمًا شاملًا للتوافق المنقم لأجهزة ملامسة الدم باستخدام غرسات الأعصاب الوعائية المقطوعة بالليزر. يتم تطبيق نموذج حلقة التدفق مع الدم البشري الطازج ة المندفعة لمحاكاة تدفق الدم. بعد التروية ، يتم تحليل مختلف علامات الدم ومقارنتها بالقيم المكتسبة مباشرة بعد جمع الدم لتقييم توافق الخلايا الدموية للأجهزة المختبرة.

اختبار توافق الدم من زرع الدم الاتصال في نموذج حلقة تدفق محاكاة تدفق الدم البشري

والهدف من هذه الطريقة هو تحديد كثافة CR1 في كريات الدم الحمراء من أي موضوع عن طريق مقارنة مع ثلاثة مواضيع التي يعرف كثافة CR1 الكريات الحمراء. تستخدم هذه الطريقة قياس الخلايا المتدفقة بعد المناعة من كريات الدم الحمراء للأشخاص بواسطة جسم مضاد أحادي النسيلة مضاد لـ CR1 إلى جانب نظام مضخم باستخدام phycoerythrin (PE).

قياس مستقبلات مكملة الإريثروسيت 1 باستخدام قياس التدفق الخلوي

تعلم قياس نشاط المتمم CH50 في المصل باستخدام خلايا الدم الحمراء الحساسة للأغنام. تُستخدم هذه الطريقة لتقييم وظيفة الجهاز المناعي وتحديد نقص المتمم في العينات السريرية.

قياس يكمل 50 ٪ الدم الانحلالي (CH₅₀) نشاط المصل

استكشف المزيد من الفيديوهات