موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 2:09 دقيقة • April 30th, 2023
- أولا ، ضع شريحة مجهرية بين شريحتين أخريين بشريط لاصق. توفر هذه الدعم والفواصل لإعداد وسادة الاغاروز. بعد ذلك ، ضع قطرة من الاغاروز المذاب على الشريحة. اضغط على الفور عليه بشريحة أخرى.
بعد أن يصلب الاغاروز ، افصل الشرائح بعناية حتى يظل الاغاروز على شريحة واحدة. استخدم دائما الفوط الطازجة لأن الفوط الجافة يمكن أن تجفف. تأكد من عدم وجود تشققات أو فقاعات يمكن أن تعطل سلامة الوسادة.
بعد ذلك ، أضف قطرة من التخدير إلى مركز الوسادة وانقل 10 إلى 15 إليه ، مع جلب أقل قدر ممكن من البكتيريا معهم. يمكن أن تتداخل البكتيريا الزائدة مع التصوير. إذا جف محلول التخدير ، أضف قطرة ثانية على.
ضع غطاء برفق فوق الوسادة. تجنب تكوين الفقاعات أو الضغط عليها كثيرا لمنع إتلاف. أخيرا ، قم بتسمية الشريحة الجاهزة للتصوير.
- ابدأ بإعداد الشرائح للتصوير. ضع قطرة من الاغاروز المذاب على شريحة مجهرية واضغط على الفور على القطرة بشريحة مجهر أخرى لتسطيح الاغاروز برفق ، وتحتاج إلى أن يجف الاغاروز لمدة دقيقة واحدة.
بعد ذلك ، افصل الشريحتين بعناية واترك الوسادة الصلبة على إحدى الشرائح. ضع الشريحة على مرحلة المجهر وأضف قطرة من 5 إلى 10 ميكرولتر من التخدير إلى وسط وسادة أغراس.
استخدم معقا معقما بالحرارة لنقل 10 إلى 15 بسرعة من صفيحة المخزون إلى قطرة التخدير قبل أن يجف المحلول. بعد ذلك ، ضع غطاء عن طريق وضعه فوق وسادة الاغاروز مباشرة وإسقاطه برفق.