zPDX-تحليل الغزو: التحقيق في السلوك الغازي للخلايا السرطانية النقيلية في الطعوم الغريبة لجنين أسماك الزرد

الطعوم الغريبة لجنين الزرد مفيدة في دراسة غزو الخلايا السرطانية. قم بإعداد نماذج الطعم الغريب عن طريق حقن الخلايا السرطانية النقيلية والخلايا غير السرطانية المسماة بالفلورسنت في الفضاء المحيط لجنينين معدلين وراثيا. الفراغ المحيطي هو مسافة بين محيط الجنين وكيس صفار البيض. دع الأجنة تنمو للفترة المطلوبة.

خلال هذه الفترة ، تنقسم الخلايا السرطانية النقيلية بقوة في موقع الحقن بينما تظل الخلايا غير السرطانية مستقرة. بعد الحضانة ، استخدم ماصة باستور لنقل الأجنة إلى طبق تعليق زجاجي القاع. قم بإزالة ماء البيض الزائد وضع الأجنة في الموضع المطلوب للتصوير. احتفظ بقلة غطاء أعلى الطبق وضع الطبق تحت مجهر المجال الساطع.

التقط الصور وحلل السلوك الغازي لكلا النوعين من الخلايا. تميل الخلايا السرطانية النقيلية إلى غزو الأوعية الدموية من موقع الحقن. تتحرك على طول الدورة الدموية ، ثم تغزو الأنسجة المحيطة لتتكاثر. في المقابل ، تبقى الخلايا غير السرطانية في موقع الحقن. في بروتوكول المثال ، سنقوم بحقن خلايا سرطان الثدي في الفضاء المحيطي وقناة Cuvier في نماذج xenograft لأسماك الزرد لدراسة ورم خبيث.

لتصور ورم خبيث ، باستخدام ماصة باستور ، انقل جنين سمك الزرد المحقون إلى طبق بوليسترين زجاجي القاع وقم بإزالة ماء البيض الزائد. قم بتصوير جسم الجنين بالكامل باستخدام مجهر متحد البؤر تم ضبطه على تكبير منخفض للحصول على نمط عام لانتشار الخلايا السرطانية.

استخدم ليزر 488 نانومتر لتصور الأوعية الدموية لجنين الزرد وليزر 543 نانومتر لتصور الخلايا السرطانية المزروعة المسماة بعلامة فلورية حمراء. بعد ذلك ، قم بمسح الجنين في ثماني إلى عشر خطوات للحصول على صورة عالية الجودة.

• Zebrafish Embryo Xenografts - A research tool used to study cancer cell invasion.
• Perivitelline Space - A niche between the zebrafish embryo periderm and the yolk sac.
• Metastatic Cancer Cells - Malignant cells that can spread aggressively and invade lots areas .
• Non-cancerous Cells - Stable cells that do not invade or proliferate like cancer cells.
• Invasiveness - The capacity of cancer cells to infiltrate healthy tissues.

• Define the concept of Zebrafish Embryo Xenografts - These are used for studying cancer invasion (e.g., invasiveness).
• Outline the Perivitelline Space - It serves as the injection site for xenografts (e.g., perivitelline space zebrafish).
• Describe Metastatic Cancer Cells and their aggressive division and invasion traits.
• Connect to Experiment - The injected metastatic and non-cancerous cells in embryos facilitate the investigation of cellular behaviors.

• What is Zebrafish Embryo Xenografts and how it aids in studying cell invasiveness?
• What is the role of Perivitelline Space in these xenograft models?
• What difference in behavior can be expected between Metastatic Cancer Cells and Non-cancerous Cells?

• Practical Applications - Xenografts help in understanding cancer cell behaviors (e.g., invasiveness).
• Industry Impact - Such studies can guide developments in healthcare and cancer research.
• Societal Importance - Findings may result in better cancer treatments (e.g., combating malignancy).
• Scientific Advances -The methodology aids in real-time tracking of cell actions.