مقايسة تكوين الكرة: طريقة في المختبر لتحديد الخلايا الجذعية لسرطان البنكرياس وعلاجات الفحص
موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:09 دقيقة • April 30th, 2023
- يحتوي السرطان الغدي الأقنوي البنكرياس (PDAC) على مجموعة فرعية من الخلايا الجذعية السرطانية السرطانية السرطانية المنشأة للأورام حصريا (CSC). الخلايا الجذعية السرطانية متجددة ذاتيا ومتعددة القدرات وقادرة على تكوين الأورام. إنها تعبر عن البروتينات المضادة لموت الخلايا المبرمج وتحتوي أيضا على جينات مقاومة للأدوية المتعددة ، مما يجعلها مقاومة للعلاج الكيميائي. لتحديد الخلايا الجذعية السرطانية ودراسة تأثير الأدوية عليها ، نقوم بإجراء فحص تكوين الكرة.
أولا ، قم بتعليق الخلايا الجذعية السرطانية المستخرجة في وسط زراعة الخلايا المطلوب. بعد ذلك ، قم بزرع معلق الخلية في صفيحة متعددة الآبار واحتضانها للمدة المطلوبة. أضف الكمية المطلوبة من الدواء ذي الأهمية إلى عدد قليل من الآبار والدواء الوهمي في الآبار الأخرى كتحكم سلبي. احتضان الخلايا للمدة المطلوبة. تشكل الخلايا الجذعية السرطانية مستعمرات على شكل كرة تحت بيئة مزرعة غير ملتصقة.
بعد الحضانة، ضع الماصة كمية صغيرة من تعليق الخلية على مقياس كثافة الدم وضعها في عداد خلوي آلي. الآن ، احسب عدد الكرات المتكونة. عادة ما تظهر الخلايا المعالجة بالأدوية انخفاضا كبيرا في حجم وعدد المجالات. في البروتوكول التالي ، سنقوم بإجراء اختبار تكوين الكرة لتحديد الخلايا الجذعية لسرطان البنكرياس وتقييم تأثير الميتفورمين.
- لتسهيل تكوين مجال الورم لتخصيب الخلايا الجذ
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية