حقن وريد الذيل: طريقة لإدارة الخلايا السرطانية للدراسات النقيلية في نموذج الفأر

ابدأ بإضافة التربسين إلى طبق بتري يحتوي على خلايا سرطان الثدي المصنفة لفصلها عن السطح. أضف وسيطا يحتوي على مصل لإيقاف عمل التربسين. انقل تعليق الخلية إلى أنبوب مخروطي الشكل وقم بطرده المركزي إلى خلية الحبيبات.

تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق الخلايا في محلول ملحي مخزن بالفوسفات. ضع الأنبوب على الجليد لإبطاء عملية التمثيل الغذائي للخلايا. قم بتحميل تعليق الخلية هذا الذي يحتوي على الكمية المطلوبة من الخلايا في حقنة قفل Luer وقم بتثبيت إبرة عليه.

ضع الفأر في مصفاة القوارض مع ذيله بالخارج. اغمس الذيل في ماء دافئ لتوسيع الأوردة. يوجد وريدان على الجانبين الجانبيين وشرايان على الجانب البطني من الذيل. امسح الذيل بالكحول ، وأدخل الإبرة ، وحقن معلق الخلية.

بمجرد دخولها إلى مجرى الدم ، تغزو الخلايا السرطانية المحقونة الأعضاء ، مثل الرئتين ، وتتكاثر. قم بإزالة الإبرة ببطء واستخدم شاشا معقما في موقع الحقن للضغط لوقف النزيف. أعد الماوس إلى قفصه وتأكد من الشفاء التام. في البروتوكول التالي ، نوضح حقن الخلايا السرطانية النقيلية المسماة في نموذج الفأر لتحديد ورم خبيث لسرطان الثدي واستعماره.

استنشق الوسائط واشطف ألواح الخلايا باستخدام 1X PBS. قم بتربسين الخلايا ب 5 ملليلتر من التربسين لكل صفيحة طولها 15 سم لمدة دقيقتين إلى خمس دقائق وانقل جميع الخلايا إلى أنبوب مخروطي الشكل. اغسل الخلايا المتبقية م