تحفيز الخلايا التائية خارج الجسم الحي في ورم البنكرياس: طريقة لزيادة إنتاج السيتوكين في الخلايا التائية

- تنتقل الخلايا التائية المنشطة إلى البيئة المكروية لورم البنكرياس ، حيث تطلق السيتوكينات مثل الإنترفيرون جاما ، أو IFN جاما ، وعامل نخر الورم - ألفا ، أو TNF alpha ، مما يساعد على التوسط في استجابة فعالة مضادة للأورام. عندما تتحرك السيتوكينات بسرعة خارج الخلية التائية ، يمكن أن تكون المستويات داخل الخلايا غير قابلة للاكتشاف. لذلك ، تتطلب الخلية التائية تحفيزا لزيادة إنتاج السيتوكين القاعدي لدراسة دورها العلاجي في الورم.

ابدأ بأخذ معلق الخلايا السرطانية من بنكرياس الفأر. الآن ، عالج الخلايا التائية الموجودة في تعليق الخلية بكوكتيل تحفيز السيتوكين واحتضان المزيج للوقت المطلوب. يسهل هذا الكوكتيل إطلاق أيونات الكالسيوم من الشبكة الإندوبلازمية إلى السيتوبلازم. مستويات الكالسيوم المرتفعة ، بدورها ، تنشط بعض عوامل النسخ النووي ، مما يؤدي إلى زيادة إنتاج السيتوكين في الخلايا التائية.

بعد ذلك ، عالج الخلايا بكوكتيل مثبط نقل البروتين واحتضان الأنبوب. يمنع هذا الكوكتيل نقل السيتوكين من الشبكة الإندوبلازمية إلى مركب جولجي ، مما يؤدي إلى تراكم السيتوكينات داخل الخلية. أخيرا ، قم بتلطيخ الخلايا باستخدام علامات مناسبة داخل الخلايا لتحليل قياس التدفق الخلوي. في البروتوكول التالي ، سنقوم بتحفيز الخلايا التائية لزيادة تركيز السيتوكينات داخل الخلايا.

- للبدء ، استخدم الملقط لنقل الورم إلى طبق بتري.