التنسيق النموذجي نقص تروية الدماغ عن طريق خياطة اللف انسداد الشريان الدماغي الأوسط في الجرذ

في هذا الفيديو، سوف نوضح طريقة لتوليد احتشاء دماغي عن طريق انسداد الأوعية الدموية للشريان الدماغي الأوسط في الفئران. هذا نموذج حيواني مستخدم على نطاق واسع في أبحاث السكتة الدماغية ، والذي ينتج نقص التروية في القشرة الدماغية وكذلك في الهياكل تحت القشرية ، بما في ذلك العقد القاعدية وتحت المهاد. يمكن أن يولد هذا النموذج نقص تروية دماغي دائم أو عابر.

اعتمادا على ما إذا كانت الخيط داخل اللمعة قد تركت في مكانها أو تمت إزالتها بعد فترة زمنية محددة. ينتج نقص التروية الدماغية نواة احتشاء يحدث فيها موت الخلايا ، وتسمى المنطقة المحيطة بنقص تروية شبه الظل حيث قد يكون من الممكن بعض الانتعاش الخلوي. قبل أن نبدأ ، دعنا نتوقف لحظة لوصف الخطوات التي سنتبعها.

هنا نرى مخططا مبسطا لنظام الدورة الدموية القحفية للفئران. في هذه الجراحة ، سنقوم بتعريض الشريان السباتي الأيسر بالقرب من تشعب الشريان السباتي المشترك أو CCA في الشريان السباتي الخارجي و ECA والشريان السباتي الداخلي. سيتم ربط ICA فرعين صغيرين من ECA والشريان القذالي والشريان الغرقي العلوي باستخدام التخثر ثنائي القطب وسيتم ربط ECA بعيدا بهذين الفرعين باستخدام خياطة حريرية ، سيتم وضع مقاطع الأوعية الدموية الدقيقة على الشرايين السباتية السباتية والداخلية الداخلية.

بعد ذلك إدخال خياطة أحادية من النايلون بطرف مطلي بالسيليكون من خلال شق في ECA وتوجيهها إلى ICA. يتم ربط هذه الخيط داخل اللمعة برفق في مكانها باستخدام خياطة حريرية حول ECA قبل تحرير المشبك الصغير من ICA. ثم يتم تطوير خياطة النايلون داخل اللمعة حوالي سنتيمترين حتى يحجب طرف السيليكون أصل الشريان الدماغي الأوسط أو MCA.

تتم إزالة المقطع الصغير الثاني من CCA ويتم توقيت فترة الانسداد. الآن بعد أن أصبح لدينا نظرة عامة على الإجراء ، دعنا ننتقل إلى الجراحة. قم بإعداد اللون الأحمر كما تفعل مع أي إجراء جراحي وفقا لإرشادات رعاية لمؤسستك ، نضع اللون الأحمر تحت التخدير باستخدام 5٪ من الفلور للحث بمعدل تدفق لتر واحد في الدقيقة أكسجين ولتر واحد في الدقيقة أكسيد النيتروز ، نقوم بتقليل تركيز الفلور إلى واحد إلى 2٪ للصيانة.

بمجرد تحقيق مستوى التخدير ، نقوم بتطبيق مرهم الدموع الاصطناعي على كلتا العينين ونحلق الرقبة باستخدام المقص. ثم يتم تطهير المنطقة بمحلول البيتين متبوعا بنسبة 70٪ من الإيثانول. يجب تكرار هذه العملية لما مجموعه ثلاث دورات من شطف البيتادين و 70٪ من الإيثانول.

يتم وضع اللون الأحمر في جورب معقم ويوضع على بطانية تنظيمية حرارية. لمنع انخفاض حرارة الجسم. من المفيد رفع الرقبة قليلا عن طريق تحريك أنبوب مخروطي 15 مل تحت رأس اللون الأحمر.

سيساعد هذا في تعريض الشرايين السباتية لاحقا. أخيرا ، يتم حقن 0.2 مل من محلول الإخلاء بنسبة 0.5٪ تحت الجلد على طول موقع الشق المفترض من أجل تخفيف الآلام بعد الجراحة تحت مجهر التشغيل. قم بعمل شق خط الوسط باستخدام شفرة مشرط رقم 10.

سيحدث التشريح المتبقي على الجانب الأيسر من خط الوسط. ابدأ في تشريح اللفافة السطحية. يتم ذلك بمزيج من التشريح الحاد والحاد.

الأنسجة الغدية واسعة مرئية بشكل جانبي بينما تقع العضلة القصية الكبيرة في خط الوسط. تستخدم القصبة الهوائية أدوات تطبيق ذات طرف قطني لتشريح الغدة بشكل جانبي والعضلات الخلفية وسطيا. تحت الأنسجة الغدية ، سترى عضلات الخشاء ثنائية المعدة والقصية ، والتي جنبا إلى جنب مع خط الوسط المؤخرة أو العضلات المثلث الخفي الذي يتم وضع ذروته حول دائرة.

داخل هذا المثلث سيستمر التشريح إلى الشريان السباتي. استخدم مقصا صغيرا لقطع اللفافة التي تغطي العضلات. سيوفر هذا تراجعا للعضلات لفضح الأوعية الأساسية.

يمكن استخدام أدوات تطبيق الطرف القطنية لسحب العضلات وإبراز الشرايين المشتركة المزدحمة والخارجية والمزدحمة والداخلية المزدحمة. مواصلة العمل على كشف هيئة الهيئة. سيتطلب ذلك تشريحا حادا دقيقا للأوعية.

الهدف من هذه الخطوات هو تحرير ECA و ICA من النسيج الضام الأساسي. استمر في تشريح حليف اللجنة الاقتصادية لأفريقيا. لاحظ أنه قد يتم العثور على عظم إخفاء HI وهذا سيحد من مدى التسلخ المنقاري.

العصب المبهم ، الذي يبدو أبيض ، وهو يتجول على طول الجانب الجانبي لكل من الشرايين السباتية المشتركة والداخلية ، وقمنا بتشريح CCA و ICA بحدة. كما يتم تشريح فرعين قادمين من ECA بشكل حاد. الفرع الأول يتجه بشكل جانبي هو الشريان القذالي والفرع الثاني الذي يتجه وسطيا هو الشريان الغرقي العلوي.

يتم كي كل من الفرعين الأول والثاني من ECA وقطعها لاحقا. يسمح قطع هذه الفروع بمزيد من السهولة في تعبئة الأوعية. في وقت لاحق من الإجراء ، باستخدام خياطة حريرية ، اربط ECA بإحكام إلى أقصى حد ممكن.

ضع خياطة حريرية أخرى بشكل غير محكم حول ECA القريب من تشعب الشريان السباتي المشترك. تأكد من عدم انسداد الوعاء بهذه الربطة مثل خياطة الأوعية الدموية المستخدمة في انسداد الشريان الدماغي الأوسط. سنستعرض هذا الجزء من ECA تضع مشابك الأوعية الدموية الدقيقة على كل من الشرايين السباتية السباتية والداخلية.

وقد أبعد هذا الموقف إلى حد ما من أصل اللجنة الاقتصادية لأفريقيا. بعد ذلك ، قم بإنشاء استئصال الأذن الجزئي للشريان بين ربطتي خياطة الحرير في ECA. قد يتم إطلاق كمية صغيرة من الدم المتبقي ، ولكن من المحتمل أن يشير النزيف الشديد إلى التثبيت غير السليم باستخدام مشابك الأوعية الدموية الدقيقة.

في هذه الحالة ، تأكد من عدم وجود نسيج أساسي في شفرات القصاصة التي تمنع الإغلاق الكامل. الخطوة التالية هي إدخال خياطة نايلون أحادية الشعيرات بطول ثلاثة سنتيمترات في ECA. من المفيد وضع علامة على الخيط على بعد سنتيمترين من طرفها المطلي بالسيليكون.

هذه الغرز متوفرة تجاريا ويمكن تصميم قطر طرف وطول طلاء السيليكون حسب مواصفاتك اعتمادا على عمر ووزن الفئران التي ستستخدمها. بالنسبة للفئران التي يبلغ وزنها 300 جرام ، نستخدم قطر طرف 0.39 ملم وطول طلاء سيليكون من ملليمترين إلى ثلاثة ملليمترات على خياطة نايلون رباعي الأو. أدخل خياطة النايلون المسدودة في تجويف ECA لأسفل باتجاه الشريان السباتي المشترك.

شد خياطة الحرير حول جذع ECA لتأمين خياطة النايلون داخل اللمعان ومنع النزيف. قم بقص الجزء المتبقي من ECA لتحرير الجذع ووضع جذع ECA أسفل نقطة التشعب بحيث يتماشى تقريبا مع ICA. سيسمح ذلك بسهولة أكبر للخياطة داخل اللمعة بالانزلاق إلى الشريان السباتي الداخلي.

قم بإزالة مشبك الأوعية الدموية الدقيقة من ICA. تذكر أن تفتح المشابك ببطء للتحقق من وجود نزيف قبل إزالتها تماما. استمر في تقدم خياطة النايلون داخل تجويف ICA حتى تصل إلى الشريان الدماغي الأوسط.

عادة ما يكون هذا الطول حوالي سنتيمترين وهو سبب وضع علامة على الخيط قبل الإدخال. بعد إدخال طول متغير من خياطة النايلون ، قد تشعر بالمقاومة إذا حدثت مقاومة مع بقاء الكثير من خياطة النايلون موجودة خارج الوعاء ، فمن المحتمل أن يشير ذلك إلى أن الخيط يدخل شريان تيغو الحنكي. في هذه الحالة ، اسحب الخيط للخلف وقم بثنيه قليلا للاستمرار على طول ICA ، والذي سيعمل على الفور.

لاحظ التغيير في موضع الخيط داخل تجويف ICA في هاتين اللقطتين للمقارنة. استمر في تقدم الخيط من خلال ICA حتى يتم إدخال معظم الغرز والشعور بالمقاومة مرة أخرى في هذه المرحلة. سدت الخيط داخل اللمعة أصل MCA.

ابدأ المؤقت وسجل الانسداد. وقت البدء. قم بإزالة مشبك الأوعية الدموية الدقيقة الآخر من CCA ، وأغلق الشق بسرعة وبعناية.

ضع اللون الأحمر في قفص الاسترداد. تأكد من أن أرضية القفص حول الأنف والفم خالية من مواد الفراش قبل فترة وجيزة من فترة الانسداد ، ويجب أن تنتهي فترة الانسداد ، وتخدير الجرذ وإعادة فتح الشق عن طريق إزالة خيوط الإغلاق. ضع مشبك صغير على CCA كما كان من قبل.

اسحب خياطة الانسداد جزئيا من ICA حتى تظهر نهاية الخيط من خلال ICA. لا تقم بإزالة الخيط بالكامل بعد. ومع ذلك ، ضع مشبك صغير آخر على ICA فوق موقع الخيط داخل اللمعة ، وقم بإزالة خياطة الانسداد تماما واربط جذع ECA.

سجل وقت بدء إعادة التروية. قم بإزالة المشابك الدقيقة من ICA ومن CCA الرطب في المنطقة بعدة قطرات من المحلول الملحي المعقم وأغلق الشق بالخياطة. نقوم بحقن البوبرينورفين بجرعة 0.05 ملليغرام لكل كيلوغرام من وزن الجسم للحصول على تسكين إضافي بعد الجراحة.

نقوم أيضا بإعطاء خمسة مل من المحلول الملحي داخل الصفاق لتوفير الترطيب خلال مرحلة التعافي. بعد أن يتعافى الجرذ من اختبار التخدير للإشارة السلوكية للاحتشاء عن طريق إمساك الجرذ من الذيل ومراقبة ما إذا كان يمكن للفأر أن يتحول إلى كلا الجانبين في اختبار تأرجح الجسم المرتفع هذا ، فإن الشباك إلى جانب واحد فقط كما هو متوقع. قد تدور الفئران التي تظهر عليها أعراض السكتة الدماغية أيضا إلى جانب واحد أثناء حركات المجال المفتوح.

نعرض هنا نتائج 60 دقيقة من انسداد MCA في الفئران المصابة بارتفاع ضغط الدم تلقائيا. تم إجراء التصوير بالرنين المغناطيسي بعد 24 ساعة من عرض صورتين مرجحتين ل MCAO و T. طور هذا الجرذ احتشاء كبيرا يشمل كلا من المناطق القشرية والستيرويدية.

يتم تمييز المنطقة شديدة الكثافة في التصوير بالرنين المغناطيسي باللون الأصفر ، على الرغم من أننا لا نعرض النتائج هنا. يمكن تحليل المناطق المحتشة التي يتم تصورها بواسطة التصوير بالرنين المغناطيسي بشكل أكبر عن طريق التصوير المرجح بالانتشار وخرائط معامل الانتشار الظاهري. يتم تأكيد المناطق المحشية أيضا من خلال التلوين النسيجي لأقسام الدماغ المعزولة حديثا باستخدام كلوريد ثلاثي رباعي الأليوم أو نازعة هيدروجين TTC في الأنسجة الحية التي تحول الركيزة إلى صبغة حمراء غير قابلة للذوبان.

وبالتالي تظل المناطق المحتضنة غير ملوثة وتظهر بيضاء. لاحظ أن حجم الاحتشاء يمكن أن يتأثر بعدة عوامل بما في ذلك سلالة الفئران وحجم. نستخدم الفئران المصابة بارتفاع ضغط الدم تلقائيا لأنها تنتج أحجاما أكثر اتساقا من السلالات الأخرى شائعة الاستخدام مثل فئران frogg أو dolly أو wistar.

من المهم أيضا توحيد وزن الفئران المستهدف لتقليل الاختلافات في قطر الوعاء وبالتالي في الفعالية الناتجة عن انسداد MCAA. نأمل أن تكون قد وجدت هذا الفيديو مفيدا في إجراء تقنية انسداد MCA في مختبرك الخاص. شكرا على المشاهدة ونتمنى لك السعادة في تجاربك.