تشريح عدسة العين: تقنية لمراقبة مورفولوجيا عدسات الزرد

- تتكون عين الزرد من القرنية والصلبة والعدسة وشبكية العين. القرنية عبارة عن نسيج شفاف يسمح للضوء بالدخول إلى العين. الصلبة عبارة عن نسيج غير شفاف مستمر مع القرنية ، ويشكل طبقة واقية خارجية. العدسة عبارة عن بنية كروية تركز الضوء على شبكية العين ، وهي طبقة حساسة للضوء من الأنسجة تحول الضوء إلى إشارة عصبية.

لتشريح العين ، املأ طبق بتري بالسيليكون واتركه يتماسك. الآن ، ضع سمكة مخدرة في الطبق واستأصل العينين باستخدام مقص صغير. انقل العينين إلى طبق مملوء ب PBS للحفاظ على درجة حموضة ثابتة في الأنسجة وتوجيه العين بحيث يكون الجانب الخلفي متجها لأعلى. امسك العين بالملقط وقم بعمل ثلاث جروح شعاعية بعناية من خلال الصلبة والشبكية.

بعد ذلك ، قم بطي المنديل للخارج للكشف عن العدسة. الآن ، ضع العين بحيث يكون الجانب الأمامي متجها لأعلى وقم بإزالة الصلبة والشبكية. استخرج العدسة من العين المقطوعة وقم بإزالة أي أنسجة متبقية حولها. في البروتوكول التالي ، سنقوم بإجراء تشريح عدسات اليرقات وسمك الزرد البالغ لتحليل مورفولوجيا العدسة.

بعد التأكد من التخدير الكافي باستخدام التريكيين ، استخدم مقص التشريح الدقيق لاستئصال كلتا العينين على الفور من سمك الزرد البالغ أو اليرقات ، وضع كلتا العينين في طبق بتري مصنوع خصيصا مقاس 35 ملم مع قالب تشريح سيليكون مملوء ب PBS. لحصاد العدسة من سمكة زرد بالغة ، ضع الجانب الخلفي للعين لأعلى وأدخل ملقطا بزاوية أقل من 45 درجة من خلال القرص البصري. استخدم مقص التشريح لعمل شقين أو ثلاثة شقوق شعاعية عبر شبكية العين والصلبة من القرص البصري إلى المنطقة الهدبية في العين الجامدة وتقشير شبكية العين والصلبة مثل بتلات الزهور. اقلب العين ، وجانب القرنية لأعلى ، واستخدم الجانب المسطح من المقص لتثبيت العدسة بشكل غير مباشر عن طريق التلاعب بالصلبة والقرنية أثناء استخدام الملقط لسحب شبكية العين والأنسجة المرفقة. ثم قم بقص أي أنسجة زائدة من العدسة بعناية.

لحصاد عدسة اليرقات الزرد ، يلعب الجانب الخلفي لعين اليرقات لأعلى على الجزء المسطح من طبق سيليكون من PBS. واستخدم إبرة التنغستن الحادة لعمل شقوق راديوية في شبكية العين والصلبة أثناء شل حركة العين بإبرة أخرى أو ملقط. ثم اغرف العدسة برفق من العين المنفصلة بالجانب الحاد من إبرة سلك التنغستن المصنوعة خصيصا واسحب الأنسجة المرفقة بعناية.