فحص الزرع تحت الجلد: طريقة لزرع خلايا الورم الميلانيني من متبرع إلى نموذج سمكة الزرد المتلقية

- أثناء فحص زرع الورم الميلانيني ، يتم زرع الخلايا السرطانية من أسماك الزرد الحاملة للورم في نموذج متلقي يعاني من نقص المناعة لدراسة تطور الورم. ابدأ بأخذ سمكة زرد متبرعة حاملة للورم الرحيم واستئصال الورم جراحيا من جسمه. انقل الورم إلى طبق بتري يحتوي على مخزن مؤقت مناسب وقم بفرمه إلى قطع صغيرة.

بعد ذلك ، قم بتقطيع شظايا الورم باستخدام ماصة. هذا يفصل قطع الورم إلى خلايا فردية. الآن ، قم بتحميل تعليق الخلية السرطانية في حقنة. بعد ذلك ، قم بإعداد متلقي يعاني من نقص المناعة Casper Zebrafish على ورق ترشيح. يفتقر هذا النوع المتحور من أسماك الزرد الذي يعاني من نقص التصبغ إلى الخلايا الصباغية والقزحية ، مما يجعله شفافا ومتعدد الاستخدامات لتجارب التصوير والزرع.

بعد ذلك ، قم بحقن معلق خلية الورم الميلانيني المحمل مسبقا تحت الجلد في المنطقة فوق التجويف البريتوني ، في منتصف الطريق بين الدماغ الخلفي والزعنفة الظهرية لأسماك الزرد كاسبر. الآن ، انقل السمكة المتلقية إلى الماء وراقبها لمراقبة تطور الورم. يساعد الجسم الشفاف لأسماك الزرد في سهولة تصور الأورام المتطورة.

في البروتوكول التالي ، سنعرض زرع خلايا الورم الميلانيني من متبرع بأسماك الزرد الحاملة للورم المعدلة وراثيا إلى نموذج أسماك كاسبر المتلقي الذي يعاني من نقص المناعة.

- بعد تشعيع سمكة كاسبر المتلقية التي يبلغ عمرها من 2 إلى 3 أشهر مع 25 G