حقن تقويم العظام في وسادة الدهون الثديية: تحديد سرطان الثدي في الفئران

أولا ، قم بإنشاء خط خلايا سرطان الثدي المطلوب في المزرعة. في اليوم السابق للعملية ، احلق بطن الفأر واستخدم كريم إزالة الشعر لإزالة الفراء وفضح الحلمات الأربية. في يوم العملية ، اجمع الخلايا ، وتخدير الفأر وتأكد من عدم الاستجابة لقرص إصبع القدم. باستخدام الملقط ، اضغط على الجلد حول الحلمة لإنشاء نفق مرتفع.

ثم ، مع حقنة الخلايا التي تم جمعها ، اخترق الجلد. يجب أن تتبع الإبرة النفق حتى يقترب الطرف من الحلمة. حركي طرف الإبرة برفق لأعلى إلى وسادة الدهون الثديية ، أسفل الحلمة مباشرة. قم بإزالة الملقط لتشكيل خيمة جلدية بالإبرة ثم حقن الخلايا ببطء.

أخيرا ، اسحب المحقنة ، مع الحرص على عدم إزعاج النتوء المستدير المحيط بالحلمة. تعبر الخلايا المحقونة والأورام اللاحقة عن لوسيفيراز ويمكن تتبعها باستخدام التصوير الحيوي. في مثال البروتوكول ، سنعرض إنشاء سرطان الثدي تقويم الفئران. في اليوم السابق للعملية ، قم بتقييد الفأر المتلقي يدويا وقم بتحويل جانب بطن إلى الفراء ليتم حلقه حول الحلمات الرابعة.

امسح الفراء بطبقة رقيقة من كريم إزالة الشعر. استخدم الماء المقطر لإزالة الكريم بعد 30 إلى 60 ثانية. وجفف الماوس بمناشف ورقية ناعمة. في يوم العملية ، قم بتخفيف تعليق خلايا سرطان الثدي الفئرانية إلى 2 × 10 إلى الخلايا الخامسة لكل مليلتر من تركيز PBS في أنبوب طرد مركزي دقيق معقم على الجليد.

قبل كل حقنة ، قم بتحميل حقنة واحدة ، واحدة مليلتر مجهزة بإبرة .45 × 16 ، مع 50 ميكرولتر من الخلايا لكل فأر. وتأكد من عدم الاستجابة لقرصة إصبع القدم في كل مخدر. ضع مرهما على عيون ، واستخدم الملقط لخيمة الجلد حول الحلمة الرابعة للفأر الأول لإنشاء نفق للحقنة لتتبعه.

أمسك المحقنة بحيث يكون الشطبة متجها لأعلى وادخل الجلد تحت الجلد على بعد خمسة إلى 10 ملليلتر من الحلمة ، متبعا النفق حتى يصل طرف الإبرة تقريبا إلى الحلمة. - يؤدي استخدام الملقط لخيمة الجلد حول الحلمة الأولى إلى إنشاء نفق تتبعه المحقنة. يجب إدخال الإبرة بين أطراف الملقط ويجب أن ترتفع بدلا من الاكتئاب في الأنسجة. حرك طرف الإبرة بعناية إلى وسادة الدهون الثديية حتى يصبح الشطبة تحت الحلمة.

وحرر خيمة الجلد للسماح بالحقن البطيء للخلايا السرطانية. - عند الإدخال ، حرك طرف الإبرة بعناية لأعلى إلى وسادة الدهون الثديية حتى تصبح الشطبة تحت الحلمة ، وتشعر بالمقاومة لضمان توصيل الخلايا إلى الموقع الصحيح. عندما يتم حقن جميع الخلايا ، أدر الإبرة قليلا إلى الجانب واسحب المحقنة ببطء. استخدم قطعة قطن للضغط على جرح الإبرة لمدة 10 إلى 20 ثانية ، للتأكد من عدم وجود تسرب للسوائل.

يجب أن تظهر الحلمة المحقونة على شكل كرة بيضاء شفافة مسطحة ، مع وجود الحلمة في المنتصف