تتبع الذباب الذي يمشي بحرية: طريقة لتقييم الحركة في ذبابة الفاكهة

- استخدم ساحة مغطاة - على سبيل المثال ، طبق بتري مليء بالسيليكون الشفاف - لضمان قدرة الذباب على المشي بحرية ، لكنه غير قادر على الطيران داخل الساحة عند تغطيته. ضع الطبق على سطح أبيض مضاء وضع الكاميرا فوقه مباشرة.

مع فتح الغطاء ، انقل الذباب المخدر إلى الطبق ، وقم بتغطيته ، واترك الأشخاص بالتعافي. سوف يتحرك الذباب بحرية في جميع أنحاء الساحة أثناء المحاكمة. لتقييم الحركة ، تتبع موضع كل ذبابة بمرور الوقت واحسب المعلمات التي تميز الحركة ، مثل المسافة التي تقطعها كل ذبابة. في بروتوكول المثال هذا ، سنرى عرضا توضيحيا لإعداد الفحص وتحليله باستخدام برنامج تتبع الفيديو.

- لتتبع حركات الذبابة في طبق بتري ، أولا ، املأ طبقا بطول 6 سم بمطاط سيليكون شفاف لعمل ساحة التتبع. اترك فجوة 3 ملم بين السيليكون والغطاء ، بحيث يمكن للذباب المشي بحرية في الفجوة ، ولكن لا يطير. تحت ساحة التتبع ، لديك خلفية بيضاء.

بعد ذلك ، قم بتخدير أربعة ذباب من نفس مجموعة العلاج ووضعها في الساحة. دع الذباب يتأقلم لمدة ساعة مع الساحة ، والتي يجب أن تكون مضاءة بالكامل وعند حوالي 22 درجة مئوية ، وليس أكثر سخونة من درجة حرارة الغرفة. بعد ساعة ، استخدم كاميرا جهاز مقترنة بالشحن موضوعة فوق الساحة لتسجيل نشاط الذبابة لمدة 5 دقائق.

بعد التسجيل الذي مدته 5 دقائق ، قم بتخدير الذباب في الساحة وإعادته إلى قارورة منزلية جديدة. ثم تخلص من الساحة. في وقت لاحق ، قم بتحليل التسجيلات باستخدام برنامج Ctrax المتاح مجانا. يقوم هذا البرنامج بإنشاء بيانات التتبع ، والتي يمكن تصديرها بتنسيق متوافق مع اللغة القابلة للبرمجة ، مثل تنسيق MATLAB.

من البيانات ، احسب المسافة المقطوعة لكل إطار ، ومتوسط مسافة المشي لكل ذبابة ، ومتوسط المسافة المقطوعة لكل ذبابة. للحصول على دلالة إحصائية ، توقع اختبار حوالي 100 ذبابة لكل مجموعة علاج.