التشريح المجهري بالليزر: تقنية لعزل خلايا سرطان القولون والمستقيم الغازية من نموذج ثقافة النمط العضوي ثلاثي الأبعاد
موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:53 دقيقة • April 30th, 2023
- النماذج العضوية ثلاثية الأبعاد لسرطان القولون والمستقيم هي ثقافات في المختبر مصممة لتقليد البيئات المكروية للورم في الجسم الحي. غالبا ما تحتوي المزرعة على خلايا لحمية ، مثل الخلايا الليفية ، المزروعة بشكل مشترك مع الخلايا الظهارية لسرطان القولون والمستقيم ، في بيئة مكروية مصفوفة خارج الخلية مناسبة.
في الثقافات القائمة ، تغزو الخلايا السرطانية ذات الإمكانات النقيلية المصفوفة خارج الخلية. لعزل هذه الخلايا الغازية ، أولا ، عالج النموذج العضوي بالفورمالديهايد لإصلاح الخلايا والمصفوفة خارج الخلية. احتضان بالكحول لتجفيف العينة.
بعد ذلك ، قم بتضمينه في شمع البارافين السائل لتوليد كتلة الأنسجة. استخدم ميكروتوم فائق الصغر للحصول على أقسام مقطعة إلى شرائح رفيعة. قم بتركيب الأقسام على شريحة زجاجية مناسبة.
أضف الزيلين لإزالة الأقسام من الأقسام. بالتتابع ، احتضان الأقسام بتركيزات متناقصة من الإيثانول لإعادة ترطيب العينات.
عالج باستخدام Cresyl Violet لتلطيخ الخلايا السرطانية والمستقيمية وتمييزها عن البيئة الدقيقة. ضع شريحة الزجاج الملون ووجهها لأسفل على مرحلة المجهر. باستخدام البرامج المناسبة ، حدد الخلايا المراد تشريحها المجهرية وحدد الحدود. أطلق الليزر لقطع القسم المميز وجمع الجزء التشريح المجهري.
في البروتوكول التالي ، سنعرض عزل خلايا سرطان القولون والمستقيم عن نموذج الزراعة العضوية المشترك
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية