نموذج الفأر التقويمي الفلوري: زرع الخلايا السرطانية الفلورية في الفأر لتقييم تطور الورم في الجسم الحي

- تتيح الخلايا السرطانية التي تعبر عن بروتين الفلورسنت الأخضر أو GFP مراقبة نمو الورم والورم الخبيث عن طريق التصوير البصري غير الجراحي. عادة ما نقوم بزرع هذه الخلايا في نموذج تقويم العظام ، والذي يسمح بإعادة إنشاء البيئة المكروية للورم ويحاكي تفاعل الخلايا السرطانية مع محيطها.

ابدأ بوضع فأر مخدر على وسادة تسخين دافئة. الآن ، أدخل أنفه في قناع الأنف لتزويد الأكسجين والأيزوفلوران ، وهو مخدر. باستخدام مقص ، قم بعمل شق صغير وقطع الأنسجة. اسحب الطحال برفق مع البنكرياس وحدد موقع ذيل البنكرياس.

قم بتحميل حقنة بتعليق الخلايا السرطانية الفلورية وحقنها برفق في ذيل البنكرياس. تظهر فقاعة سطحية في موقع الحقن تؤكد نجاح عملية الزرع. ضع الأعضاء مرة أخرى في تجويف الجسم واستخدم خياطة معقمة لإغلاق الشق. الآن ، أعد الماوس إلى قفص وراقبه حتى التعافي.

بعد المدة المطلوبة ، ضع الماوس في غرفة التصوير والتقط الصور. يضرب شعاع الضوء الخلايا السرطانية ويثير GFP ، والذي بدوره ينتج مضان أخضر. في البروتوكول التالي ، سنقوم بإجراء عملية زرع جراحية لخلايا سرطان البنكرياس التي تعبر عن GFP في نموذج فأر الفئران التقويمي.

لزرع الخلايا ، أولا ، ضع مرهما على عيون الفأر المخدر وضع على وسادة تدفئة مغطاة بستارة معقمة. بعد ذلك ، قم بتطهير جناح برفق بثلاثة مقشرات من اليود متبوعة بثلاث شطفات من الإيثانول بنسبة 70٪. بعد التأكد م