JoVE Encyclopedia of Experiments
أبحاث السرطان
0 مشاهدات • 3:50 د • April 30th, 2023
- التثقيب الكهربائي الذي لا رجعة فيه أو IRE هو تقنية لاستئصال أورام البنكرياس عن طريق إعطاء نبضات قصيرة عالية الجهد من التيار الكهربائي للورم ، مما يتسبب في تلف دائم للخلايا السرطانية. يتميز IRE بانتقائية عالية وإمكانية الوصول لمنطقة الورم المستهدفة. لا يسبب أضرارا ناتجة عن الحرارة للخلايا السليمة القريبة ، مما يجعله علاجا واعدا مضادا للأورام.
ابدأ بوضع فأر مخدر على الجانب وقم بتشريح تجويف البطن لتحديد موقع الورم على سطح البنكرياس. بعد ذلك ، استخدم الأقطاب الكهربائية ، ووضع موقع الورم بين قوسين ، وقم بإدارة نبضات مستهدفة من التيار الكهربائي للمدة الزمنية المطلوبة. يتسبب التيار الكهربائي الذي يتجاوز عتبة معينة في حدوث مسام دائمة في غشاء الخلية للخلايا السرطانية ، مما يمنع الخلية من العودة إلى حالة التوازن.
تتسبب هذه المسام في خروج محتويات الخلية داخل الخلايا ، مما يؤدي إلى موت الخلايا التدريجي عن طريق موت الخلايا المبرمج. الآن ، أغلق تجويف البطن واترك الفأر للتعافي في قفص المنزل. أخيرا ، راقب البنكرياس بحثا عن انخفاض حجم الورم ، بعد التثقيب الكهربائي. في البروتوكول التالي ، سنوضح طريقة لإجراء التثقيب الكهربائي الذي لا رجعة فيه لتعطيل أورام البنكرياس لدى الفئران.
- قبل أن يصل قطر الورم إلى 6 ملليمترات ، ضع المخدر على جانبه الأيمن للسماح بالوصول إلى الورم واستخدم المقص ومسحة الكحول لتنظيف موقع الورم. باستخدام الملقط ، ارفع الجلد مباشرة تحت الورم وأدخل قطبين كهربائيين من مصفوفة الإبرة عبر الجلد ، بالتوازي مع الجسم لوضع الورم بين قوسين ، مع الحرص على عدم اختراق الأقطاب الكهربائية للتجويف البريتوني.
اضبط المثقور الكهربائي لتوصيل نبضات 100 ميكروثانية ، بتردد 1 هرتز ، عند 1,500 فولت لكل سنتيمتر ليصبح المجموع 150 نبضة واستخدم دواسة القدم لتوصيل النبضات ، وفصل كل مجموعة من 10 نبضات بمقدار 10 ثوان للسماح بتبديد الحرارة بين كل مجموعة من النبضات.
- نظرا لأن ارتعاش العضلات يحدث أثناء تسليم IRE ويكون أكثر وضوحا أثناء المجموعة الأولية من النبضات ، تأكد من أن الأقطاب الكهربائية لا تزال في المكان المطلوب وأن لا يزال مخدرا بعد كل مجموعة من النبضات.
- بعد ما لا يزيد عن 200 ثانية من الجرعات ، قم بإزالة الأقطاب الكهربائية وسجل الجهد الفعلي الذي يتم توصيله كما هو موضح على المثقاب الكهربائي. ثم أعد الماوس إلى قفصه. بالنسبة للورم التقويمي ، بعد 8 إلى 10 أيام من زرع الورم ، استخدم ملقطا غير حاد للأنف لإخراج الورم بالملقط ، والتقط الورم بإحكام باستخدام الأقطاب الكهربائية البلاتينية للملقط.
قم بتوصيل نبضات التثقيب الكهربائي كما هو موضح للتو ، مع الحفاظ على الورم خارجيا لآخر مجموعة من النبضات لمدة 60 ثانية على الأقل لمراقبة أي علامات للنزيف. بعد ذلك ، أعد الورم إلى تجويف البطن وأغلق الشق كما هو موضح ، وراقب حتى يتعافى تماما.