توليد إعادة بناء الجلد الكامل العضوي: إجراء لإنشاء نموذج جلدي ثلاثي الأبعاد باستخدام عينات من الجلد البشري

يتكون الجلد بشكل أساسي من طبقة بشرة علوية وطبقة جلدية سفلى. يتم تقسيم خلايا البشرة إلى طبقات متعددة تتراوح من الخلايا الأقل تمايزا الموجودة في القاعدة إلى الخلايا شديدة التمايز في المحيط. لزراعة أنسجة جلدية تحاكي الجوانب المورفولوجية والكيميائية الحيوية للبشرة الطبيعية ، يمكننا إنشاء نموذج جلدي عضوي.

للبدء ، خذ طبقا متعدد الآبار مع ملحق غشائي. أضف الخلايا الليفية الجلدية الممزوجة بالكولاجين إلى الملحق. احتضان لتسهيل تصلب مصفوفة الكولاجين لتضمين الخلايا الليفية وتقليد الحيز الجلدي للجلد.

بعد ذلك ، أضف تعليق الخلايا الكيراتينية فوق الطبقة الجلدية. احتضان اللوحة للسماح للخلايا الكيراتينية بالالتصاق بالحجرة الجلدية. استكمل المزرعة بوسط البشرة لبدء تكاثر الخلايا الكيراتينية وتشكيل طبقة البشرة.

أخيرا ، انقل الإدخالات إلى طبق جديد متعدد الآبار. أضف وسيطا طبقيا بحيث يغطي قاعدة البناء فقط ، وبالتالي إنشاء واجهة هواء سائل. عند الحضانة ، تسهل واجهة الهواء السائل تمايز الخلايا الكيراتينية إلى بشرة طبقية متعددة الطبقات.

في البروتوكول التالي ، سنقوم بإنشاء إعادة بناء الجلد العضوية ثلاثية الأبعاد مع نظائر الجلد والبشرة من خلايا الجلد البشري المعزولة.

لتوليد النظير الجلدي لإعادة بناء الجلد ، ضع إدخالات غشاء بحجم المسام 8 ميكرومتر في صفيحة زراعة الخلايا المكونة من 24 بئرا. لكل إدراج ، أعد تعليق 100