موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 4:22 دقيقة • April 30th, 2023
- ابدأ بإضافة 5 أجنة في وسط E3 إلى كل بئر من صفيحة 96 بئرا ، وقم بإزالة الوسط الزائد باستخدام ماصة. أضف وسط E3 الذي يحتوي على الكاناميسين في كل بئر لمنع التلوث. دع الأجنة تنمو عند 28 درجة مئوية.
تمييع المركب محل الاهتمام بمذيب مناسب ، مثل DMSO ، لتحضير عدة تركيزات أو جرعات ، واختبار تأثير كل جرعة على الأجنة النامية. بمجرد وصول الأجنة إلى المرحلة المطلوبة ، قم بتقطيع كل محلول مخزون في آبار فردية. غطي الطبق بغطاء ولفيه برفق لخلط المحتويات. دع الأجنة في صفيحة البئر تنمو عند 28 درجة مئوية.
في الوقت المطلوب في التطور الجنيني ، ضع صفيحة البئر تحت مجهر مناسب لفحص النمط الظاهري للأجنة. قد تلاحظ الأنماط الظاهرية مثل فقدان العينين أو تأخر النمو أو فقدان الخلايا الصباغية في الأجنة النامية. في البروتوكول التالي ، سنختبر مكتبة مركبة لمثبطات الجزيئات الصغيرة لنمو الدماغ الأمامي.
- عادة ما يتم توفير مكتبات الجزيئات الصغيرة في لوحة مصدر 96 بئرا مع كل مركب مخزن في DMSO كمخزون 10 ملليمول. قبل حوالي 60 دقيقة من وصول الأجنة إلى المرحلة المرغوبة ، قم بإذابة عدد مناسب من ألواح 96 بئرا تحتوي على حصصات من جزيئات صغيرة. لاحظ رقم التعريف التسلسلي أو غيره من الأرقام التعريفية للوحات المصدر. لتقليل التكثيف على الألواح ، قم بإذابة الثلج في غرفة تجفيف تحتوي على المجفف.
قم بتدوير الألواح لفترة وجيزة في جهاز طرد
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية