موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 3:11 دقيقة • April 30th, 2023
- تنشر الخلايا العصبية نبضات كهربائية عبر إمكانات العمل. عندما تكون الخلايا العصبية في حالة الراحة ، يكون هناك تدفق أبطأ لأيونات البوتاسيوم من تدفق أيونات الصوديوم ، مما يؤدي إلى تغيير إمكانات الغشاء. يؤدي هذا إلى فتح قنوات أيونات الصوديوم والسماح بتدفق أيونات الصوديوم ، مما يولد نبضة كهربائية.
طريقة دراسة مثل هذه الأنشطة في الخلية تسمى الفيزيولوجيا الكهربية. ابدأ الإجراء بإدخال طرف قطب ثانوي في فتحة أنف الزرد البالغ. بعد ذلك ، أدخل الأقطاب الكهربائية الأولية بشكل سطحي ، داخل التكتوم البصري المكشوف ، لقياس النشاط العصبي خارج الخلية.
يقيس القطب الأساسي إمكانات الغشاء خارج الخلية لجميع الخلايا المحيطة به. تمثل الإشارة إمكانات الغشاء المشتركة لجميع هذه الخلايا. يكتشف القطب الإشارة وينقلها إلى مكبر للصوت - راسم الذبذبات - الذي يقدم عرضا مرئيا لإمكانات الغشاء وجهاز كمبيوتر.
راقب القراءات وحلل الفرق الكهربائي بين الأقطاب الأولية والثانوية. القياس الفيزيولوجي الكهربي هو مقارنة. في مثال البروتوكول ، سنقيس تأثير المركبات الدوائية على النشاط العصبي في سمكة الزرد البالغة.
- لتسجيل الفيزيولوجيا الكهربية ، أغلق محبس التنبيب وافصل بسرعة قفل Leur الذي يربط قاعدة التنبيب بالتنقيط ثلاثي الفينين. انقل إعداد التنبيب السليم إلى مجهر الفيزيولوجيا الكهربية ، وقم بتوصيله بنظام التروية. قم بتشغيل مياه الموائل وقم بتسخينها بمعدل 1 ملليلتر في الدقيقة لمدة ساعة واحدة تقريبا ، من أجل غسل التريكيين.
باستخدام مناور دقيق ، ضع القطب الثانوي بحيث يمكن إدخال طرف القطب الكهربائي في فتحة أنف ، أو في الغمس أسفل الفك العلوي. بعد ذلك ، أدخل إبرة القطب الأساسي في فتحة حج القحف. بعد ذلك ، أدخل الإبرة في الأنسجة ، بحيث يتم وضع الطرف بشكل سطحي إلى حد ما داخل التكتوم البصري.
قد تؤدي المواضع العميقة للقطب الكهربائي إلى إشارة كهربائية صغيرة. لجمع البيانات ، يتم استخدام الوضع الخالي من الفجوات بمعدل أخذ عينات 5,000 هرتز ، جنبا إلى جنب مع مرشح التمرير المنخفض البالغ 0.1 كيلو هرتز ومرشاح التمرير العالي بمقدار 1 هرتز. ابدأ في تسجيل نشاط الفيزيولوجيا الكهربية عندما تتدفق مياه الموائل لمدة 45 دقيقة على الأقل. سجل خط الأساس للنشاط الأصلي لمدة 15 دقيقة على الأقل قبل إضافة الأدوية التجريبية.