موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 0:04 دقيقة • April 30th, 2023
- في يرقات الزرد ، يمكن للمحفز البصري تنشيط الخلايا العصبية الحسية الجسدية وتحفيز استجابة الهروب. هناك نوعان من هذه الخلايا العصبية الموجودة في اليرقة ، الخلايا العصبية ثلاثية التوائم و Rohon-Beard. يمكننا التلاعب بنشاط هذه الخلايا العصبية عن طريق تعديلها للتعبير عن القنوات الأيونية الحساسة للضوء المعدلة وراثيا. يسمى هذا النهج علم البصريات الوراثي.
لأداء هذه التقنية ، قم بتركيب يرقة معدلة وراثيا بحيث يكون الجانب الظهري متجها لأعلى في هلام الاغاروز وضعها تحت مجهر تشريح. استخدم شفرة حلاقة لفصل جزء على شكل إسفين من الاغاروز من حول صفار البيض والذيل. املأ هذه المنطقة بماء البيض. اسحب الاغاروز بعيدا عن جذع وذيل اليرقة.
ضع طرف كبل بصري بالقرب من الجذع حيث يوجد جسم الخلية لخلية Rohon-Beard العصبية. قم بتوصيل نبضة من ضوء الليزر الأزرق. عند التعرض للضوء الأزرق ، تفتح القنوات الأيونية الحساسة للضوء المعدلة وراثيا في غشاء الخلايا العصبية ، مما يسمح للأيونات بالدخول ، مما يؤدي إلى جهد فعل يثير استجابة الهروب. سجل سلوك اليرقة باستخدام كاميرا عالية السرعة.
في بروتوكول المثال ، سنقوم بتركيب اليرقات لتنشيط الخلايا العصبية Rohon-Beard ، والتعبير عن متغير channelrhodopsin ومراقبة الاستجابة السلوكية.
- اصنع 1.5٪ من الاغاروز منخفض الذوبان في ماء مقطر مزدوج وخزنه في كتلة حرارية 42 درجة مئوية لمنعه من ا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية