تقطير الرئة وتثبيتها: إدخال سائل في القصبة الهوائية وتثبيت الرئتين لقياس حجم الرئة الثابت

- يستخدم تقطير الرئة لإدخال مادة مباشرة في القصبة الهوائية لتحليل رئتي الفئران المصابة بالسرطان أو أمراض أخرى. أولا ، ضع فأرة مخدرة على منصة تنبيب منحدر واحلق الشعر على الرقبة. قم بعمل شق صغير بمقص أسفل الرقبة واسحب الجلد برفق باستخدام ملقط للكشف عن القصبة الهوائية. أدخل قسطرة في القصبة الهوائية من خلال الفم وراقبها من خلال شق. حقن سائل نموذجي في القصبة الهوائية ونفخ الرئتين بسرعة عن طريق إدخال الهواء بحقنة فارغة لتوزيع السائل بشكل صحيح.

أغلق الجرح وضع الماوس في غرفة الاسترداد. بعد الفترة المرغوبة ، ضحي بالفأر وفضح الرئتين. تضخيمه بالمثبت لتحديد سعة الرئة الإجمالية. ضع الرئتين في أنبوب به مثبت. قم بقياس حجم الرئة الثابت باستخدام مبدأ أرخميدس. ضع الرئتين في الماء واضغط عليها بجهاز سلكي. لاحظ وزن الماء الذي تزاحده الرئتان المغمورة. عادة ما يكون جزء حجم الرئة في الرئة اليسرى الثابتة أصغر من الجزء المقاس في الجسم الحي.

- قبل البدء في الإجراء ، قم بثني طرف قنية وريدية تجارية بطول 1 بوصة قياس 20 يدويا في منحنى طفيف. ثم بعد تأكيد التخدير بسبب عدم الاستجابة لقرصة إصبع القدم ، ضع المرهم على عيون الفأر البالغ وقم بتأمين الماوس في وضع ضعيف على منصة مائلة مع رابط مكتبي كبير وحلقات خياطة. احلق الجزء البطني من الرقبة وقم بتطهير الجلد بالكحول بنسبة 70٪. ثم باستخدام مقص حاد ، قم بعمل شق جراحي صغير في الرقبة ، حوالي 12 ملم تحت الجزء السفلي.

بعد ذلك ، استخدم الملقط لسحب الجلد برفق في الرقبة بالذيلي حتى يمكن رؤية الجدار البطني للقصبة الهوائية. ثم اسحب اللسان برفق وأدخل القنية مع إمالة الطرف المنحني نحو السطح البطني للماوس. اسحب جلد الرقبة برفق مرة أخرى كما هو موضح للتو ، أدخل القنية في القصبة الهوائية. عندما يمكن ملاحظة القسطرة في القصبة الهوائية ، تقدم القسطرة حوالي 5 ملليمترات لتمرير الحبال الصوتية.

الآن ضع طرف ماصة تحميل الهلام المحملة ب 50 ميكرولترا من التقطير في المحور السفلي للقسطرة. تأكد من حركة السائل في الطرف المتزامن مع تنفس الماوس ، ثم قم بحقن التقطير. باستخدام حقنة سعة 1 مليلتر ، قم بنفخ الرئتين على الفور ب 0.6 مل من الهواء عبر القسطرة للمساعدة في توزيع السائل في عمق الرئتين ، ثم قم بإزالة القنية. أغلق الجرح الجراحي بكمية صغيرة من مادة لاصقة سيانواكريليت وضع الفأر في قفص فردي مع المراقبة حتى يتعافى تماما.

بعد النقطة الزمنية التجريبية النهائية ، قم بعمل قطع صغير في عنق لكشف الجانب البطني من القصبة الهوائية. ثم أدخل طرف إبرة كعب قياس 18 في القصبة الهوائية. باستخدام الخيط ، اربط الإبرة في القصبة الهوائية وافتح الصدر بعناية بشق خط الوسط. ثم قم بقطع الحجاب الحاجز وإزالة جدران الصدر الجانبية لكشف الرئة. بعد ذلك ، تأكد من عدم وجود هواء في أنبوب التثبيت عن طريق تشغيل الفورمالديهايد في نهاية محبس. ثم قم بتوصيل خزان الفورمالين والأنبوب المملوء مباشرة بالطرف السفلي من إبرة فغر القصبة الهوائية.

اضبط السطح العلوي للفورمالديهايد على ارتفاع 25 سم فوق مستوى الفم وافتح محبس القرص لتضخيم الرئتين بمثبت. بعد ترك الرئتين تحت الضغط لمدة 20 دقيقة على الأقل ، اسحب الإبرة ببطء لكشف المزيد من القصبة الهوائية غير المقلوبة أثناء ربط القصبة الهوائية بعد نهاية إبرة كعب الروتين. عندما يتم ربط القصبة الهوائية بإحكام ، قم بإزالة محبس التثبيت وتشريح الرئتين بعناية. ثم ضع الرئتين في الفورمالديهايد طوال الليل.

هنا ، يتم عرض جهاز نموذجي لتثبيت الرئتين في مكانهما أثناء حجم الرئة الثابت المصنوع من ماصات بلاستيكية وسلك رفيع قياس 20. لقياس حجم الرئة الثابت ، قم أولا بتشريح القلب وأي أنسجة أخرى غير رئوية من الرئتين. بعد ذلك ، ضع دكوبا يحتوي على ما يقرب من 200 مل من الماء المزود بجهاز دعم سلكي على ميزان وقم بتفريغ الجهاز.

ثم قم بإزالة الجهاز ، ضع الرئة على سطح الماء واستخدم الجهاز للضغط على الأنسجة الموجودة تحت الماء مع الحرص على عدم لمس الرئة أو الخيط أو أي جزء من الجهاز جوانب أو أسفل الدورق سجل الوزن على الميزان. يعكس هذا الرقم حجم الماء النازح وبالتالي فهو مقياس مباشر لحجم الرئة. ثم جفف الرئة على ممسحة ، وقم بتفريغ الدورق بالجهاز مرة أخرى ، وكرر قياس حجم الرئة. يجب بعد ذلك حساب متوسط قياسي الحجم.