القولون الصاعد ستينت الصفاق (CASP) -- نموذج موحد لالإنتان البطن متعدد المكروبات

الهدف العام من هذا الإجراء هو إحداث إنتان بطني عن طريق إدخال دعامة في القولون الصاعد للفأر. يتم تحقيق ذلك أولاً من خلال تحضير القولون الصاعد، ثم إدخال كانيولا معدلة في القولون وتثبيتها في مكانها.

وأخيرًا، يتم إزالة الدعامة وإعادة القولون إلى التجويف البريتوني. وفي النهاية، يمكن الحصول على نتائج تظهر حدوث تعفن الدم من خلال قياس السيتوكينات والتعداد البكتيري في البلازما. وتتمثل الميزة الرئيسية لهذه التقنية مقارنة بالطرق الحالية مثل الربط والثقب، في إمكانية معايرة درجة تعفن الدم ومعدل الوفيات من خلال حجم الدعامة التي يتم إدخالها.

وبوجه عام، قد يواجه الأشخاص المبتدئون في هذه الطريقة بعض الصعوبات لأن التقنيات الجراحية المجهرية تتطلب قدراً من التدريب. وحتى يتم إتقان الأداء، ابدأ بتخدير الفأر عن طريق حقن سائل مخدر في التجويف البريتوني ووضع الحيوان في وضعية الاستلقاء الظهري. يجب تثبيت أقدام الفأر بشريط لاصق على اللوحة لضمان استقرار وضعية الحيوان أثناء العملية.

لهذا الإجراء، قم بتعديل قنية وريدية (IV cannula)، والتي تُستخدم عادةً للحقن الوريدي لدى البشر، وقم بنحت أنابيبها البلاستيكية بشكل دائري على بُعد 2 mm من طرفها. بعد تطهير جلد بطن الفأر جيداً، قم بإجراء شق طولي على طول الخط الناصف بطول 15 mm تقريباً. افتح التجويف البريتوني عن طريق شق عضلات البطن والبريتون على طول الخط الأبيض (linear alba).

حدد القطب التالِي واستخدم مسحات قطنية لسحب الأعور واللفائفي النهائي والقولون الصاعد بعناية خارج تجويف البطن. على مسافة 15 millimeters من الصمام اللفائفي الأعوري، اثقب جدار القولون الصاعد باستخدام خيط جراحي من مقاس seven oh. ثبت الخيط على جدار القولون بعقدتين جراحيتين.

قم بثقب القولون الصاعد باستخدام كانيولا مجهزة، على مسافة تتراوح بين 1 إلى 2 mm دانيًا من غرزة 7-0. أدخل الكانيولا بعناية في القولون حتى يصل الأخدود والأنبوب البلاستيكي إلى مستوى الـ cirr.

ضع النهايات الحرة لخيط الجراحة 7-0 حول الكانيولا وقم بعمل عقدة مزدوجة تماماً داخل الأخدود المجهز في الأنبوب البلاستيكي. استخدم إبرة خيط الجراحة 7-0 وقم بخياطتها عبر الجدار المضاد للمساريق في القولون بشكل متتابع. قم بعمل عقدتين جراحيتين لتثبيت الأنبوب البلاستيكي وجدار القولون بشكل إضافي.

اقطع نهايات خيوط الجراحة. اسحب الجزء الحديدي من الكانيولا قليلاً، ثم اقطع الأنبوب البلاستيكي من نقطة قريبة من خيط التثبيت 7.0. الآن، قم بدفع البراز بعناية من الأعور باتجاه دعامة القولون باستخدام مسحات قطنية حتى تظهر كمية صغيرة من البراز فوق الدعامة.

أعد الأمعاء إلى التجويف البريتوني وقم بإنعاش السوائل عن طريق إعطاء 0.5 milliliters من المحلول الملحي داخل البريتون. أغلق البريتون بغرزة مستمرة. أغلق الجلد بغرز منفردة لتسكين الألم.

يجب إجراء الحقن تحت الجلد لمادة مسكنة قوية مثل buprenorphine إذا لزم الأمر، ثم يُعاد الحيوان إلى قفصه الذي يجب أن يحتوي على الطعام والماء. بعد خمس ساعات من إجراء casp، يتم تحضير الفأر وتخديره مرة أخرى لإجراء التدخل الجراحي على الحيوان. قم بفتح غرز جدار البطن.

أخرج القولون الصاعد مع الدعامة المدرجة بعناية، ثم اقطع الغرز التي تثبت الدعامة وقم بإزالتها. أغلق الفتحة الموجودة في القولون باستخدام غرز عكوسة مفردة. أعد الأمعاء إلى التجويف البطني واغسل السلم مرتين باستخدام 5 mL من المحلول الملحي.

أغلق الصفاق باستخدام غرزة جراحية مستمرة. أغلق الجلد بغرز منفردة لتسكين الألم. قم بإعطاء مادة مسكنة قوية عن طريق الحقن تحت الجلد بشكل منتظم.

أعد الحيوان إلى قفصه مع توفير كمية وافرة من الطعام والماء خلال أول يومين بعد العملية. راقب الحيوانات كل ست ساعات؛ ففي غضون ساعات قليلة بعد عملية CASP، تظهر على الحيوانات علامات سريرية لبداية تعفن الدم. وتعتمد معدلات البقاء على قيد الحياة بعد جراحة CASP على قطر الدعامة التي تم إدخالها؛ حيث تؤدي عملية CASP بمقياس 14 إلى معدل وفيات بنسبة 100%، وتؤدي عملية CASP بمقياس 16 إلى وفيات بنسبة 70%، بينما تؤدي عملية CASP بمقياس 18 إلى وفيات بنسبة 50%.

ترتبط عملية CASP الوهمية بنسبة بقاء تبلغ 100%. وتعتمد نتيجة عملية CASP على الفترة الزمنية؛ فبعد عملية CASP، وعند إزالة الدعامة، يؤدي التدخل بعد ثلاث ساعات من عملية CSP إلى معدل بقاء يصل إلى 45%. أما إذا تمت إزالة الدعامة بعد خمس ساعات من عملية csp، فإن 10% فقط من الحيوانات تنجو من الإجراء. وتؤدي إزالة الدعامة بعد تسع ساعات إلى نسبة وفيات تبلغ 100%. وتؤدي عملية CASP الوهمية إلى بقاء بنسبة 100%.

يظهر الفحص العياني لموقع البطن بعد 24 ساعة من CSP علامات نموذجية لالتهاب الصفاق، والوذمة، وتوسع الأوعية الدموية، والالتهاب، وتحديد حاد لجدار الأمعاء في بقع متفرقة، وشلل الأمعاء، والسوائل الحرة، والإفرازات الإنتانية. ويمكن إثبات العدوى الجهازية من خلال التحليل البكتيريولوجي بعد 12 ساعة من csp، حيث يمكن الكشف عن كميات بكتيرية هائلة في غسيل الصفاق، والدم، والكبد، والرئة، والطحال، والكلى.

تتجلى حالة الإنتان الناجم عن الصدمة الجراحية (CSP) في إطلاق موضعي وجهازي للسيتوكينات والكيموكينات المحفزة والمضادة للالتهابات. فبعد مرور 12 ساعة من الصدمة الجراحية، يمكن قياس كميات كبيرة من T-N-F-I-L one beta و IL six و IL 10 و MCP one وغيرها باستخدام تقنية Eliza في الدم، وكذلك في السوائل الطافية لمعلقات الأعضاء مثل الكبد والرئة والطحال والكلية. وبمجرد إتقان هذه التقنية، يمكن إتمامها في غضون 10 دقائق إذا نُفذت بشكل صحيح.

بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن تكون لديك معرفة جيدة بكيفية إحداث تعفن الدم البطني باستخدام نماذج SSP وSSP مع التدخل. كان هذا كل شيء. شكراً للمشاهدة وبالتوفيق في تجاربكم.