الزراعة المشتركة ثلاثية الأبعاد لخلايا سرطان الرئة مع CAFs: نظام نموذج في المختبر لدراسة تطور الورم
موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:36 دقيقة • April 30th, 2023
- في الثقافات المشتركة ثلاثية الأبعاد ، تزرع أنواع متعددة من الخلايا معا في مصفوفات مثل مصفوفة الغشاء القاعدي ، والتي تحاكي البيئة المكروية الطبيعية للمصفوفة خارج الخلية ، مما يسهل تفاعلات الخلية والخلية والمصفوفة. لإنشاء ثقافة مشتركة ثلاثية الأبعاد مدمجة ، قم بإعداد تعليق موحد للأرومات الليفية المرتبطة بالسرطان أو CAFs وخلايا سرطان الرئة المأخوذة في قسمين بنسبة واحدة ، في مصفوفة الغشاء القاعدي. حافظ على التعليق على الجليد لمنع تصلب المصفوفة في درجات الحرارة المحيطة.
انقل حجما مناسبا من التعليق إلى لوحة زراعة الخلايا. احتضان عند 37 درجة مئوية للمدة المطلوبة لتضمين الخلايا في المصفوفة. لإنشاء ثقافة مشتركة ثلاثية الأبعاد متراكبة ، قم بإعداد تعليق لخلايا سرطان الرئة في مصفوفة الغشاء القاعدي ، بكثافة الخلية المطلوبة. حافظ على التعليق على الجليد. الماصة حجم مناسب من تعليق مصفوفة الخلية هذا في لوحة زراعة الخلية. احتضان عند 37 درجة مئوية لإعداد الزراعة الأحادية للخلايا السرطانية المدمجة.
بعد ذلك ، قم بنقل الحجم المطلوب من CAFs المعلقة في وسائط الثقافة المفضلة ، فوق الخلايا السرطانية المدمجة. في الثقافات المشتركة ثلاثية الأبعاد ، تعزز CAFs تكوين الخلايا الكروية للخلايا السرطانية وتجذب الخلايا السرطانية ، مما يؤدي إلى هياكل تشبه الدموع. في هذا البروتوكول ، سنقوم بالزراعة المشتركة لخلايا سرط
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية