موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 5:54 دقيقة • April 30th, 2023
- يتكون الجلد من خلايا مختلفة تملأ طبقاته المختلفة. الخلايا الصباغية ، الخلايا المنتجة للميلانين ، موضعية عند تقاطع البشرة والجلد ، بينما توجد الخلايا الليفية ، الخلايا المولدة للنسيج الضام ، في الأدمة.
لعزل الخلايا الصباغية والخلايا الليفية بسرعة ، ابدأ بأخذ جذع جرو فأر قتل رحيم. قطع الجلد بطنيا من خلال طول الجذع. قشر الجلد الذي يحتوي على طبقة البشرة والجلد وافرم الأنسجة إلى قطع صغيرة.
الآن ، عالج باستخدام عازل الهضم الذي يحتوي على إنزيمات التربسين والكولاجيناز التي تحلل المصفوفة خارج الخلية ، وتطلق الخلايا في حالة تعليق. جهاز طرد مركزي لتكوير الخلايا والتخلص من المادة الطافية. أعد تعليق الخلايا في وسط الخلايا الصباغية وانقل التعليق إلى صفيحة متعددة الآبار.
أثناء الزراعة ، تلتصق معظم الخلايا الليفية بقاع البئر ، بينما تظل الخلايا الصباغية وخلايا البشرة الأخرى معلقة. استنشق الخلايا العالقة وأضف وسائط خاصة بالخلايا الليفية إلى مزرعة الخلايا الليفية لتعزيز نموها. انقل المعلق المستنشق إلى بئر جديد مطلي بالكولاجين للمساعدة في تكوين ثقافة ملتصقة.
مكمل مع الوراثة ، وهو مضاد حيوي ، وأضف وسائط نمو الخلايا الصباغية الطازجة. يقضي Geneticin بشكل انتقائي على أي خلايا ليفية متبقية ، بينما تعزز الوسائط نمو الخلايا الصباغية على أنواع خلايا البشرة الأخرى. في البروتوكول التالي ، سنقوم بعزل الخلايا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية