تطعيم جزر البنكرياس: طريقة لزرع جزر البنكرياس في الغرفة الأمامية لعين الفأر للتصوير في الجسم الحي

- تحتوي جزر البنكرياس على خلايا بيتا تفرز الأنسولين. في مرضى السكري من النوع 1 ، تصبح خلايا بيتا التي تصنع الأنسولين مختلة. يوفر زرع الجزر الصغيرة في هؤلاء المرضى إمكانية توفير التحكم في نسبة السكر في الدم. لتقييم كفاءة الزرع ، نستخدم نماذج حيوانية مثل الفأر الذي تعد غرفة العين الأمامية موقعا مثاليا للتطعيم والتصوير في الجسم الحي.

لزرع الجزر ، ضع فأرا مخدرا على وسادة تدفئة دافئة وحقن البوبرينورفين ، وهو مسكن لتخفيف الألم ، تحت الجلد في الجزء الخلفي من الفأر. بعد ذلك ، أدخل أنف الفأر في قناع الأنف للحصول على إمداد مستمر بالأكسجين والأيزوفلوران المخدر.

ثبت رأس الماوس في حامل الرأس لكشف العين وسحب الجفن برفق باستخدام ملقط غير حاد لإخراج العين. قم بتحميل قنية بجزر صغيرة تحمل علامة الفلورسنت. أدخل نصف طرف القنية في القرنية. ارفع القرنية ، وقم بتوزيع الجزر برفق ، وإزالة القنية ، ووضع جل العين.

بعد المدة المطلوبة ، ضع الماوس تحت مجهر ثنائي الفوتون والتقط الصور. قد تلاحظ الأوعية الدموية التي تشكل شبكة الأوعية الدموية الدقيقة في جميع أنحاء الكسب غير المشروع. في البروتوكول التالي ، سنقوم بإجراء تطعيم جزيرة البنكرياس البشرية في غرفة العين الأمامية للفأر.

للبدء ، ضع الماوس على وسادة تسخين دافئة ، وضعه في حامل الرأس ، وارتد قناع الأنف. استخدم الإبهام والسبابة لرفع الرأس قليلا. اربطه بالقطع المعدنية على الجانبين ، مع التأكد من أن سماعات الأذن تثبت الرأس أسفل الأذنين مباشرة. تحت الجلد ، قم بحقن محلول البوبرينورفين في الجزء الخلفي من الفأر. بلطف ، اسحب جفون العين المراد زراعتها باستخدام ملقط حاد. اخرج العين وثبتها بشكل فضفاض باستخدام زوج من الملقط المغطى بأنبوب بوليثين.

بعد نقل الجزر إلى طبق بتري مع PBS ، التقط ما يقرب من 20 إلى 30 جزيرة صغيرة في قنية العين. باستخدام إبرة قياس 25 ، قم بشطبها لأعلى ، وأدخل الطرف بعناية في القرنية وقم بعمل شق جانبي واحد. ارفع القرنية بحذر باستخدام القنية المحملة مسبقا بالجزر الصغيرة وحرر الجزر ببطء في العين. اسحب القنية ببطء وضع جل العين على العين.

بعد 10 دقائق ، قم بإزالة الملقط الذي يحمل الجفن وأعد العين إلى وضعها الطبيعي. لتصوير الجزر البشرية المزروعة باستخدام الفحص المجهري ثنائي الفوتون ، ضع منصة حامل الرأس تحت المجهر وقم بإعطاء جل العين على العين كسائل غمر بين القرنية والعدسة. ضع العين تحت الهدف وصور الجزر البشرية المزروعة كما هو موضح في المخطوطة النصية.