الفيزيولوجيا الكهربية لمشبك التصحيح للخلية الكاملة: طريقة لدراسة الخصائص الكهربائية للخلايا العصبية

- ابدأ بوضع غرفة تسجيل تحتوي على عينة في محلول الاستحمام ، الذي يتطابق تكوينه مع البيئة الفسيولوجية خارج الخلية أو السيتوبلازم ، على مرحلة المجهر. قم بتقدم الماصة الدقيقة المسجلة ، وهي ماصة تحتوي على قطب فضي مغمور في محلول إلكتروليت ، والذي يحاكي الظروف داخل الخلايا ، باتجاه الخلايا العصبية عن طريق الضغط الإيجابي ، والاتصال بغشاء الخلية.

قم بالتبديل برفق من الضغط الموجب إلى الضغط السلبي لتشكيل مانع تسرب محكم بين الغشاء والماصة. قم بتعيين إمكانات الاحتفاظ على مكبر الصوت للحفاظ على الخلية عند جهد ثابت. ثم قم بتمزيق غشاء الخلية داخل الماصة الدقيقة عن طريق تطبيق الشفط.

بمجرد تمزق غشاء الخلية ، يتسبب جهد الاحتفاظ بتدفق الأيونات عبر القنوات الأيونية ذات الجهد الكهربائي ، مما يخلق إمكانات غشاء يتم تسجيلها بواسطة قطب التسجيل. سجل على الفور إمكانات الغشاء. ينقل قطب التسجيل الإشارة إلى مضخم التغذية الراجعة ، والذي يطرح جهد الغشاء من إمكانات الاحتفاظ - راسم الذبذبات ، الذي يقدم عرضا مرئيا لإمكانات الغشاء ، وجهاز كمبيوتر. في البروتوكول التالي ، سنقوم بإجراء قياس مشبك التصحيح على خلية Mauthner في جنين الزرد.

- للتحضير لتثبيت الرقعة، ابدأ بسحب بعض ماصات مشبك التصحيح بزجاج البورسليكات ذي الجدران الرقيقة في مجتذب أفقي. يبلغ طول طرف الماصة حوالي 0.2 إلى 0.4 ميكرومتر بعد تلميع الحريق إلى حافة ناعمة