موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:24 دقيقة • April 30th, 2023
- النقائل الدقيقة هي مجموعة صغيرة من الخلايا السرطانية التي تتساقط من ورم أولي وتنتشر إلى أجزاء مختلفة من الجسم عن طريق الدم أو الغدد الليمفاوية. للكشف عن النقائل الدقيقة ، قم بتعليق الخلايا العضوية لسرطان القولون والمستقيم في PBS للحفاظ على درجة الحموضة وتحميل تعليق الخلية في حقنة. بعد ذلك ، ضع فأر مخدر في وضع الانبطاح على سرير الجراحة. قم بعمل شق صغير باستخدام مقص في الجزء السفلي من الجناح الأيسر وفضح الطحال. اسحب الطحال برفق باستخدام الملقط وقم بحقن معلق الخلية ببطء في الطحال. أغلق الشق باستخدام الغرز وأعد إلى قفصه. راقبه حتى يتعافى.
بعد فترة الحقن المطلوبة ، ضحي بالفأر لتشريح الأورام الأولية والأنسجة المختلفة. راقب الأنسجة المقطوعة تحت المجهر الفلوري. تطور الخلايا السرطانية التي تعبر عن GFP ورما أوليا في الموقع المحقون في الطحال. تنتقل بعض الخلايا السرطانية من الورم الأولي إلى عضو مختلف ، عادة الكبد ، لتشكيل مستعمرات نقيلية دقيقة. في البروتوكول التالي ، سننشئ نموذجا تجريبيا للفأر النقائل للخلايا العضوية لسرطان القولون والمستقيم التي تعبر عن GFP.
- لإنشاء نموذج خبيث تجريبي لطعوم الورم الغريبة المشتقة من مريض CRC ، قم بتخفيف معلقات الخلايا السرطانية المفردة عند 4 أضعاف 10 إلى الخلايا الرابعة لكل تركيز 50 ميكرولتر وتحميل 50 ميكرولترا من الخلايا لكل فأر في حقنة مجهزة بإبرة قياس 22.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية