عزل CTC من عينة دم كاملة: طريقة للحصول على CTCs من نموذج سرطان القولون والمستقيم في الفئران
موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:50 دقيقة • April 30th, 2023
- الخلايا السرطانية المنتشرة ، أو CTCs ، هي الخلايا السرطانية التي تنبع من الورم الأساسي وتدخل الدورة الدموية. يمكن لمعظم الخلايا السرطانية للخلايا البقاء على قيد الحياة في مجرى الدم دون الالتصاق بالسطح. لذلك ، يمكننا اكتشافها مباشرة من دم معظم مرضى السرطان.
يمكن أن تشير الخلايا السرطانية السرطانية في الدم إلى انتشار الورم داخل الجسم ، وبالتالي فإن تحديدها يساعد في فهم تطور السرطان. ابدأ بأخذ نموذج فأر مخدر لسرطان القولون والمستقيم والحصول على الدم عن طريق ثقب القلب. انقل الدم إلى أنبوب مخروطي يحتوي على وسط تدرج الكثافة وجهاز طرد مركزي لفصل مكونات الدم.
تخلص من الطبقة العلوية التي تحتوي على البلازما واجمع جزء الخلية أحادية النواة في الدم المحيطي ، أو PBMC ، الموجود في الواجهة في أنبوب منفصل. بعد ذلك ، أضف الجسم المضاد ل EpCAM إلى خلايا PBMC وراقب تحت المجهر الفلوري. تعبر الخلايا الظهارية المتداولة عن علامة خلية تعرف باسم جزيء التصاق الخلايا الظهارية أو EpCAM. لذلك ، يمكن أن تساعد الأجسام المضادة ل EpCAM في تحديد CTCs الإيجابية ل EpCAM.
اجمع CTCs وقم بتخزينها لمزيد من التحليل النهائي. في البروتوكول التالي ، سنحدد CTCs التي تعبر عن EpCAM من جزء الخلية أحادية النواة المحيطية لدم نموذج فأر سرطان القولون والمستقيم.
- لعزل الخلايا السرطانية المنتشرة في نقطة النهاية التجريبية المناسبة ، ا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية