موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 6:26 دقيقة • April 30th, 2023
- في غزو الورم ، تخضع الخلايا السرطانية المحيطية لانتقال ظهاري إلى لحمة متوسطة أو EMT ، مما يؤدي إلى تدهور موضعي للمصفوفة خارج الخلية أو ECM. يمكننا دراسة تفاعل الخلايا السرطانية مع ECM في المختبر.
لدراسة هذه التفاعلات ، قم بنقل كروي مشكل مسبقا مشتق من خلايا ورم البنكرياس إلى صفيحة تحتوي على سقالة كولاجين جنبا إلى جنب مع مجسات تتبع الفلورسنت المدمجة ووسائط الاستزراع. يطلق الورم الكروي البروتياز ، الذي يتحلل الكولاجين ويقلل من صلابة ECM ، مما يؤدي إلى حرية حركة مجسات التتبع في ECM.
احتضان اللوحة للمدة الزمنية المطلوبة. راقب العينة تحت المجهر الضوئي لإلقاء نظرة على شبكة نقاط العينة في سقالة الكولاجين وتسجيل بيانات الفيديو منها. تظهر منطقة المصفوفة بالقرب من الكرة أقصى قدر من تدهور الكولاجين. لذلك ، فقد زادت من حركة المسبار. في المقابل ، تظهر المنطقة البعيدة عن الكرة تدهورا أقل للكولاجين ، مما يؤدي إلى تقييد حركة جزيئات المسبار.
تعرفتقنية فحص الخصائص الريولوجية ل ECM عن طريق قياس مسارات جسيمات التتبع باسم علم الريولوجيا الدقيقة لتتبع الجسيمات أو PTM. في البروتوكول التالي ، سنقوم بإجراء اختبار تكوين الكرة لتحديد الخلايا الجذعية لسرطان البنكرياس وتقييم تأثير الميتفورمين.
للبدء ، قم بإعداد محطة عمل داخل غطاء تدفق رقائقي مع قارورتين سعة 2 ملليلتر. ستحتوي القارورة 1 على كروي الورم ، وستكو
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية