موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 2:14 دقيقة • April 30th, 2023
- للبدء ، ضع يرقة أسماك الحمار الوحشي في غرفة تسجيل ، مثل بئر ذو قاع زجاجي ، حيث يمكن لليرقة السباحة فيها. اجمع الباراميسيا ، الفريسة ، بمساعدة ماصة دقيقة ، وضعها في غرفة التسجيل. بعد ذلك ، ضع قطرة صغيرة من الماء في وسط زلة الغطاء وضعها فوق الغرفة لتجنب فقاعة الهواء.
الآن ضع الغرفة على نظام الإضاءة المجهز بمصباح دائري LED أبيض للتخلص من الظلال وجعل الكائنات الحية مرئية بوضوح. راقب سلوك التقاط الفريسة باستخدام نظام تسجيل سلوكي. بمجرد ظهور الفريسة في الأفق ، تتلاقى اليرقة مع عينيها وتأخذ منعطفا J لتوجيه جسمها نحو الفريسة والتقاطها. يمكننا تحديد سلوك التقاط الفريسة عن طريق تسجيل عدد الباراميسيا المتبقية في الغرفة على مدى فترة زمنية. في البروتوكول التالي ، سنقوم بتقييم سلوك التقاط الفريسة ليرقة أسماك الحمار الوحشي بعد الاستئصال بالليزر لخلايا عصبية معينة.
- بعد إعداد نظام التسجيل السلوكي ووضع يرقة في غرفة التسجيل وفقا لبروتوكول النص ، استخدم ماصة دقيقة لجمع 50 باراميسيا ووضعها في غرفة التسجيل. لوضع زلة غطاء أعلى غرفة التسجيل ، ضع قطرة صغيرة من الماء على زلة الغطاء قبل وضعها على سطح الماء لغرفة التسجيل لتجنب إدخال الهواء في الغرفة.
ضع غرفة التسجيل في نظام الإضاءة. ثم ابدأ تسجيل الفاصل الزمني بمعدل 10 إطارات في الثانية لمدة 11 دقيقة. أخيرا ، قم بإجراء التحليل وفقا لبروتوكول النص.