تحضير شرائح اليرقات: طريقة لتصور الخلايا العصبية الحسية السليمة وخلايا البشرة المرتبطة بها

- لتوجيه اليرقة لتشريح الشرائح ، ضعها في طبق مغطى بالسيليكون يحتوي على محلول ملحي بارد وحدد جوانبها الظهرية والبطنية. تحدد أنابيب القصبة الهوائية التي تمتد على طولها الجانب الظهري ، بينما تحدد أحزمة أسنان البطن الجانب البطني.

ثم ، مع الجانب البطني لأعلى ، قم بتمديد اليرقة برفق وتثبيت كل طرف في قاع الطبق. سيحافظ هذا الموضع على المجموعات الظهرية للخلايا العصبية الحسية متعددة التغصنات وخلايا البشرة المرتبطة بها سليمة مع استمرار التشريح.

استخدم مقص تشريح للقطع على طول خط الوسط البطني لليرقة. قم بتثبيت البشرة على اللوحة لتسطيح المستحضر وإزالة الهياكل الداخلية للكشف عن الأنسجة العضلية الأساسية. بعد ذلك ، قم بإزالة العضلات المناسبة بعناية لفضح البشرة والوصول إلى الخلايا العصبية المحجوبة سابقا مع الحفاظ على مورفولوجيتها التغصنية.

في بروتوكول المثال ، سنرى عرضا توضيحيا مفصلا لتحضير شرائح اليرقات وإزالة العضلات لعرض الخلايا العصبية الحسية وخلايا البشرة.

- للبدء ، أضف كمية كافية من المحلول الملحي البارد إلى طبق مطاط سيليكون لتغطية السطح السفلي. أضف يرقة الموضوع إلى الطبق وضعها تحت المجهر الاستريو ، مما يضمن وضع الضوء بشكل صحيح. ضع اليرقة مع الجانب البطني لأعلى ، والذي يمكن التعرف عليه بواسطة أحزمة أسنان البطن.

قم بتمديد اليرقة في الاتجاه الأمامي الخلفي ، وباستخدام دبابيس الحشرات ، قم بتثبيت الرأس والذيل في قاع الطبق. باستخدام مقص تشريح ناعم ، قم بقصه على طول خط الوسط البطني لليرقة من طرف إلى آخر. انشر اليرقة مفتوحة وقم بتثبيت أنسجة البشرة في الزوايا الأربع بحيث تكون مسطحة.

باستخدام الملقط ، قم بإزالة الأعضاء الداخلية ، بما في ذلك الجهاز العصبي المركزي والأمعاء والقصبة الهوائية. اضبط دبابيس الحشرات بحيث تكون الشرائح مشدودة ، ولكن لا تمتد إلى أقصى حد.

حدد موقع خط الوسط الظهري لليرقة ، حيث تكون الأنسجة العضلية غائبة ثم ضع شقة ملقط في الجزء الداخلي من هذه الحدود. حرك الشق بين العضلة والبشرة ، مع الحرص على تقليل ملامسة البشرة.

- لتقليل الضرر الذي يلحق بالبشرة ، قم بالتشريح باستخدام أشد الشوكات الممكنة. وحاول تشريح محلول ملحي يحتوي على الكالسيوم. يمكن أن يساعد ذلك في خلق مسافة بين العضلات والبشرة.

- بعد ذلك ، اسحب الملقط لأعلى لكسر ارتباط العضلة بجدار الجسم عند نقطة تثبيت واحدة. كرر هذه العملية لأجزاء العضلات المتبقية ذات الأهمية.

أعد ضبط حظائر الحشرات لتمديد شرائح اليرقات إلى أقصى حد في جميع الاتجاهات.