موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:02 دقيقة • April 30th, 2023
- في نماذج الفئران السرطانية التجريبية ، يشبه السرطان المستحث في السرطان البشري في النمط الظاهري. أنها توفر منصة فعالة لتقييم فعالية العلاجات المحتملة. للحث على نموذج تسرطن الجلد المكون من خطوتين ، أولا ، قم بإعداد فأر مخدر يعاني من نقص المناعة في وضع الانبطاح. احلق فراءه لكشف الجلد الأساسي. في الخطوة الأولى ، ضع عاملا قويا لبدء الورم على الجلد الظهري المكشوف.
تحتوي بصيلات الشعر هذه في مرحلة الراحة أو التيلوجين على غدد دهنية غير نشطة. يسمح النقص الناتج في تدفق الدهون بتراكم المركب داخل بصيلات الشعر هذه. ينتشر المركب في الخلايا المحيطة ويحفز طفرة جينية مستهدفة ، بشكل أساسي في الخلايا الجذعية لبصيلات الشعر أو الخلايا الجذعية للخلايا الكيراتينية الأولية. يتسبب التعبير الجيني المتغير في بدء الورم في هذه الخلايا.
في الخطوة الثانية ، ضع عاملا مناسبا لتعزيز نمو الورم على الجلد الظهري بشكل متكرر خلال الفترات الزمنية المطلوبة. تحفز المادة الكيميائية التوسع في عدد الخلايا البدء. يؤدي التكاثر المستمر للخلايا إلى تكوين نتيبات مسرطنة تسمى الورم الحليمي.
في البروتوكول التالي ، نعرض توليد نموذج فأر لسرطان الجلد على مرحلتين باستخدام المواد الكيميائية DMBA ، مطفرات ، و TPA ، وهو عامل معزز للنمو.
- قبل البدء في التجربة ، ضع أي فئران عدوانية تتراوح أعمارها بين 7 و 9 أسابيع في أقفاص منفصلة لتجنب القتال والآفات الجلدية. لتحريض الورم الحليمي الجلدي ، أولا ، حلق جلود ظهر التجربة ، ووزن الفئران بشكل فردي. بعد ثمان وأربعين ساعة من الحلاقة ، استخدم ماصة لتطبيق 50 ميكروغراما من DMBA في 200 ميكرولتر من الأسيتون على المنطقة المحلوقة لكل فأر مخدر.
لتعزيز الورم الحليمي الجلدي ، بعد سبعة أيام من تطبيق DMBA ، عالج الجلد ب 5 ميكروغرام من TPA في 200 ميكرولتر من الأسيتون ، مرتين في الأسبوع حتى نهاية التجربة. افحص بحثا عن الورم الحليمي وقم بتصوير حجم كل ورم حليمي على الخريطة كل أسبوع.
تعتبرالكتلة الملموسة التي يزيد قطرها عن 1 ملم ورما حليمية إذا استمرت لفترة أطول من أسبوع واحد.