Name: الفأر الجنينية الثقافة الرئة ، وهو نظام لتقييم الآليات الجزيئية من التفرع (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-06-30T17:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: تعلم عزل وزراعة رئات الجرذان الجنينية لدراسة تفاعلات الظهارة والنسيج الوسطي. تُستخدم هذه التقنية لمراقبة النمو والتفرع استجابةً للمعالجات المحددة في علم الأحياء التنموي.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وأيد هذا العمل من قبل على جائزة بحوث سابان تمهيدي الدكتوراه معهد (PMDM) ، والمعاهد الوطنية للصحة RO1 HL75773 (DW)

ثقافة الجهاز هو تقنية مفيدة جدا وتنوعا لدراسة الجينات والتعبير البروتين. ويمكن استخدام هذه الثقافة الحية السابقين أساليب أولية أو مكملة لفي الدراسات المجراة. 1. عزل الرئة الجنينية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضحى توقيت الحامل الفئران يوم postcoitum 11.5 أو 12.5 (12.5 - E11.5) من الخدر CO 2 وفقا لمبادئ توجيهية والمعاهد الوطنية للصحة OLAW. يوضع الحيوان في غرفة وقدم 100 ٪ CO 2. بعد هذا الحيوان هو اللاوعي هو زيادة تدفق ثاني أكسيد الكربون 2. ويجب ضمان الموت السريري للحيوان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جميع الخطوات التالية يجب أن تكتمل في ظل ظروف معقمة في تدفق الصفحي هود. يتم إزالة الرحم من الإناث الحوامل. لإزالة الرحم من الحيوان ، ويتم وضع الإناث الحوامل على ظهورهم ورشها مع الايثانول 70 ٪. يتم إجراء شق في البطن ، ويتم إزالة الجلد عن طريق سحب الجلد صعودا في حين عقد ساقيه الخلفيتين الحيوان. فتح التجويف البريتوني ويتم إزالة الرحم من الحيوان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم شطف قبالة الدم عن طريق وضع الرحم في أنبوب مخروطي 50 مل مملوءة هانكس الباردة محلول الملح المتوازن (HBSS) ، وبلطف هزت الأنبوب لمدة 2 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم وضع الرحم في طبق بتري تحت المجهر مجسمة تشريح ، وأفرج عنه من الأجنة في الرحم عن طريق عمل قطع في جدار الرحم باستخدام مقص الربيع. ويتم حصاد الأجنة باستخدام ملعقة مثقوبة ، ووضعها على الجليد في طبق بتري جديدة تحتوي على HBSS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحت المجهر مجسمة تشريح ، يتم تشريح الرئتين الجنينية واحدا تلو الآخر في طبق بتري تحتوي HBSS الباردة (الشكل 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم وضع الرئة معزولة الجنينية على الجليد في طبق بتري تحتوي HBSS باستخدام ماصة نقل معقمة. </li></ol> 2. الجنينية الرئة الثقافة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يضاف 500 مليلتر microliters إلى 1 لكل بئر من D-MEM/F-12 تستكمل مع 50 وحدة / مل من البنسلين ، الستربتوميسين في صحن Nunclon البوليستيرين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم وضع المسار البولي Nuclepore - إحفر الغشائية على رأس وسائل الإعلام. عندما يتم وضع المسار البولي Nuclepore - إحفر الغشائية على رأس وسائل الإعلام ، تأكد من أن الجانب اللامع هو ضد وسائل الإعلام ، والوجه الخشن تواجه صعودا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم وضع الرئة تشريح الجنينية على قمة غشاء Nuclepore المسار - إحفر البولي باستخدام ماصة نقل معقمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم ضبط الموقف الرئة الجنينية باستخدام ملقط. وينبغي أن توضع على الرئة الجنينية مرشح لها سليمة والقصبة الهوائية وضعها مع القصبة الهوائية نظرهم فان وجود موقف مستقيم ، وبالتالي السماح لجميع الرئتين نفس الضغط الداخلي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم نقل طبق البوليستيرين Nunclon للمرة الثقافة المطلوبة في حاضنة الخلية (الشكل 2). </li></ol> 3. المواد 1. الجنينية عزل الرئة الجامعة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توقيت الحامل (C57BL6 نوع البرية أو المعدلة وراثيا) الفئران لا بد من التضحية في يوم postcoitum 11،5-13،5 (E11.5 - 13.5). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> هانكس "محلول الملح المتوازن (HBSS) (1X) والسائلة ، دون كلوريد الكالسيوم وكلوريد المغنيسيوم وكبريتات المغنيسيوم أو. (Invitrogen ، كارلسباد ، كاليفورنيا) تستكمل مع 50 وحدة / مل من البنسلين ، الستربتوميسين (Invitrogen ، كارلسباد ، كاليفورنيا). HBSS تخزين في درجة حرارة الغرفة وعند 4 درجات مئوية بعد الافتتاح. قسامة وتخزين البنسلين ، الستربتوميسين في -20 درجة مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مجهر تشريح مجسمة (لايكا ، يتزلا ، ألمانيا). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بما في ذلك أدوات تشريح ملقط دومون ، مقص القزحية الجميلة (على التوالي) ، نوييز مقص الربيع وموريا ® الملعقة (مثقب) (العلوم أدوات الجميلة ، فوستر سيتي ، كاليفورنيا). </li></ol> 2. الجنينية الثقافة الرئة الجامعة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Dulbecco في التعديل النسر متوسطة : مزيج من المغذيات F - 12 (D-MEM/F-12) (1X) ، السائل ، يحتوي 01:01 L - الجلوتامين ، ولكن لا HEPES العازلة. (Invitrogen ، كارلسباد ، كاليفورنيا) تستكمل مع 50 وحدة / مل من البنسلين ، الستربتوميسين (Invitrogen ، كارلسباد ، كاليفورنيا). إبقاء زجاجة DMEM/F-12 بعيدا عن الضوء (غطت مثلا رقائق الألومنيوم) وتخزينها في 4 درجات مئوية. قسامة وتخزين البنسلين ، الستربتوميسين في -20 درجة مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Nuclepore المسار البولي - إحفر الأغشية ، 8.0 متر ، 13mm (Whatman Nuclepore المسار - إحفر غشاء (Whatman ، Florham بارك ، نيو جيرسي). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Nunclon طبق البوليستيرين مع الأغطية ، و 4 آبار (روتشستر ، نيويورك). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ماصات نقل المتاح ، والعقيمة (فيشر العلمية ، بيتسبرغ ، بنسلفانيا). </li></ol><img src="/files/ftp_upload/2035/2035fig1.jpg" alt="الشكل 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="الشكل 1"> الشكل 1. تشريح E12 الرئتين الجنينية. (A) E12.5 الجنين كله ينظر إليها من الجانب الأيمن. (B) تمت إزالة forelimb الحق من جنين (C) الملقط الذي عقدته اليد اليسرى عقد الجنين المطرد في الطبق. السهام تشير خطة تشريح (D) الجنينية الرئة يكمن الخلفي للقلب (إزالة) والأمامية إلى العمود الفقري. هذا الرقم يدل على الرئتين بعد إزالة الجلد والقلب. (E) إزالة البلعوم يسمح الفصل بين رئة سليمة من الجنين. (F) قد قلصت أنسجة البلعوم والمريء الغريبة بعيدا. يظهر تشريح E12.5 الرئة الجنينية مع القصبة الهوائية والحنجرة سليمة. (الكروم) الفص القحف ، (ميد) الفص الإنسي ، (CA) الذيل الفص ، (ACC) الفص ملحقة ، (لو) الفص الأيسر. <img src="/files/ftp_upload/2035/2035fig2.jpg" alt="الشكل 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="الشكل 2"> الشكل 2. FGF9 يدفع التوسع في اللحمة المتوسطة واتساع الظهارة في الرئة المزروعة في المختبر. يزرع (AC) E12.5 الرئة لمدة 48 ساعة في غياب FGF9. ملاحظة الزيادة في المتفرعة (مدافع) E12.5 الرئة نمت لمدة 48 ساعة في حضور FGF9. لاحظ اتساع الظهارة واللحمة المتوسطة في أقرب وقت بعد 24 ساعة من ثقافة (E). بعد 48 ساعة (F) ، وأثر على ظهارة هو أكثر وضوحا. مقياس شريط : AF 400 ميكرومتر 4. بروتوكول النص الكامل لهذا النهج التجريبي هو متاح في <a href="http://springerprotocols.com/Abstract/doi/10.1007/978-1-59745-019-5_5">البروتوكولات سبرينغر</a> .

<ol><li>Alescio, T., Cassini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+in+vitro+of+tracheal+buds+by+pulmonary+mesenchyme+grafted+on+tracheal+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Zool%22%5BJournal%5D)">Induction in vitro of tracheal buds by pulmonary mesenchyme grafted on tracheal epithelium.</a> J Exp Zool. 150, 83-94 (1962).</li>
<li>Warburton, D., Schwarz, M., Tefft, D., Flores-Delgado, G., Anderson, K. D., Cardoso, W. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+of+lung+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Mech+Dev%22%5BJournal%5D)">The molecular basis of lung morphogenesis.</a> Mech Dev. 92, 55-81 (2000).</li>
<li>Spooner, B. S., Hardman, P., Paulsen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gravity+in+mammalian+organ+development%3A+differentiation+of+cultured+lung+and+pancreas+rudiments+during+spaceflight%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Zool%22%5BJournal%5D)">Gravity in mammalian organ development: differentiation of cultured lung and pancreas rudiments during spaceflight.</a> J Exp Zool. 269, 212-222 (1994).</li>
<li>Moral, del, M, P., De Langhe, S. P., Sala, F. G., Veltmaat, J. M., Tefft, D., Wang, K., Warburton, D., Bellusci, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+role+of+FGF9+on+epithelium+and+mesenchyme+in+mouse+embryonic+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Differential role of FGF9 on epithelium and mesenchyme in mouse embryonic lung.</a> Dev Biol. 293, 77-89 (2006).</li>
<li>Moral, D. el, M, P., Sala, F. G., Tefft, D., Shi, W., Keshet, E., Bellusci, S., Warburton, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGF-A+signaling+through+Flk-1+is+a+critical+facilitator+of+early+embryonic+lung+epithelial+to+endothelial+crosstalk+and+branching+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">VEGF-A signaling through Flk-1 is a critical facilitator of early embryonic lung epithelial to endothelial crosstalk and branching morphogenesis.</a> Dev Biol. 290, 177-188 (2006).</li>
<li>Jaskoll, T. F., Don-Wheeler, G., Johnson, R., Slavkin, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryonic+mouse+lung+morphogenesis+and+type+II+cytodifferentiation+in+serumless%2C+chemically+defined+medium+using+prolonged+in+vitro+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Differ%22%5BJournal%5D)">Embryonic mouse lung morphogenesis and type II cytodifferentiation in serumless, chemically defined medium using prolonged in vitro cultures.</a> Cell Differ. 24, 105-117 (1988).</li>
<li>Seth, R., Shum, L., Wu, F., Wuenschell, C., Hall, F. L., Slavkin, H. C., Warburton, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+epidermal+growth+factor+expression+in+early+mouse+embryo+lung+branching+morphogenesis+in+culture%3A+antisense+oligodeoxynucleotide+inhibitory+strategy%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Role of epidermal growth factor expression in early mouse embryo lung branching morphogenesis in culture: antisense oligodeoxynucleotide inhibitory strategy.</a> Dev Biol. 158, 555-559 (1993).</li>
</ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

الفأر الجنينية الثقافة الرئة ، وهو نظام لتقييم الآليات الجزيئية من التفرع

Mouse Embryonic Lung Culture, A System to Evaluate the Molecular Mechanisms of Branching

مواصفات الرئة البدائية فضلا عن التشكل المتفرعة ، وتشكيل خلية رئوية مختلفة الأنساب يتطلب التفاعل محددة من الأديم الباطن مع اللحمة المتوسطة الرئة المحيطة بها وميسوثيليوم. وقد تبين الرئة اللحمة المتوسطة لتكون مصدرا للإشارات الاستقرائي لالتشكل الرئة المتفرعة. الظهارية - الوسيطة - الظهارية التفاعلات هي أيضا حاسمة في التشكل الرئة الجنينية. في وقت مبكر جهاز الرئة الجنينية الثقافة هي نظام مفيدة جدا لدراسة التفاعلات الوسيطة - الظهارية. حصيلة كل من التشكل الظهارة والوسيطة في ظل ظروف محددة يمكن بسهولة التلاعب في هذا النظام (في غياب الأم وتأثير تدفق الدم). يمكن أن الأهم من ذلك أن هذه التقنية القيام به بسهولة في serumless وسائل الاعلام ثقافة محددة كيميائيا. ويمكن تحقيق الربح والخسارة من وظيفة باستخدام بروتينات المعبر عنها ، ناقلات فيروسية المؤتلف و / أو تحليل سلالات الماوس المعدلة وراثيا ، RNA العقاقير ، فضلا عن التدخل الجيني RNA ضربة قاضية.

في وقت مبكر جهاز الرئة الجنينية الثقافة هي نظام مفيدة جدا لدراسة التفاعلات الوسيطة - الظهارية. حصيلة كل من التشكل الظهارة والوسيطة في ظل ظروف محددة يمكن بسهولة التلاعب في هذا النظام.

يتطلب تحديد المواصفات الأولية للرئة، بالإضافة إلى التخلق التشعبي وتكوين مختلف السلالات الخلوية الرئوية، تفاعلاً محدداً لـ ...

يتم في هذا الفيديو عرض طريقة لتشريح واستزراع الرئات الجنينية للفئران. تبدأ العملية بجمع الأجنة في المرحلة E 11.5 أو E 12.5. بعد ذلك، يتم فتح الأجنة واستخراج الرئات.يتم بعد ذلك وضع الرئتين في واجهة سائلة هوائية وتحضينهما بعد الاستزراع. ويمكن ملاحظة التغيرات في نمو وتفرع الميزنشيمة والظهارة في الرئة الجنينية استجابةً لمعالجات محددة باستخدام مجهر ستيريو. مرحباً، أنا ديفيد وار بيرتون.أنا أدير برنامج علم الأحياء النمائي والطب التجديدي في مستشفى بن للأبحاث للأطفال في لوس أنجلوس. وأنا جان كارو، باحث ما بعد الدكتوراه في مختبر الدكتور وار بيرتون. سنعرض لكم اليوم تقنية لعزل رئة الجنين للفأر ووضعها في مستنبت عضوي.لقد تطورت هذه التقنية عن الوصف الأصلي الذي قدمته Tina Jaco Halkin وPablo bring us في كلية طب الأسنان بجامعة جنوب كاليفورنيا (USC School of Dentistry) منذ حوالي 20 عاماً. نحن نستخدم هذا الإجراء في مختبرنا لدراسة مورفولوجيا تفرع lamb. لذا، دعونا نبدأ.في اليوم 11.5 أو 12.5 بعد الإخصاب، ضع فأرة حامل تم التضحية بها في وقت محدد بواسطة ثاني أكسيد الكربون على ظهرها تحت غطاء تدفق صفائحي. رشها بـ 70% ethanol. قم بإجراء شق في البطن.بعد ذلك، وأثناء تثبيت الأرجل الخلفية للحيوان، قم بإزالة الجلد عن طريق سحبه للأعلى. افتح التجويف البريتوني واستخرج الرحم. ضع الرحم في أنبوب مخروطي سعة 50 milliliter مملوء بمحلول هانكس الملح المتوازن البارد أو HBSS، ثم قم بهزه بلطف لمدة دقيقتين لشطف الدم.بعد ذلك، يتم نقل الرحم إلى أطباق بتري تحت مجهر تشريحي ستيريوسكوبي. وباستخدام مقص زنبركي، يتم قطع جدار الرحم لتحرير الأجنة. ثم باستخدام ملعقة مثقبة، يتم جمع الأجنة ووضعها في طبق بتري يحتوي على HBSS ووضعها على الثلج.استمر في العمل تحت مجهر التشريح المجسم وابدأ في تشريح الرئتين الجنينيتين. ابدأ بوضع الجنين على جانبه الأيسر. وباستخدام الملاقط، قم بإزالة الطرف الأمامي الأيمن مع إمساك الملاقط باليد اليسرى.قم بقص الجنين بدءاً من فتحة الطرف وإزالة الجلد. ستسمح لك هذه الخطوة برؤية الأعضاء الداخلية وتحديد موقع القلب والرئتين للخطوة التالية. ثم قم بإزالة القلب.تقع الرئتان الجنينيتان خلف القلب وأمام العمود الفقري. بعد ذلك، افصل الرئة السليمة عن الجنين. ثم قم بإزالة الأنسجة الزائدة والمريء.بمجرد إزالة الرئتين، استخدم ماصة نقل معقمة لنقلهما إلى أطباق بتري تحتوي على محلول HBSS بارد على الثلج. أضف إلى كل بئر من أطباق البوليسترين من نوع no clone delta كمية تتراوح من 0.5 إلى 1 mL من وسط D-M-E-M-F 12 المدعم بـ 50 units/mL من البنسلين والستربتوميسين. بعد ذلك، ضع غشاء nucleo polycarbonate track etch فوق الوسط، بحيث يكون الجانب اللامع للأسفل والجانب الخشن للأعلى.باستخدام ماصة نقل معقمة، ضع رئة جنينية مشرحة فوق غشاء النوكليوبوليكربونيت المسامي (nucleo polycarbonate track etch membrane). وباستخدام المجهر الستيريوسكوبي، اضبط موضع الرئة الجنينية، بحيث تكون الرئة الجنينية ذات رغامي سليم وموضوع في وضع مستقيم كما هو موضح هنا.يضمن ذلك أن تكون جميع الرئات تحت نفس الضغط الداخلي، ثم انقل الطبق إلى حاضنة الخلايا وازرعها للمدة المطلوبة. هنا، تم تنمية رئات من الأجنة في اليوم 12.5 (E 12.5) بوجود أو غياب FGF nine. يُعد FGF nine عضواً في عائلة عامل نمو الخلايا الليفية الذي يحفز تمدد الميزنشيم واتساع الظهارة في الرئات المنماة مختبرياً بعد 48 ساعة.في حالة غياب FGF nine، يُلاحظ زيادة في التفرع. هذه الصور هي صور فوتوغرافية للرئة الجنينية تم التقاطها باستخدام مجهر ستيريو. وفي المقابل، فإن الرئات التي نمت لمدة 48 ساعة في وجود FGF nine أظهرت ظهارة متسعة وبنية شبكية.بعد 24 ساعة من الزراعة. وبعد 48 ساعة، يصبح التأثير على الظهارة أكثر وضوحاً. وبذلك نكون قد أوضحنا لكم كيفية تحضير مستنبتات عضوية من رئة جنين الفأر.عند تنفيذ هذا الإجراء، من المهم تذكر إزالة الرئة من الجنين في أسرع وقت ممكن للحد من تدهور الأنسجة. شكراً لكم على المشاهدة، ونأمل أن تجدوا هذه التقنية مفيدة.حظاً موفقاً في تجاربكم.

mouse-embryonic-lung-culture-system-to-evaluate-molecular-mechanisms

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

هنا ، نحن تصف بروتوكول للثقافة العزلة والفئران من خلايا بطانة الأوعية الدموية الرئوية. يضم هذا الأسلوب ميكانيكي والأنزيمية تفارق أنسجة الرئة ، فضلا عن عملية تنقية 2 - خطوة استخدام الألغام المضادة للPECAM - 1 ومعاداة ICAM - 2 الأضداد مترافق إلى حبات المغناطيسي ، والتي تنتج الخلايا البطانية نقية السكان من أصل الاوعية الدموية الدقيقة في معظمها.

العزلة والثقافة في الخلايا البطانية الرئوي من الفئران حديثي الولادة

القوات الميكانيكية تلعب دورا أساسيا في نمو الرئة وإصابة الرئة. هنا، نحن تصف وسيلة لعزل القوارض نوع رئة الجنين الخلايا الظهارية الثاني والخلايا الليفية، ويعرضهم لتحفيز الميكانيكية...

والنظام التجريبي لدراسة Mechanotransduction في خلايا رئة الجنين

نقدم في المختبر الماوس الجنين نظام الثقافة أرومة الحمراء الكبد أن يشرح المراحل المبكرة والمتأخرة من الكريات الحمر المحطة. هذا النظام يسهل التحليل الوظيفي للجينات محددة في مراحل النمو المختلفة.

الماوس الجنين الكبد نظام الثقافة لتشريح الهدف جين وظائف في المراحل المبكرة والمتأخرة من محطة الكريات الحمر

استخدام الفئران مراسل بالإضافة إلى جبل بأكمله وقسم التلوين، والفحص المجهري وفي المقايسات فيفو يسهل تحليل الآليات الكامنة والزخرفة طبيعية من الجهاز التنفسي. نحن هنا تصف كيف ساهمت هذه التقنيات لتحليل إشارات Wnt خلال تطوير القصبة الهوائية.

دراسة إشارات Wnt خلال الزخرفة من إجراء الخطوط الجوية

هذا البروتوكول توجه بكفاءة الماوس الجذعية الجنينية المستمدة من الخلايا الأديم الباطن نهائي لتنضج الهوائية الخلايا الظهارية. ويستخدم هذا الأسلوب التمايز 3-الأبعاد السقالات الرئة decellularized لتوجيه مواصفات النسب الرئة، في إطار ثقافة محددة، خالية من المصل.

جيل من خلايا الفأر مجرى الهواء طلائي المشتقة ESC عن طريق Decellularized الرئة السقالات

ويصف المقال خطوة الحكمة الموجهة التمايز من الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات إلى الأجهزة الرئوية الكاملة ثلاثية الأبعاد التي تحتوي على كل من خلايا الرئة الظهارية القريبة والقاصية جنبا إلى جنب مع mesenchyme.

جيل من 3D الجهازيات الرئة الكاملة من الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات لنمذجة البيولوجيا التنموية الرئة والمرض

يصف البروتوكول مفاعلا حيويا ممكنا للتصوير يسمح بالإزالة الانتقائية للظهارة الداخلية من القصبة الهوائية للفئران والتوزيع المتجانس للخلايا الخارجية على سطح التجويف ، يليه زراعة طويلة الأجل في المختبر لبناء أنسجة الخلية.

مفاعل حيوي موجه بالتصوير لتوليد أنسجة مجرى الهواء المهندسة بيولوجيا

يقدم البروتوكول طريقة لاشتقاق عضويات الرئة البشرية من أنسجة الرئة الأولية ، وتوسيع عضويات الرئة وحث التمايز القريب لتوليد عضويات مجرى الهواء 3D و 2D التي تنسخ بأمانة ظهارة مجرى الهواء البشري.

إنشاء عضويات الرئة البشرية والتمايز القريب لتوليد عضويات مجرى الهواء الناضجة

هنا ، نصف بروتوكولا بسيطا واقتصاديا لإجراء تقدير غير متحيز لكثافة الأوعية الدموية الدقيقة الرئوية لأنسجة رئة الفئران الكاملة باستخدام تلطيخ واحد من Isolectin B4.

قياس كثافة الأوعية الدموية الدقيقة الرئوية في الفئران عبر الفصيصات

نحن في هذا التقرير وصفا لطريقة لعزل وثقافة السلف المتخصصة الخلية من الكلى الماوس الجنينية التي يمكن استخدامها لدراسة مسارات الإشارات التي تنظم الجذعية / السلف خلايا الكلى النامية. هذه الخلايا المستزرعة متاحة للغاية لجزيء صغير من البروتين والمؤتلف العلاج ، وأيضا الأهم لتنبيغ الفيروسي ، والذي يسمح للتلاعب كفاءة الممرات مرشح.

العزلة والثقافة في خلايا كلوية المنشأ من منطقة من الفأر الجنينية الكلى

تعلم عزل وزراعة رئات الجرذان الجنينية لدراسة تفاعلات الظهارة والنسيج الوسطي. تُستخدم هذه التقنية لمراقبة النمو والتفرع استجابةً للمعالجات المحددة في علم الأحياء التنموي.

الفأر الجنينية الثقافة الرئة ، وهو نظام لتقييم الآليات الجزيئية من التفرع

استكشف المزيد من الفيديوهات