مقايسة الاستجابة البصرية: طريقة لقياس حدة البصر في أسماك الزرد

- قم بتأمين سمكة مخدرة على منصة مع امتد عيونها وخياشيمها إلى ما وراء حافة المنصة. ضع السمكة في وضع مستقيم في أسطوانة مملوءة بالماء داخل أسطوانة مضاءة جيدا يمكنها الدوران بحرية. بمجرد أن تنتعش السمكة ، ويشار إليها بحركة الخياشيم والعين ، ضع صريفا أو نمطا من الخطوط الرأسية البيضاء والسوداء بالتناوب في الأسطوانة. الآن ضع سدارا أسود صلبا على الخطوط في رؤية العين اليسرى.

ابدأ الدوران وسجل الاستجابة البصرية ، OKR ، للعين اليمنى. يتكون OKR من حركات العين الانعكاسية استجابة لمحفز بصري. استبدل النمط بخطوط أصغر وأصغر بالأبيض والأسود حتى تختفي حركة العين. قم بنفس الإجراء للعين اليسرى.

لحساب حدة البصر الأحادية ، والقدرة على تمييز التفاصيل الدقيقة ، وقياس المسافة من مركز عدسة العين إلى النمط وطول أصغر نمط لزوج من الشريط الأبيض والأسود الذي لوحظت فيه حركة العين. في مثال البروتوكول ، سنستخدم الاستجابة البصرية لقياس حدة البصر أحادية العين ومجهر في أسماك الزرد البالغة.

- يتم إجراء دراسات البصريات باستخدام جهاز تسجيل مصمم خصيصا باستخدام أسطوانة دوارة قطرها 14.5 سم ، ومجهر استريو مع إعدادات شدة ضوء قابلة للتعديل ، وجهاز كمبيوتر ، وكاميرا لالتقاط الصور والتسجيل. يتم استخدام متحكم يعمل بالكمبيوتر لضبط سرعة الأسطوانة الدوارة واتجاهات الدوران. باستخدام الأسماك التي يتم صيانتها في ظل الظروف القياسية ، ابدأ التحليل عن طريق تخدير سمكة بنسبة 0.016٪ ثلاثية الأبعاد لمدة دقيقتين إلى ثلاث دقائق ثم وضعها على منصة صغيرة مع تعليق العينين والخياشيم على الحافة.

للحفاظ على جمالة الأسماك مع تجنب الإصابة ، ضع إسفنجة رقيقة أو منشفة على جسم السمكة وقم بتثبيت قطعتين إلى ثلاث قطع من الرغوة فوق السمكة ، مع التأكد من أن حركة الذيل محدودة. ضع السمكة داخل خزان أسطواني مملوء بالماء يناسب الأسطوانة الدوارة لجهاز تسجيل OKR. استخدم المغناطيس على المنصة لوضع السمكة في وضع مستقيم مع العينين على بعد حوالي 7.3 سم من حافة الأسطوانة.

بمجرد أن تنتعش الأسماك من التخدير ، ويتم ملاحظة التنفس الطبيعي وحركات العين العشوائية ، ضع شبكة أساسية من 0.07 دورة لكل درجة ، أو CPD ، في الأسطوانة الدوارة وقم بإشراك عناصر التحكم في الكمبيوتر لبدء الدوران والتقاط الفيديو. بعد استنباط OKR الأولي بواسطة الشبكة الأساسية ، أوقف الدوران مؤقتا لفترة وجيزة واستبدل الشبكة بشبكة أصغر بتردد مكاني أعلى. كرر هذه العملية مع حواجز شبكية أصغر بالتتابع حتى لا يمكن استخلاص OKR. للتحقق من فقدان OKR ، باتباع نهج الدرج المعدل ، أعد الاختبار باستخدام أصغر شبكة تسببت في OKR ، ثم باستخدام الشبكة التي فشلت في الحصول على استجابة للتحقق من فقدان OKR.

للحصول على قياسات حدة أحادية العين ، ضع سدا بلاستيكيا أسود فوق الخطوط المجاورة للعين المعاكسة وكرر عملية جمع البيانات. ثم قم بالتبديل إلى العين الأخرى عن طريق إعادة وضع الانسداد وأخذ القياسات. استخدم شريط القياس المرجعي الموجود أسفل حوض السمك لتدوين مسافة كل عين من الشريط لإجراء قياسات دقيقة للحدة.

لتحديد حدة البصر ، احسب CPD باستخدام الصيغة التالية ، حيث a هي المسافة من مركز العدسة إلى الشبكة ، و h هي طول دورة واحدة من أصغر شبكة لوحظ فيها OKR. لقياسات حدة البصر المدمجة، استخدم متوسط قيمة محسوبة من كل من العين اليسرى واليمن.