الحقن داخل القناة: توصيل مزيج الحقن إلى قنوات الغدة الثديية للفأر

الحقن داخل القناة هو تقنية لتقديم مزيج حقن قد يحتوي على خلايا سرطانية أو ناقلات تعبير أو عامل علاجي مكمل بصبغة تتبع في قنوات الغدة الثديية.

لهذا الإجراء ، قم بتحميل حقنة بمزيج الحقن. بعد ذلك ، ضع الجانب البطني للفأر المخدر لأعلى على سرير الجراحة. قم بعمل شق على الجلد بين الزوج الإربي أو الخامس من الغدد الثديية. افصل بعناية سديلة الجلد عن الصفاق الجداري لتصور شجرة الأقنية.

باستخدام الملقط ، ارفع الحلمة واقطع الجزء الخارجي منها بعناية لرؤية فتحة القناة. استخدم ملاقطا لرفع حافة سديلة الجلد ، وأدخل إبرة المحقنة برفق في الحلمة لتوصيل مزيج الحقن. مراقبة حركة صبغة التتبع في شجرة الأقنية الثديية. تنتشر الصبغة في شجرة القناة دون أن تتسرب إلى السدى ، مما يشير إلى نجاح الحقن.

انتظر بضع ثوان لتجنب الانسكاب ، ثم قم بإزالة الإبرة ببطء من موقع الحقن. أغلق الشق بمشبك الجرح. في البروتوكول التالي ، سنقوم بإجراء الحقن داخل القناة لتوصيل Cre الذي يعبر عن الفيروس الغدي إلى الغدة الثديية الفأرية.

استخدم تقنيات التعقيم طوال العملية الجراحية. قم بعمل موقع شق على الجلد بطول سنتيمتر واحد تقريبا بين الغدد الثديية الأربية الرابعة. افصل بعناية سديلة الجلد عن الصفاق الجداري ، وذلك لتصور شجرة الأقنية الثديية.

أمسك الحلمة بحذر باستخدام ملقط صانعي الساعات لإزالة الحلمة الخارجية دون قطع أي جلد قريب باستخدام مقص التشريح الدقيق. قم بتحميل ما يقرب من ثلاثة إلى خمسة ميكرولترات من خليط حقن Cre الغدي في حقنة هاميلتون سعة 25 ميكرولتر مع إبرة محور معدنية قياس 33.

قم بتقدير حجم خليط الحقن في المحقنة بناء على الصبغة الزرقاء الموجودة في الخليط. أمسك حافة رفرف الجلد برفق بملاقط منحني ناعم وحقن خليط حقن الفيروس الغدي Cre ببطء في الحلمة أثناء مراقبة انتشار الصبغة الزرقاء في شجرة الأقنية الثديية. حافظ على معدل الحقن بطيئا قدر الإمكان لتجنب تلف تجويف القنوية.

يشار إلى الحقن الناجح داخل القناة عن طريق السوائل المحقونة المنتشرة في جميع أنحاء شجرة الأقنية بأكملها دون التسرب إلى الحجرة اللحمة. اسحب الإبرة برفق من الحلمة لتجنب أي تسرب للسائل المحقون. افحص الجانب البعيد من الغدة الثديية أو المنطقة المحيطة بالحلمة المحقونة.

يشير انتشار الصبغة في السدى القريب ، كما هو موضح هنا ، إلى حقن وسادة دهون الثدي بدلا من الحقن الناجح داخل القناة. أغلق الجروح الجراحية والجلد بمشابك الجرح.

أخرج الماوس من التخدير وضعه على وسادة تدفئة داخل قفص نظيف للشفاء. مراقبة تطور الورم الثديي كما هو موضح في البروتوكول النصي.