فحص الطعم الزينوغرافي لسمك الزرد: طريقة لتقييم فعالية العلاجات المضادة للسرطان على الأورام في أسماك الزرد في الجسم الحي

- أولا ، ضع البيض في طبق بتري ، وأضف محلول دانيو للحفاظ على البيض الذي تم جمعه حديثا. أضف فينيل ثيوريا لتثبيط التصبغ واحتضانه لبضعة أيام. بعد الحضانة ، قم بإزالة الأجنة باستخدام ملقط حاد واتركها تنمو أكثر.

بعد ذلك ، قم بزرع العدد المطلوب من الخلايا السرطانية في قارورة مزرعة واحتضانها طوال الليل. أضف الآن مركبات مضادة للسرطان واحتضن أكثر. بعد الحضانة ، أضف صبغة تعقب الخلايا الفلورية ، والتي سترتبط بغشاء الخلية وتلطخ الخلايا.

بعد ذلك ، أضف التربسين لتفكك الخلايا وقم بتخفيف الخلايا في محلول PBS الأحمر الفينول قبل إجراء تقييم درجة الحموضة. قم بتركيب أجنة الزرد المخدرة على صفيحة أجار. الآن قم بتحميل الشعيرات الدموية الدقيقة بتعليق الخلايا السرطانية وحقنها في كيس صفار الأجنة.

انقل الأجنة إلى ألواح الاستزراع التي تحتوي على محلول دانيو واحتضانها أكثر. بعد ذلك ، انقل بعض الأجنة على شريحة زجاجية وأضف ميثيل السليلوز لشل حركتها. ضع الشريحة تحت المجهر الفلوري وحدد حجم الورم باستخدام البرنامج.

عادة ما تمنع المركبات المضادة للسرطان قدرة الخلايا السرطانية على تكوين الورم. في البروتوكول التالي ، سوف ندرس تأثير هيدروكسي كومارين ، جنبا إلى جنب مع BH3 المقلد ، على تكوين الورم في أسماك الزرد في الجسم الحي.

- بعد بذر خلايا A549 واحتضانها بالمركبات وفقا لبروتوكول النص ، قبل 24 ساعة من نهاية العلاج ، أضف