الحفاظ على أنسجة البارافين المدمجة بالفورمالين (FFPE): طريقة لدراسة مورفولوجيا الأنسجة
موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:17 دقيقة • April 30th, 2023
- أولا ، ضع شريحة مناديل على ورق ترشيح مبلل ب PBS لمنع انكماش الخلية أو تورمها عن طريق موازنة الأسمولية. انقل الأنسجة إلى شريط هيستو. أغلق الكاسيت وضعه في محلول فورمالين محايد مخزن مؤقت. يحتوي NBF على الفورمالديهايد الذي يرتبط بالمجموعات الأمينية من الأحماض الأمينية ويمنع تكوين حمض الفورميك الذي يصطباغ الأنسجة. اترك الكاسيت طوال الليل عند درجة حرارة منخفضة ، مما يمنع تدهور الحمض النووي ويصلح الأنسجة. جفف الأنسجة بغسلات متعددة من الكحول.
ضعه في البارافين السائل واضغط عليه لأسفل حتى قاع القالب. قم بإزالة الوزن وضع الجزء السفلي من كاسيت النوسجي على المنديل. صب البارافين السائل على التجميع. اسمح للإعداد بالتصلب على طبق بارد. البارافين غير قابل للذوبان في الماء ، وبعد دخوله الأنسجة المجففة يتصلب ويساعد في التقسيم. انقل كتلة الأنسجة على ميكروتوم. قص وجمع أجزاء رقيقة من الأنسجة على شريحة. إذا كان القسم سميكا جدا ، فلا يمكن أن ينتشر الأكسجين والعناصر الغذائية الأخرى عبر الشريحة مما يخلق تدرجا نابسا للنخر الكاذب. إذا كان القسم رقيقا جدا ، فإنه يميل إلى التجعيد. يفحص فيديو البروتوكول تعبير المؤشرات الحيوية وقابلية الخلية للحياة من أنسجة FFPE لسرطان الرئة.
- لبدء تثبيت الشريحة المرغوبة ، انقلها بعناية باستخدام ملقط إلى صفيحة بحجم 10 سم تحتوي على ورق ترشيح مبلل مملوء ب 2 إلى 3 ملليلتر PBS واتر
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية