الحقن داخل الصفاق: طريقة لتوصيل المحلول إلى تجويف البطن لأسماك الزرد البالغة

- صيام سمكة بالغة لمدة 24 ساعة قبل الحقن لتفريغ الجهاز الهضمي وخلق مساحة إضافية في البطن. في يوم الإجراء ، قم بتخدير السمكة بطبقة التريكيين وضعها في فتحة في إسفنجة مبللة بحيث يكون الجانب البطني متجها لأعلى.

بعد ذلك، ضع الماصة الكمية المطلوبة من محلول الحقن على قطعة من غشاء المختبر واسحبها إلى إبرة الأنسولين. ضع الإبرة بين زعانف الحوض بزاوية 45 درجة من محور الجسم الأمامي الخلفي وادفعها برفق عند خط الوسط. تقدم الإبرة حوالي 1 إلى 2 ملم في تجويف البطن ، والمسافة بين جدار البطن والأعضاء الداخلية ، وحقن المحلول محل الاهتمام ببطء. انتظر لمدة خمس ثوان قبل سحب الإبرة لتجنب أي انسكاب. الآن ، قم بإزالة الإبرة بعناية.

بعد الحقن ، انقل الأسماك بسرعة إلى خزان استرداد يحتوي على مياه خزان عذبة. إذا لم تبدأ السمكة في السباحة على الفور ، فقم بتدوير الماء بالقرب من الخياشيم لمساعدتها على التعافي من التخدير. في مثال البروتوكول ، سنقوم بحقن محلول المتفطرة مارينوم في أسماك RAG1 الطافرة لدراسة العدوى.

- أولا ، قم بإخراج قطرة 5 ميكرولتر من المحلول البكتيري المخفف على قطعة من فيلم البارافين. ثم اسحب القطرة إلى إبرة أنسولين قياس 30. استخدم سمكة عمرها خمسة إلى ثمانية أشهر لهذه التجربة ، حيث تكون إحداها سمكة من النوع البري والأخرى سمكة متحولة من نوع RAG.

ضع هذا الجانب البطني للأسماك لأعلى في شقوق قطعة من البل