موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:19 دقيقة • April 30th, 2023
ابدأ بوضع قطعة من شمع العظام في لوحين لزراعة الخلايا المسمى على أنهما اختبار وتحكم. الماصة كمية مناسبة من التلألؤ الحيوي التي تعبر عن خلايا سرطان الثدي في كل مركز لوحة وتحتضن الصفائح لفترة محددة للمساعدة في الارتباط بالخلايا. ضع نبتة عظمية صغيرة على شمع العظام في لوحة الاختبار وثبتها عن طريق الضغط عليها.
صب وسط زراعة الخلايا ببطء مع مصل الأبقار الجنيني ، وهو مكمل نمو ، على كل جانب من جوانب اللوحة لغمر النبتة واحتضانها عند 37 درجة مئوية لفترة محددة. تطلق أنسجة العظام في لوحة الاختبار عوامل قابلة للذوبان ، مثل السيتوكينات و SRC كيناز ، والتي تجذب خلايا سرطان الثدي ، مما يؤدي إلى هجرتها. أضف ركيزة إلى كل لوحة وضع الألواح على غرفة تصوير التلألؤ الحيوي.
تعمل الخلية السرطانية التي تعبر عن البروتين المضيء بيولوجيا على أكسدة الركيزة وتنبعث منها الضوء. تحديد الانتشار عن طريق قياس إجمالي الفوتونات المنبعثة من كل خلية باستخدام البرنامج. يجب أن تتكاثر الخلايا السرطانية في لوحة الاختبار بشكل أسرع من الخلايا الموجودة في لوحة التحكم. في البروتوكول التالي ، سنقوم بالزراعة المشتركة لخلايا سرطان الثدي المجاورة لمختلعات عظم الفخذ لقياس تكاثر خلايا الثدي.
في هذه التجربة ، قم بإعداد معلق لخلايا سرطان الثدي مع 100,000 خلية لكل 50 ميكرولتر من DMEM بالإضافة إلى 10٪ FBS. بالإضافة إلى ذلك ، قم بإعداد سدادات
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية